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Você acertou 6 de 10 questões Verifique o seu desempenho e continue treinando! Você pode refazer o exercício quantas vezes quiser. Verificar Desempenho A B C D E 1 Marcar para revisão (adaptado de FGV - 2010 - FIOCRUZ - Médico alergista e imunologista) "A citometria de fluxo é uma tecnologia que tem sido utilizada mundialmente em diversas instituições de pesquisas e em laboratórios de análises clínicas, aplicada a uma variedade de estudos, principalmente nas áreas da Imunologia, Hematologia e Imunogenética. A evolução e modernização da citometria de fluxo vem acompanhando o progresso do desenvolvimento tecnológico e da ciência mundial" (fonte: BRASIL. MS. CUNHA, C.F et al. Citometria de Fluxo: Imunofenotipagem e Avaliação da Produção de Citocinas. 2012., disponível em: https://www.ioc.fiocruz.br/picf/PROD_LITERAT/Apostilas/ApostilaCMFCurso_Ferias2012.pdf. Acesso em 15/02/2022). A citometria de fluxo com o equipamento de sorting permite a análise da marcação de células com anticorpos acoplados a fluorocromos, sem possibilidade de recuperação das células analisadas. a análise da marcação de células com anticorpos acoplados a fluorocromos, com possibilidade de recuperação das células analisadas, porém estas células não são mais viáveis e morrem se cultivadas in vitro. a análise da marcação de células com anticorpos acoplados a fluorocromos, com possibilidade de recuperação das células analisadas, desde que a marcação utilize um único fluorocromo. a análise da marcação de células com anticorpos acoplados a fluorocromos, com possibilidade de recuperação das células analisadas, que são viáveis e podem ser cultivadas in vitro. a análise da marcação de células com anticorpos acoplados a fluorocromos, sem possibilidade de recuperação das células analisadas, caso se utilize anticorpos marcados com mais de três fluorocromos distintos. Questão 1 de 10 Corretas (6) Incorretas (4) Em branco (0) 1 2 3 4 6 7 8 9 1 Lista de exercícios Métodos Laboratoriais Sair A B C D E Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado Justificativa: Na citometria de fluxo com o equipamento de sorting é possível resgatar as células pré-selecionadas, e tal separação pode de única linhagem celular ou então de diferentes populações. As linhagens recuperadas são viáveis, e dependendo da metodologia aplicada, em condições estéreis, independentemente da quantidade de fluorocromos utilizados no preparo da amostra. 2 Marcar para revisão A reação antígeno-anticorpo nem sempre é evidenciada por um fenômeno visível, entretanto, a presença de antígenos e anticorpos pode ser identificada por testes altamente sensíveis, empregando moléculas marcadas com compostos químicos definidos. Sobre esse assunto analise as assertivas a seguir. I. No ELISA competitivo a intensidade de coloração é inversamente proporcional a concentração da amostra. Porque II. Nessa técnica pesquisamos antígenos nas amostras pela competição com os antígenos conjugados ao sítio de ligação que estão imobilizados na placa, após a incubação com a amostra, uma maior coloração indica maior interação entre o anticorpo de captura e o antígeno marcado e uma menor interação com os antígenos na placa. Marque a alternativa que apresenta a relação correta entre as asserções I e II. As asserções I e II são proposições falsas. A asserção I é uma proposição verdadeira enquanto a II é falsa. As asserções I e II são proposições verdadeiras e a II é uma justificativa da I. A asserção I é uma proposição falsa e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I A B C D E Resposta incorreta Opa! A alternativa correta é a letra C. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado No ELISA competitivo podemos pesquisar antígenos em uma amostra biológica pela competição com antígenos conjugados ao sítio de ligação com o anticorpo que está imobilizado na fase sólida (placa). Ao final da reação, a intensidade de coloração é inversamente proporcional a concentração da amostra, pois indica que uma maior concentração de antígenos conjugados interagiu com os anticorpos presentes na placa, e assim a amostra apresentava uma menor concentração de antígenos. 3 Marcar para revisão As reações de precipitação são reações de interação com antígeno e anticorpo em que as respostas são visualizadas a olho nu, sem a necessidade de adição de reagentes marcados. Existem vários sistemas disponíveis para a prática da reação de precipitação, dentre estes, destacam-se a precipitação em meios líquidos, meios semissólidos, como ágar ou agarose, e outros suportes, tais como o acetato de celulose. Sobre as reações de precipitações analise as asserções. I. As reações de precipitação ocorrem entre antígenos adsorvidos à superfície de partículas inertes e anticorpos em solução, em que o precipitado pode ser visualizado a olho nú, quando há equilíbrio entre as concentrações de antígeno e anticorpo Porque II. O imunocomplexo é formado quando há equilíbrio entre as concentrações de antígeno e anticorpo, preenchendo o máximo de valências de ambos, no chamado efeito prozona. Marque a alternativa que apresenta a relação entre as assertivas I e II. As asserções I e II são proposições falsas. A asserção I é uma proposição verdadeira enquanto a II é falsa. As asserções I e II são proposições verdadeiras e a II é uma justificativa da I. A asserção I é uma proposição falsa e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I A B C D E Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado A reação de precipitação consiste no reconhecimento de antígenos solúveis com os anticorpos complementares também solúveis, formando um imunoprecipitado. O precipitado pode ser visualizado quando há equilíbrio entre as concentrações de antígeno e anticorpo, preenchendo o máximo de valências de ambos, no chamado ponto de equivalência. ----- 4 Marcar para revisão (Adaptada de FDC - 2014 - FIOCRUZ - Técnico Em Saúde Pública - Análise Clínica) A Intradermoreação de Montenegro (IDRM) é uma técnica imunológica que se fundamenta na visualização da resposta de hipersensibilidade celular tardia. Em relação à IDRM, é correto afirmar que: É usada no diagnóstico da hanseníase. A leitura da reação positiva deve ser feita em até 24 horas após aplicação do antígeno de Montenegro. O resultado do teste é dado pela medida da enduração que para ser considerada positiva deve sempre ter menos que 0,5mm em seu maior diâmetro. O antígeno de Montenegro trata-se de suspensão de Leishmania que deve ser aplicado por via subcutânea. Em áreas endêmicas, a IDRM positiva pode ser interpretada como leishmaniose anterior ou infecção anterior assintomática. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado A Pesquisa de Leishmaniose tegumentar é realizada pelo teste de Montenegro, no qual são aplicados no antebraço do paciente 0,1mL de antígeno do protozoário com agulhas e seringas estéreis, por via intradérmica. Após 18-72 horas caroços superiores a 5mm são indicativos de uma reação imune celular (Th1) no local e da exposição ao antígeno pesquisado, e pode ser interpretada como leishmaniose anterior ou infecção anterior A B C D E assintomática. A pesquisa a exposição à hanseníase é feita com o antígeno lepromina, ou antígeno de Mitsuda. 5 Marcar para revisão Sabemos que diferentes exames imunológicos para a detecção de antígeno e anticorpo utilizam reagentes marcados. Sobre as técnicas que utilizam esse tipo de imunoreagente, assinale a alternativa correta. Os testes de imunofluorescência só foram desenvolvidos pela propriedade de luminescência. Fluorescência é o nome dado ao fenômenoda molécula armazenar energia por longos períodos até sua emissão, mas se o período de emissão é mais curto, é conhecido como fosforescência. Após uma biópsia, foi solicitado um exame para verificar a proteína X nas células. No laboratório, optou-se pela pesquisa dessa proteína pela ligação com um anticorpo primário específico e a reação foi revelada pela utilização de um anticorpo anti-IgG marcado com biotina. A técnica utilizada foi a técnica direta da imuno-histoquímica. O radioimunoensaio pode detectar antígenos ou anticorpos pela competição entre a substância marcada com radioisótopo e a substância que se deseja analisar no sítio de ligação. Essa técnica é simples, barata, apresenta resultados sensíveis e específicos, mas só consegue detectar substâncias que estão em altas concentrações. No teste de ELISA, o bloqueio com o soro de cobaia é importante para retirar os excessos de reagentes que não estão ligados a nenhuma molécula e evitar assim qualquer tipo de ligação cruzada e interferências. No ELISA competitivo, podemos pesquisar antígenos em uma amostra biológica pela competição com antígenos conjugados ao sítio de ligação com o anticorpo que está imobilizado na fase sólida (placa). Ao final da reação, a intensidade de coloração é inversamente proporcional à concentração da amostra. Resposta incorreta Opa! A alternativa correta é a letra E. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado A alternativa correta é a E, que descreve o processo do ELISA competitivo. Nesse tipo de teste, antígenos presentes em uma amostra biológica competem com antígenos conjugados para se ligar ao anticorpo que está imobilizado na fase sólida (placa). Ao final da reação, a intensidade da coloração é inversamente proporcional à concentração do antígeno na amostra. Isso significa que quanto mais antígeno houver A B C D E na amostra, menos intensa será a coloração, pois mais antígenos da amostra terão se ligado ao anticorpo, deixando menos espaço para os antígenos conjugados. 6 Marcar para revisão (adaptado de FGV - 2010 - FIOCRUZ - Médico alergista e imunologista) "A citometria de fluxo é utilizada principalmente na área na imunologia, sendo aplicada em estudos de avaliação funcional e diferenciação de populações celulares; conteúdo de DNA e RNA; atividades enzimáticas; apoptose; produção de íons; citotoxicidade; modulação de receptores; distribuição populacional; produção de citocinas, entre outros." Fonte: adaptado de BRASIL. MS. CUNHA, C.F et al. Citometria de Fluxo: Imunofenotipagem e Avaliação da Produção de Citocinas. 2012., disponível em: https://www.ioc.fiocruz.br/picf/PROD_LITERAT/Apostilas/ApostilaCMFCurso_Ferias2012.pdf. Acesso em 15/02/2022). Sobre a utilização da citometria como estratégia de análise fenotípica, analise as afirmativas a seguir. I. Atualmente um citômetro de fluxo pode ser configurado para análises multiparamétricas com mais de cinco cores simultâneas. II. A citometria de fluxo é uma técnica tão versátil que detecta inclusive corantes histológicos como a hematoxilina e o vermelho do Nilo. III. O gráfico de pontos só pode ser utilizado para analisar células em suspensão pois cada ponto corresponde ao logaritmo de 10 células. Marque a alternativa que apresenta a(s) afirmativa(s) correta(s). I, apenas. II, apenas. III, apenas. I e II, apenas I e III, apenas Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado Na citometria de fluxo, pode-se realizar análises multiparamétricas, utilizando diversos fluorocromos ao mesmo tempo, a quantidade a ser utilizada depende da composição A B C D E estrutural do equipamento, a depender dos laseres e filtros. Além disso, precisa utilizar células em suspensão independente do gráfico a ser utilizado na pós-aquisição. No entanto, não detecta os corantes Hematoxilina e vermelho de Nilo e sim fluorcrômos. No gráfico da citometria, cada ponto representa uma única célula. 7 Marcar para revisão Sobre as reações de precipitação, analise as afirmativas a seguir: I. As reações de precipitação ocorrem entre antígenos naturais insolúveis ou adsorvidos à superfície de partículas inertes e anticorpos. II. O precipitado pode ser visualizado quando há equilíbrio entre as concentrações de antígeno e anticorpo, preenchendo o máximo de valências de ambos. III. O que caracteriza as reações de precipitação é a reação entre um antígeno multivalente solúvel e um anticorpo bivalente, ocorrendo a formação de rede de complexos antígeno- anticorpo na região conhecida como prozona. Estão corretas as afirmativas: I. II. III. I e II. II e III. Resposta incorreta Opa! A alternativa correta é a letra B. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado A afirmativa II é a correta. Ela explica que o precipitado, que é o produto sólido formado durante uma reação química, pode ser visualizado quando há um equilíbrio entre as concentrações de antígeno e anticorpo. Isso ocorre quando o máximo de valências de ambos é preenchido, ou seja, quando todos os locais disponíveis para ligação em uma molécula estão ocupados. As outras afirmativas contêm informações incorretas ou incompletas sobre as reações de precipitação. A B C D E 8 Marcar para revisão Durante a rotina laboratorial, chegou um paciente com suspeita de síndrome gripal, e assim foi coletado um teste rápido para COVID. No Kit a amostra foi colocada no orifício S, e foi testado IgM (M) e IgG(G). O IgM é indicativo de infecção aguda e o IgG já indica a fase tardia da infecção e o C indica o controle do teste. Após o tempo de incubação foi verificado o seguinte resultado: Marque a alternativa que apresenta o resultado do paciente. Negativo, pois o aparecimento das três bandas configura um resultado negativo. O teste foi inválido, devendo ser repetido, uma vez que as três bandas foram positivas. Negativo, pois o aparecimento das três bandas configura um resultado negativo. Como a banda C não poderia ter aparecido, deve ser repetido, mas o paciente já pode ser comunicado que não está com COVID. Positivo para IgM e IgG, mas como a banda C não poderia ter aparecido, deve ser repetido, porém o paciente já pode ser comunicado que está com COVID. Positivo para IgM e IgG, e válido pois a banda C também foi positiva, assim o paciente já pode ser comunicado que está com COVID. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado O teste rápido é constituído por uma fase sólida (membrana porosa), onde ocorre a interação antígeno-anticorpo e é o local onde estão presentes os elementos de captura (antígenos ou anticorpos específicos) fixados na membrana e uma fase móvel com o deslocamento da amostra por capilaridade. Quando houver reconhecimento antígeno- anticorpo, na região Teste aparece uma banda, no nosso caso G e M indica a positividade para IgG e IgM, e indica que o paciente está com COVID. Após a região teste, temos uma região controle, com anticorpos anti-IgG que são capazes de se ligar a todos os anticorpos livres presentes na amostra. O aparecimento da linha controle é essencial, pois indica que houve migração da amostra e deve estar presente nos A B C D E resultados positivos e negativos. O não aparecimento da linha controle invalidada o teste. 9 Marcar para revisão Qual é a técnica sorológica em que o antígeno é fixado a um suporte sólido, seguido do anticorpo e um anticorpo secundário ligado a uma enzima: Precipitação Imunodifusão radial ELISA Imunoeletroforese Imunodifusão dupla Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado A técnica sorológica descrita no enunciado é o ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Esta técnica envolve a fixação de um antígeno a um suporte sólido, seguido da adição de um anticorpo específico e, posteriormente, de um segundo anticorpo ligado a umaenzima. As outras técnicas mencionadas nas alternativas funcionam de maneira diferente. A precipitação, por exemplo, envolve a combinação de antígeno e anticorpo solúveis para produzir complexos insolúveis visíveis. A imunodifusão, por sua vez, consiste na interação de antígenos solúveis com anticorpos, formando um imunoprecipitado que fica preso no gel de acordo com o peso molecular. A imunoeletroforese combina a eletroforese e a difusão dupla, sendo uma técnica de imunoprecipitação em meio semissólido (gel) que associa as técnicas de imunodifusão e eletroforese. 10 Marcar para revisão (Adaptado de COMPERVE- UFRN- 2015- farmacêutico bioquímico) O teste rápido para detecção do HIV tem como princípio metodológico a imunocromatografia de fluxo lateral. A B C D E Esse teste apresenta a vantagem de não exigir grandes expertises dos executores, com resultado em cerca de 20 minutos. Em relação aos novos testes rápidos para detecção do HIV, marque a alternativa correta. Esses testes apresentarem alta sensibilidade com baixa incidência de resultados falsos negativos. São muito sensíveis, mas apresentam baixa especificidade e, consequentemente, não se prestam ao diagnóstico. Um resultado negativo para a pesquisa de anticorpos garante que o paciente não está infectado. No momento da análise do teste é essencial o aparecimento da banda controle, pois garante que houve a migração da amostra. O teste rápido é constituído por duas fases uma sólida (membrana) e uma móvel, em que ocorre o deslocamento das substâncias por capilaridade e antígeno e anticorpo tem movimentos contrários. Resposta incorreta Opa! A alternativa correta é a letra D. Confira o gabarito comentado! Gabarito Comentado O teste rápido é constituído por uma fase sólida (membrana porosa), onde ocorre a interação antígeno-anticorpo e é o local onde estão presentes os elementos de captura (antígenos ou anticorpos específicos) fixados na membrana e uma fase móvel com o deslocamento da amostra por capilaridade. Após a região teste, temos uma região controle, com anticorpos anti-IgG que são capazes de se ligar a todos os anticorpos livres presentes na amostra. O aparecimento da linha controle é essencial, pois indica que houve migração da amostra e deve estar presente nos resultados positivos e negativos. O não aparecimento da linha controle invalidada o teste. Atualmente, os testes rápidos apresentam alta sensibilidade e especificidade podendo ser utilizados para o diagnóstico, no entanto esse teste pode apresentar falso negativo, uma vez que um teste negativo não quer dizer que o paciente esteja doente, sendo necessário repetir o exame.