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Ácidos Nucleicos e Nucleotídeos Prof. Dra Keny G. Tirapeli Ciências Biológicas e Nutrição Bioquímica metabólica ÁCIDOS NUCLEICOS Fita dupla, código composto por 4 “letras” que, em diferentes sequências, codificam nossa informação genética de forma única. Molécula em formato de fita simples que leva instruções do DNA para a célula produzir as proteínas. ÁCIDOS NUCLEICOS • Polímeros de nucleotídeos • Formados por monômeros que são denominados →nucleotídeos • Nomenclatura: • Funções: • Armazena toda a informação genética, síntese proteica • Determinação das características dos indivíduos: cor dos olhos, cor da pele, estatura, doenças hereditárias, etc. material genético ou hereditário de todos os seres vivos Eletroforese • Técnica de laboratório usada para separar moléculas como DNA, RNA ou proteínas com base no tamanho e na carga elétrica, aplicando uma corrente elétrica através de um gel ou solução; • Com a aplicação do campo elétrico as moléculas migram no gel, o que permite sua identificação e quantificação; • Aplicabilidade: testes de paternidade, diagnósticos, mutações, ciência forense, perfil genético, diagnósticos de anemia https://www.minaslabor.com.br/eletroforese-o-que-e-e-quais-sao-os-principais-equipamentos/ https://www.lojaroster.com.br/blog/tudo-eletroforese/ ESTRUTURA DOS NUCLEOTÍDEOS Estrutura dos nucleotídeos Grupo fosfato • Nucleotídeo monofosfato • Nucleotídeo difosfato • Nucleotídeo trifosfato Comum tanto ao DNA como ao RNA. Estrutura dos nucleotídeos Pentose “Açúcar” No DNANo RNA → São monossacarídeos (oses) de cinco carbonos em sua cadeia. Estrutura dos nucleotídeos Bases nitrogenadas PÚRICAS (PURINAS) PIRIMÍDICAS (PIRIMIDINAS) Anel duplo Anel único Compostos orgânicos nitrogenados de cadeia fechada ligam as duas fitas do DNA. DOGMA CENTRAL: “caminho que a vida usa para ler instruções dos nossos genes”. Replicação Pareamento do DNA Fitas de DNA têm sentidos inversos : um está na posição chamada 5’-3’, a outra no sentido 3’-5’. fitas antiparalelas em formato helicoidal, complementares entre si, que armazenam a informação genética dos indivíduos Sequenciamento de DNA codifica a sequência de nucleotídeos que compõem o material genético. DNA estrutura Pontes de hidrogênio Entre as bases nitrogenadas Ligação fosfodiéster: Liga um nucleotídeo a outro fita dupla hélice ligadas por forças moleculares (modelo de Watson e Crick, 1972). Promove a Duplicação ou Replicação: Sintetiza cópias idênticas de si mesmo; Promove a transcrição: Sintetiza moléculas de RNAm (mensageiro); RNA - estrutura Fita simples Tipos de RNA Conduz a mensagem do núcleo para o citoplasma Migram para o citoplasma, associam-se a proteínas e formam os ribossomos. É nos ribossomos que a sequência de bases do RNA mensageiro é interpretada e a proteína, de fato, sintetizada Transporta os aminoácidos que serão utilizados na formação das proteínas até os ribossomos DOGMA CENTRAL Helicase: responsável por "abrir" a dupla hélice de DNA, separando as duas fitas paralelas para que os processos moleculares possam acontecer; DNA Polimerase: copia uma fita de DNA molde para gerar uma nova fita de DNA idêntica (replicação ou duplicação); RNA polimerase: lê uma fita molde de DNA para sintetizar uma molécula de RNA (transcrição) DUPLICAÇÃO OU REPLICAÇÃO DO DNA Uma molécula de DNA dá origem a uma outra molécula, idêntica a molécula mãe. A duplicação é semiconservativa, ou seja, cada molécula formada conserva uma das fitas da molécula-mãe. SÍNTESE PROTEÍCA TRANSCRIÇÃO síntese de uma molécula de RNAm (mensageiro) pelo DNA. Esta molécula contém uma mensagem contida nos “códons” (trincas de bases), para a síntese de uma proteína específica. Ocorre no núcleo. Região promotora: abre o DNA, servindo como molde RNA polimerase TRADUÇÃO: decodifica o RNAm em aminoácidos, formando proteínas o DNA é "transcrito" pelo RNA mensageiro (RNAm) e depois a informação é "traduzida" pelos ribossomos (RNA ribossômico e moléculas de proteínas) e pelo RNA transportador (RNAt), que transporta os aminoácidos, cuja sequência determinará a proteína a ser formada. SÍNTESE PROTEÍCA Códons (3 nucleotídeos) - aminoácidos Vídeo: https://www.youtube.com/watch?v=1ejpvZ9zzGA 64 combinações diferentes de códons à partir de 20 aminoácidos http://www.youtube.com/watch?v=1ejpvZ9zzGA http://www.youtube.com/watch?v=1ejpvZ9zzGA Genoma Humano • É a totalidade do material genético de um organismo, ou seja, a soma de genes que determina as características e como funciona um ser vivo; • Patrimônio genético armazenado no conjunto de seu DNA ou de seus cromossomos. O corpo humano está constituído por bilhões de células, em cada uma destas células existem 46 cromossomos O genoma herdado por cada indivíduo vem metade do pai e a outra metade da mãe Projeto Genoma Humano • Consórcio internacional de pesquisas liderado pelos Estados Unidos que se iniciou em 1990; • Coordenado 13 anos pelo Departamento de Energia do Instituto Nacional de Saúde dos Estados Unidos, reunindo equipes de pesquisa e laboratórios de vários países • Projetado para durar 15 anos, com o objetivo de identificar e fazer o mapeamento dos genes existentes no DNA das células do corpo humano, determinar as sequências de bases químicas que compõem o DNA humano e armazenar essas informações em bancos de dados acessíveis. • Custo inicialmente projetado: US$ 3 bilhões De quem foi o genoma sequenciado pelo Projeto Genoma Humano? A maior parte da sequência veio de uma pessoa de ascendência mista. Especificamente, 70% da sequência original do genoma humano de referência foi gerada a partir do DNA desse indivíduo, com os 30% restantes vindos de uma combinação de 19 outros indivíduos de ascendência majoritariamente europeia. Genomas de diferentes povos. Amostras de doadores anônimos, oriundos de diferentes grupos étnicos. Em 2007, foi descrita a primeira sequência genômica completa diploide de um único indivíduo Decifrar o código genético é compreender as dezenas de milhares de genes que compõem o DNA humano Compreender esses mecanismos, inclusive o de doenças, para que se possa aplicar tecnologia para alterar certas instruções com vistas a garantir uma melhoria na qualidade de vida do organismo. Para o mapeamento, são feitos diagramas descritivos de cada cromossomo humano, dividindo-os em fragmentos menores, ordenando em suas respectivas posições nos cromossomos. O passo seguinte é determinar a sequência das bases de cada um dos fragmentos ordenados, a fim de descobrir todos os genes na sequência do DNA e desenvolver meios de usar esta informação para estudo da biologia e da medicina. Um mapa genômico descreve, ainda, a ordem dos marcadores e o espaçamento entre eles, em cada cromossomo. NAD+ https://www.youtube.com/watch?v=gG7 uCskUOrA https://www.youtube.com/watch?v=TNKW gcFPHqw Doença falciforme Uma das enfermidades genéticas e hereditárias mais comuns no Brasil A mutação decorre da substituição de uma base nitrogenada, a adenina (A), por timina (T), no códon do gene beta globina, que passa de GAG para GTG. Provoca a substituição do sexto aminoácido da cadeia, o ácido glutâmico, pela valina. A substituição de um único aminoácido na cadeia beta leva a hemoglobina S a assumir uma configuração diferente, causa a deformação das hemácias, fazendo com que assumam a forma de foice sickle (em inglês, foice), surgindo então a sigla HbS. Doença falciforme Quando a hemoglobina S é desoxigenada, a substituição do ácido glutâmico pela valina, na cadeia beta, resulta em uma interação hidrofóbica com outras moléculas de hemoglobina, desencadeando uma agregação em grandes polímeros – polimerização ou gelificação da hemoglobina S.