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UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE ELISA UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE ELISA? Reação Antígeno:Anticorpo Marcação com Enzimas (Ex.: Peroxidases ou Fosfatases Alcalinas) Anticorpos Monoclonais ou Policlonais Ensaio Imunossorvente Ligado a Enzima (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay; ELISA) TIPOS DE ELISA - ELISA DIRETO TIPOS DE ELISA - ELISA DIRETO TIPOS DE ELISA - ELISA DIRETO Anticorpo Primário específico para o antígeno que está sendo pesquisado No ELISA direto, o Anticorpo PRIMÁRIO é o anticorpo de marcação e está conjugado com a Enzima TIPOS DE ELISA - ELISA DIRETO + cor = + Enzima = + Ac Primário = + Antígeno ELISA - QUANTIFICAÇÃO Anticorpo Primário específico para o antígeno que está sendo pesquisado Anticorpo Secundário específico para a porção Fc do Anticorpo Primário No ELISA indireto, o Anticorpo SECUNDÁRIO é o anticorpo de marcação e está conjugado com a Enzima TIPOS DE ELISA - ELISA INDIRETO Mais de um Anticorpo Secundário pode se ligar à porção Fc do Ac Primário Intensificação do Sinal TIPOS DE ELISA - ELISA INDIRETO Anticorpo de Captura revestindo os poços Testar a presença de antígenos nas soluções Maior especificidade, menor ruído Pode ser Direto ou Indireto TIPOS DE ELISA - ELISA SANDUÍCHE PASSO A PASSO
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