Aula 5_IMUNO CLINICA_

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Controle de qualidade -Métodos imunológicos 
Controle de 
qualidade -
Métodos 
imunológicos
Thaysse Leite
C O N C E I T O
O que é o diagnóstico sorológico?
O diagnóstico sorológico detecta e/ou quantifica anticorpos (ou 
antígenos) presentes no soro/plasma do paciente, evidenciando a 
resposta imune humoral frente a um agente infeccioso, uma vacina ou um 
autoantígeno.
• Baseia-se na especificidade da ligação antígeno-anticorpo
• Reflete um evento biológico indireto — a resposta do hospedeiro, não 
necessariamente o agente em si
• Complementa métodos diretos (cultura, biologia molecular, antigenemia)
R E A Ç Ã O A N T Í G E N O – A N T I C O R P O
Ag
Ac (Y)
Epítopo: região do antígeno reconhecida pelo anticorpo
Afinidade: força de ligação em um único sítio
Avidez: força global da ligação multivalente
Imunologia Clínica • Diagnóstico Sorológico e Controle de Qualidade 06
A P L I C A Ç Õ E S C L Í N I C A S
O papel do diagnóstico sorológico na prática clínica
Investigação diagnóstica
Triagem de infecções (ex.: HIV, hepatites, 
dengue, sífilis)
Diferenciação entre infecção aguda e pregressa
Apoio ao diagnóstico de doenças autoimunes 
(ex.: FAN, anti-CCP)
Acompanhamento do prognóstico
Monitoramento da evolução da resposta imune
Detecção de reinfecção ou reativação
Avaliação de atividade de doença autoimune 
ao longo do tempo
Eficácia terapêutica
Verificação de soroconversão pós-vacinal
Monitoramento de resposta a imunobiológicos
Confirmação de resposta terapêutica esperada
Imunologia Clínica • Diagnóstico Sorológico e Controle de Qualidade 07
V O C A B U L Á R I O E S S E N C I A L
Conceitos-chave da sorologia
Antígeno
Substância capaz de ser reconhecida por um anticorpo ou receptor de linfócito, 
desencadeando resposta imune.
Anticorpo (imunoglobulina)
Glicoproteína produzida por plasmócitos que se liga especificamente a um 
antígeno.
Epítopo
Porção específica do antígeno reconhecida pelo paratopo do anticorpo.
Afinidade x Avidez
Força de ligação em um único sítio (afinidade) versus força global de ligações 
múltiplas (avidez).
Reação cruzada
Ligação de um anticorpo a um antígeno estruturalmente semelhante ao original 
— fonte de falso-positivos.
Título de anticorpos
Maior diluição do soro em que ainda se detecta reatividade — indica intensidade 
da resposta.
Imunologia Clínica • Diagnóstico Sorológico e Controle de Qualidade 08
IMUNOENSAIOS
IMUNOENSAIOS
As técnicas são baseadas no reconhecimento antígeno-anticorpo e podem ser 
feitas a partir de reagentes marcados com algum corante fluorescente ou 
quimioluminescente, radioisótopos, enzimas que geram uma coloração ao final da 
reação ou reagentes não marcados, gerando uma interação que é visível a olho nu.
IMUNOENSAIO
➢ Aplicações
Diagnóstico clínico: HIV, hepatites virais, dengue, COVID-19, gravidez (hCG).
Dosagens hormonais: TSH, cortisol, insulina.
Detecção de drogas/medicamentos: monitoramento terapêutico e toxicologia.
Microbiologia e imunologia: pesquisa de antígenos ou anticorpos específicos.
IMUNOENSAIO
O princípio fundamental do imunoensaio é que anticorpos reconhecem antígenos de forma específica, formando um complexo imune.
O princípio fundamental do imunoensaio é que anticorpos reconhecem antígenos de forma 
específica, formando um complexo imune.
Para visualizar ou quantificar essa reação, é utilizado um marcador (enzima, fluorescência, 
radioisótopo, quimioluminescência ou partículas colorimétricas).
Existem diferentes tipos de imunoensaios:
ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay): usa enzimas que geram uma reação colorimétrica 
detectável.
Imunoensaio Fluorescente (FIA): utiliza moléculas fluorescentes como marcador.
Imunoensaio Radioativo (RIA): usa radioisótopos.
Imunoensaio por Quimioluminescência (CLIA): marcador gera emissão de luz, muito usado em 
laboratórios automatizados.
IMUNOENSAIOS
IMUNOENSAIOS
IgM é a primeira a ser produzida após um estímulo 
imunogênico, aumentando significativamente seus níveis 
plasmáticos durante a fase aguda da infecção.
Ela pode permanecer de 3-6 meses no organismo.
Ao longo 
diminuição
da infecção e de sua evolução, temos a 
da concentração plasmática de IgM e o
aumento da produção e detecção de IgG.
A IgG é, normalmente, encontrada no final de um 
processo agudo, permanecendo com níveis plasmáticos 
elevados durante longos períodos na fase denominada 
crônica e após a cura da doença.
Cinética de anticorpos: IgM x IgG
A resposta imune primária caracteriza-se pela ascensão precoce e transitória de IgM, seguida pela ascensão mais tardia e sustentada 
de IgG — base para a interpretação temporal de uma infecção.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Dia 0 Dia 5 Dia 10 Dia 15 Dia 20 Dia 30 Dia 60 Dia 90
Concentração relativa de anticorpos (%)
IgM IgG
LEITURA CLÍNICA
IgM + / IgG − → infecção aguda recente
IgM + / IgG + → fase de 
transição/recente
IgM − / IgG + → infecção pregressa ou 
imunidade
IgM − / IgG − → ausência de contato ou 
janela imunológica
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PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
JANELA IMUNOLÓGICA
Período de tempo entre a infecção por um patógeno e o momento em que o sistema imunológico produz 
anticorpos em níveis detectáveis por testes sorológicos.
Na prática, a pessoa está infectada, mas os testes tradicionais de detecção de anticorpos podem resultar 
em um falso-negativo, pois os níveis de anticorpos ainda não atingiram a concentração mínima para serem 
detectados.
A duração da janela imunológica varia conforme o patógeno e o tipo de teste realizado.
HIV: de 2 a 4 semanas
Hepatite B: de 1 a 2 meses
Para minimizar o risco de diagnósticos falsos-negativos durante a janela imunológica, testes que detectam 
diretamente o material genético do patógeno (PCR) podem ser utilizados.
Janela imunológica e soroconversão
Janela imunológica: período entre a infecção e a detecção de anticorpos em níveis mensuráveis. Durante essa 
janela, o paciente pode estar infectado e transmitir o agente, mesmo com sorologia negativa.
Exposição /
infecção
Dia 0
Janela
imunológica
Sorologia (-)
agente pode estar presente
Soroconversão
1ª detecção
de anticorpos
Sorologia
reagente estável
IgG detectável
Implicação prática: um resultado não reagente na janela imunológica não exclui infecção — pode ser necessário repetir o teste 
ou associar métodos diretos (ex.: biologia molecular).
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PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
Quando você faz um teste para qualquer doença, vamos pensar que você só tem duas possibilidades: 
ou está doente, ou está saudável.
O teste também tem somente 2 possibilidades: ou é positivo, ou é negativo.
Essas duas variáveis resultam em 4 possibilidades:
–Você está doente e o teste é positivo: verdadeiro positivo (VP).
–Você está saudável e o teste é negativo: verdadeiro negativo (VN).
–Você está saudável e o teste é positivo: falso positivo (FP).
–Você está doente e o teste é negativo: falso negativo (FN).
PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
Se olharmos para os totais de cada linha e cada 
coluna, vemos que:
–as colunas nos dizem quanta gente está doente (ND) 
ou saudável (NS).
–as linhas dizem quanta gente testa positivo (N+) ou
testa negativo (N-).
–o último quadro da diagonal nos indica o número total 
de pessoas na população (N).
PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
A sensibilidade e a especificidade de um teste dizem 
respeito às colunas:
A Sensibilidade do teste é a proporção entre o número de 
doentes que o teste consegue detectar (VP) e o número 
total de doentes (ND). Em outras palavras, é a 
probabilidade de o teste ser positivo para uma pessoa 
doente.
A Especificidade informa qual a proporção entre o número 
de pessoas saudáveis que o teste detecta como “negativas” 
(VN) e o número total de pessoas saudável (NS). Em outras 
palavras, é a probabilidade de o teste ser negativo para 
uma pessoa saudável.
PARÂMETROS IMPORTANTES
Um teste rápido de triagem para HIVprecisa ter alta sensibilidade, pois é importante não deixar passar pessoas infectadas.
Um teste rápido de triagem para HIV precisa ter alta sensibilidade, pois é importante não deixar 
passar pessoas infectadas.
Um teste altamente sensível → tem poucos falsos negativos.
Pergunta que a sensibilidade responde:
Entre as pessoas que REALMENTE têm a doença, quantas o teste consegue identificar como 
positivas?
PARÂMETROS IMPORTANTES
Um teste confirmatório para HIV precisa ser altamente específico, para evitar diagnosticar como doente alguém que não tem a infecção.
Um teste confirmatório para HIV precisa ser altamente específico, para evitar diagnosticar como 
doente alguém que não tem a infecção.
Um teste altamente específico → tem poucos falsos positivos.
Pergunta que a especificidade responde:
Entre as pessoas que NÃO têm a doença, quantas o teste consegue identificar corretamente como 
negativas?
PARÂMETROS IMPORTANTES
➢ Diferença principal
Sensibilidade: evita falsos negativos → bom para triagem. 
Especificidade: evita falsos positivos → bom para confirmação.
➢ Exemplo clínico resumido
Um paciente faz um teste para uma doença:
Se o teste tem alta sensibilidade, dificilmente alguém doente será considerado saudável.
Se o teste tem alta especificidade, dificilmente alguém saudável será considerado doente.
PARÂMETROS IMPORTANTES
O teste ideal seria aquele que apresentasse 100% de sensibilidade e 100% de especificidade.
O teste ideal seria aquele que apresentasse 100% de sensibilidade e 100% de especificidade.
Assim, teríamos apenas dois resultados possíveis:
• negativo (o indivíduo não estaria doente)
• positivo (o indivíduo estaria doente)
Portanto, não teríamos o falso-negativo ou o falso-positivo.
Sensibilidade e especificidade perfeitas significariam que o teste identificaria corretamente
todos os indivíduos com e sem a doença, sem nenhum erro.
É POSSÍVEL?
PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
É praticamente impossível termos um teste 100% específico e 100% sensível devido a várias limitações técnicas e 
biológicas. Busca-se um equilíbrio entre sensibilidade e especificidade que seja clinicamente aceitável, mas a 
perfeição absoluta não é alcançável.
Limitações:
1.Limitações biológicas
• Os marcadores usados em testes (anticorpos, antígenos, DNA/RNA, proteínas, metabólitos) não são exclusivos 
de uma única doença.
• Muitas vezes, diferentes doenças ou condições compartilham características semelhantes → isso pode 
gerar reações cruzadas (falso positivo) ou falha na detecção (falso negativo).
2.Variações individuais
• Cada organismo responde de forma diferente a uma infecção ou condição.
• Por exemplo, em fases iniciais da doença, a quantidade de antígeno ou anticorpo pode ser muito baixa, 
dificultando a detecção → aumenta risco de falso negativo.
PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
É praticamente impossível termos um teste 100% específico e 100% sensível devido a várias limitações técnicas e 
biológicas. Busca-se um equilíbrio entre sensibilidade e especificidade que seja clinicamente aceitável, mas a 
perfeição absoluta não é alcançável.
Limitações:
3. Conflito entre sensibilidade e especificidade
Ao aumentar a sensibilidade (tornar o teste capaz de detectar mesmo quantidades mínimas), cresce o risco de 
captar sinais de pessoas saudáveis → mais falsos positivos.
Ao aumentar a especificidade (tornar o teste mais rigoroso, reconhecendo apenas sinais da doença), cresce o
risco de deixar escapar alguns casos reais → mais falsos negativos. 
É como “ajustar o filtro”:
Filtro aberto → pega quase tudo (alta sensibilidade, mas menos específico).
Filtro fechado → só pega os casos mais claros (alta especificidade, mas menos sensível).
PARÂMETROS IMPORTANTES
PARÂMETROS IMPORTANTES
É praticamente impossível termos um teste 100% específico e 100% sensível devido a várias limitações técnicas e 
biológicas. Busca-se um equilíbrio entre sensibilidade e especificidade que seja clinicamente aceitável, mas a 
perfeição absoluta não é alcançável.
Limitações:
4. Questões técnicas e operacionais
Interferentes no sangue (lipídios, hemólise, presença de anticorpos heterófilos, uso de medicamentos) podem 
afetar o resultado.
Diferenças entre kits, equipamentos e operadores também dificultam a perfeição.
D E S E M P E N H O D O T E S T E
Sensibilidade, especificidade e valores preditivos
Doença + Doença −
Teste + Verdadeiro positivo (VP) Falso positivo (FP)
Teste − Falso negativo (FN) Verdadeiro negativo (VN)
Sensibilidade
VP / (VP + FN)
Capacidade de identificar 
corretamente quem tem a doença
Especificidade
VN / (VN + FP)
Capacidade de identificar 
corretamente quem não tem a 
doença
VPP
VP / (VP + FP)
Probabilidade de ter a doença 
dado um teste positivo
VPN
VN / (VN + FN)
Probabilidade de não ter a doença 
dado um teste negativo
Importante: VPP e VPN dependem da prevalência da 
doença na população testada — o mesmo teste pode ter 
desempenho preditivo muito diferente em cenários de 
baixa ou alta prevalência.
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Valor Preditivo Positivo e Valor Preditivo Negativo
Os valores preditivos são parâmetros utilizados para avaliar a interpretação clínica de um resultado de
teste diagnóstico.
Enquanto a sensibilidade e a especificidade avaliam o desempenho do teste em relação à presença ou
ausência da doença, os valores preditivos respondem a uma pergunta mais prática:
“Diante do resultado que eu obtive, qual é a probabilidade de esse resultado estar correto?”
Valor Preditivo Positivo — VPP
Probabilidade de um indivíduo realmente apresentar a condição investigada quando o resultado do 
teste é positivo.
Se o teste deu positivo, qual é a chance de a pessoa realmente ter a doença?
VPP = 95%
Entre as pessoas que apresentaram resultado positivo, aproximadamente 95% realmente possuem a 
condição investigada.
Isso dá maior confiança na interpretação de um resultado positivo.
Valor Preditivo Negativo – VPN
Probabilidade de um indivíduo realmente não apresentar a condição investigada quando o resultado 
do teste é negativo.
Se o teste deu negativo, qual é a chance de a pessoa realmente não ter a doença?
VPN = 99%
Entre as pessoas que apresentaram resultado negativo, 99% realmente não possuem a condição 
investigada.
Doença presente Doença ausente Total
Teste positivo 90 30 120
Teste negativo 10 870 880
Total 100 900 1.000
Em um laboratório clínico, foi realizado um teste imunológico para detectar uma determinada doença em 1.000
pacientes. Após a realização do teste, os resultados foram comparados com o diagnóstico definitivo:
Qual é o Valor Preditivo Positivo (VPP) desse teste?
O que esse resultado significa clinicamente?
Resolução
O VPP indica a probabilidade de um indivíduo realmente apresentar a doença quando o resultado do teste é
positivo.
Doença presente Doença ausente Total
Teste positivo 90 30 120
Teste negativo 10 870 880
Total 100 900 1.000
Um VPP de 75% significa que, entre os indivíduos que apresentaram resultado positivo no teste, 75%
realmente possuem a doença.
Ou seja, se 100 pessoas apresentarem teste positivo, aproximadamente 75 terão a doença e 25 não 
terão, correspondendo aos falsos positivos.
Se a prevalência da doença na população diminuir, o que provavelmente acontecerá com o VPP?
O VPP tende a diminuir, porque, em uma população com menor prevalência, uma proporção maior dos 
resultados positivos pode ser representada por falsos positivos.
VPP e VPN dependem da prevalência, enquanto sensibilidade e especificidade são características próprias 
do desempenho do teste.
Parâmetro Pergunta principal
Sensibilidade Entre os doentes, quantos deram positivo?
Especificidade Entre os não doentes, quantos deram negativo?
VPP Entre os positivos, quantos realmente estão doentes?
VPN
Entre os negativos, quantos realmente não estão 
doentes?
Sensibilidade e especificidade → começam pela doença.
VPP e VPN → começam pelo resultado do teste.
Sensibilidade: tenho adoença → o teste me encontra?
Especificidade: não tenho a doença → o teste me deixa negativo?
VPP: deu positivo → eu realmente tenho?
VPN: deu negativo → eu realmente não tenho?
CLASSIFICAÇÃO DOS TESTES SOROLÓGICOS
Podem ser qualitativos (indicam se há ou não resposta imune) ou quantitativos (indicam quanto existe dessa resposta).
Podem ser qualitativos (indicam se há ou não resposta imune) ou quantitativos 
(indicam quanto existe dessa resposta).
A escolha do tipo depende da finalidade clínica: detectar, confirmar ou 
monitorar uma infecção.
• Método Qualitativo
Mostra apenas presença ou ausência de anticorpos → resultado positivo ou 
negativo (reagente/não reagente).
Exemplo: Paciente com suspeita de dengue faz um teste rápido IgM → resultado
positivo indica infecção ativa.
➢ Usado em triagens rápidas: HIV, COVID-19, sífilis, zika, H. pylori etc. 
Limitação: não mostra valores mensuráveis, apenas confirma a presença da 
resposta imune.
CLASSIFICAÇÃO DOS TESTES SOROLÓGICOS
• Método Quantitativo
Mede a quantidade de anticorpos ou antígenos. 
Resultados expressos como:
• Titulação: 1:2, 1:4, 1:8... (diluições seriadas).
• Unidades: UI/mL, %, mg/mL.
• Intensidade de reação: +, ++, +++, ++++
Exemplo: Teste para dengue IgM = 63 UI/mL → valor acima do limite de referência = 
reagente.
• Permite acompanhar evolução da doença ou eficácia do tratamento.
CLASSIFICAÇÃO DOS TESTES SOROLÓGICOS
• Método Semiquantitativo
Resultado intermediário: indica intensidade da resposta, mas sem valor absoluto. 
Exemplo: resultado “+++/++++” ou titulação limitada (1:8, 1:16).
Fornece uma estimativa da resposta imunológica.
➢ Aplicações Clínicas e Importância
Qualitativo: usado para triagem
Exemplo: testes rápidos para HIV, COVID-19 e sífilis.
rápida e diagnóstico inicial.
Quantitativo: usado para monitorar tratamento e carga de anticorpos.
Exemplo: VDRL quantitativo, ELISA, imunofluorescência.
CLASSIFICAÇÃO DOS TESTES SOROLÓGICOS
Testes Quantitativos e Semiquantitativos
Testes Quantitativos e Semiquantitativos
❖ Destaques Importantes
A titulação indica o último ponto de diluição com reação — quanto maior a titulação, maior a 
concentração de anticorpos.
O VDRL pode ser qualitativo (triagem) ou quantitativo (acompanhamento).
A escolha do método deve considerar o objetivo clínico e o estágio da doença.
Ambos os métodos são complementares:
-
-
Qualitativo → detecta.
Quantitativo → acompanha.
Por que diagnosticar individualmente?
Sorologia detecta anticorpos/antígenos e apoia o diagnóstico clínico.
Sintomas + sorologia orientam conduta e início do tratamento.
Pessoas respondem diferente ao mesmo agente (intensidade de sintomas, perfil e 
quantidade de anticorpos).
Resposta varia de pessoa para pessoa
Ex.: COVID-19 → casos leves a graves, com perfis sorológicos diferentes. 
Sorologia ajuda quando sinais/sintomas se confundem entre doenças.
Complementa clínica e outros exames, reduz testes invasivos.
Caso prático: arboviroses
Caso prático: arboviroses
Painel sorológico pode diferenciar dengue, zika e chikungunya. 
Mesmo com tratamento semelhante, o nome da doença importa:
Notificação compulsória → dados epidemiológicos.
Ações de controle do vetor → redução de casos.
Soroconversão e janela imunológica
Soroconversão: passagem de negativo → positivo (surgimento de anticorpos).
Janela: tempo entre infecção e detecção; pode gerar falso-negativo. 
Ex.: COVID-19: IgM detectável ~ ≥7 dias dos sintomas.
HIV:
Resposta clínica: fase aguda → latência → oportunistas.
Testes modernos (ELISA 4 geração) ↓ janela (~18 dias ao detectar antígeno + anticorpo).
Fase clínica e marcadores (IgM/IgG)
IgM: sobe na fase aguda (pode durar 3–6 meses).
IgG: sobe depois; memória (pode persistir por anos).
Ex.: COVID-19 → IgM + / IgG − = fase aguda (maior transmissibilidade).
Toxoplasmose:
IgM pode persistir por anos → confirmar com avidez de IgG (baixa = recente; alta = 
antiga).
Prognósticos - eficácia terapêutica
Variáveis: sobrevida, letalidade, mortalidade específica, remissão, recorrência. 
Eficácia do tratamento:
VDRL quantitativo: queda do título = tratamento eficaz (sífilis).
Vacinas: dosar IgG após 1 mês e ao longo dos anos (reforços).
Pré-natal: sorologias (rubéola, toxoplasmose, HBV, sífilis, tétano) → risco fetal e conduta.
• Doadores e receptores (sangue/órgãos)
Sorologia: triagem de infecções e compatibilidade.
HLA/MHC e aloantígenos: risco de rejeição (hiperaguda, aguda, crônica). 
Testes-chave:
Tipagem ABO/Rh, PRA, prova cruzada, tipagem tecidual (HLA).
• Diagnóstico coletivo (saúde pública)
Sorologia em massa: fotografia epidemiológica (surtos/pandemias).
Termos essenciais:
Soroprevalência: % com anticorpos detectáveis (soropositivos).
Soroepidemiologia: anticorpos + fatores sociais/ambientais → estratégia de controle.
Ex.: COVID-19 → testagem sorológica + isolamento reduziram óbitos em vários países.
Por que é importante?
Garante resultados verdadeiros, seguros e confiáveis. Reduz erros e diagnósticos falsos.
Por que é importante?
Garante resultados verdadeiros, seguros e confiáveis. 
Reduz erros e diagnósticos falsos.
Avalia o desempenho dos testes com parâmetros como:
Reprodutibilidade – resultados constantes.
Acurácia – proximidade do valor real.
Sensibilidade e especificidade – capacidade de detectar corretamente positivos e
negativos.
Eficiência e valores preditivos – chance real do resultado representar o estado do paciente.
❖ Esses controles garantem a qualidade das análises imunológicas e padronizam os métodos.
CONTROLE DE QUALIDADE EM TESTES SOROLÓGICOS
Banco de Soros (Soroteca) 
O que é?
• Um “arquivo de amostras de soro” coletadas e armazenadas de pacientes.
• Permite retestagem em casos de resultados duvidosos.
• Facilita a rastreamento e confirmação de análises laboratoriais.
• Mantém organização e controle das amostras na rotina laboratorial.
Funções principais
• Preservar amostras para revisões, estudos e validações.
• Apoiar pesquisas futuras e o desenvolvimento de novos métodos.
• Garantir a rastreabilidade e confiabilidade dos resultados obtidos.
CONTROLE DE QUALIDADE EM TESTES SOROLÓGICOS
CONTROLE DE QUALIDADE EM TESTES SOROLÓGICOS
Armazenamento e Normas
Armazenamento e Normas
➢ Como são guardados os soros
• Identificação: nome, número do exame, data e microrganismo pesquisado.
• Temperaturas de conservação:
-20 °C: rotina laboratorial e bancos de sangue (5 a 10 anos).
-80 °C: pesquisas científicas e estudos imunológicos.
• Seguem normas da RDC nº 34/2014 (Anvisa):
• Bancos de sangue devem manter soros por mínimo de 6 meses a -20 °C.
❖ Importância ética e prática
Exige autorização de comitê de ética quando usados para pesquisa populacional.
Permite identificar possíveis contaminações pós-transfusão, como em casos suspeitos de 
HIV.
CONTROLE DE QUALIDADE EM TESTES SOROLÓGICOS
• Avaliar se um teste sorológico é confiável e útil para diagnóstico.
Critérios principais:
Reprodutibilidade (Precisão): capacidade de repetir resultados consistentes.
Acurácia (Validade ou Exatidão): capacidade de apresentar resultados verdadeiros.
➢ Um método só é confiável quando é ao mesmo tempo preciso e exato.
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
• Reprodutibilidade (Precisão)
Capacidade do método de gerar o mesmo resultado em análises repetidas.
➢ Erros aleatórios que interferem:
1. Variação individual: condição do paciente pode mudar (ex.: após exercício físico).
2. Leitura em momentos diferentes: interpretação do mesmo exame pode variar.
3. Diferença entre observadores: dois técnicos podem interpretar resultados de forma 
distinta.
Sem reprodutibilidade, o teste não pode ser usado para diagnóstico confiável.
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
• Acurácia (Validade ou Exatidão)
É o grau em que o resultado do teste reflete a realidade — ou seja, se o resultado está 
correto.
➢ Como é avaliada
Comparando o novo teste com um padrão-ouro(referência confiável). 
Exemplo:
Teste rápido para dengue (anticorpos IgM/IgG) é comparado com a detecção do 
antígeno NS1 ou método molecular (PCR).
Acurácia ≠ precisão:
Precisão: resultados semelhantes.
Acurácia: resultados verdadeiros.
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
Testes Rápidos e Interpretação dos Resultados
Testes Rápidos e Interpretação dos Resultados
• Método imunocromatográfico qualitativo.
• A amostra migra por uma fita com anticorpos marcados com ouro coloidal. 
Resultado visual:
2 bandas → teste positivo (antígeno presente).
1 banda → teste negativo (antígeno ausente).
• Vantagens
Simples, rápido e de baixo custo.
Permite uso em triagens e diagnósticos imediatos.
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
Conclusão: O teste ideal deve ser: preciso, exato, rápido, seguro, simples, confiável e 
acessível. A comparação com o padrão-ouro permite calcular sensibilidade, especificidade e 
valor preditivo, que medem o desempenho real do método.
Resumindo: A avaliação dos métodos sorológicos garante que os resultados sejam
reprodutíveis, verdadeiros e clinicamente úteis, fortalecendo a confiança diagnóstica.
Significado
Paciente realmente infectado
Teste positivo, mas paciente sem infecção 
Paciente realmente saudável
Teste negativo, mas paciente infectado
Resultados Possíveis e Avaliação Final
❖ Tipos de resultado
Tipo de Resultado
Verdadeiro Positivo 
Falso Positivo 
Verdadeiro Negativo 
Falso Negativo
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
Eficiência dos Testes Sorológicos
• Eficiência é a capacidade do teste de acertar o diagnóstico — identificar 
corretamente doentes e não doentes.
• Mede quantos resultados são verdadeiros dentro da população analisada.
• Depende da sensibilidade e especificidade do teste.
Um teste eficiente é aquele que gera resultados fidedignos e confiáveis.
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
Fórmula da Eficiência Cálculo:
Fórmula da Eficiência 
Cálculo:
𝐸𝑓𝑖𝑐𝑖ência =
𝑉𝑃 + 𝑉𝑁
𝑉𝑃 + 𝑉𝑁 + 𝐹𝑃 + 𝐹𝑁
Onde:
VP: Verdadeiro Positivo 
VN: Verdadeiro Negativo 
FP: Falso Positivo
FN: Falso Negativo
❖ Ǫuanto mais VP e VN, maior a eficiência global do teste.
❖ Exemplo Prático: COVID-19
• População testada: 1.000 pessoas
100 positivos e 900 negativos.
• Se sensibilidade = 80%, o teste identifica 80 doentes e perde 20 (falsos 
negativos).
• Se especificidade = 80%, de 900 saudáveis, 720 são corretos e 180 falsos 
positivos.
Teste ideal: alta sensibilidade (detecta doentes) + alta especificidade (evita erros).
✓ Tipos de Erros nos Testes
Etapa Tipo de erro Exemplo prático
Pré-analítica
Problemas na coleta, 
transporte ou conservação
Amostra hemolisada ou 
contaminada
Analítica
Falhas de pipetagem, 
calibração, validade dos 
reagentes
Erro no equipamento ou 
diluição incorreta
Pós-analítica
Interpretação ou 
transcrição incorreta
Resultado digitado errado
Valor Preditivo Positivo (VPP)
Valor Preditivo Positivo (VPP)
Probabilidade de um teste positivo realmente indicar a doença.
𝑉𝑃
𝑉𝑃𝑃 = 
𝑉𝑃 + 𝐹𝑃
Exemplo
Se VPP = 80%, a cada 10 positivos, 8 realmente têm a doença.
Depende da prevalência da doença na população e da especificidade do teste.
Onde:
VP: Verdadeiro Positivo
VN: Verdadeiro Negativo
FP: Falso Positivo
FN: Falso Negativo
Valor Preditivo Negativo (VPN)
Valor Preditivo Negativo (VPN)
Probabilidade de um teste negativo indicar pessoa saudável.
𝑉𝑁
𝑉𝑃𝑁 = 
𝑉𝑁 + 𝐹𝑁
Exemplo
VPN = 89% → a cada 10 resultados negativos, 9 são realmente de pessoas sadias.
Depende da prevalência e da sensibilidade do teste.
Onde:
VP: Verdadeiro Positivo
VN: Verdadeiro Negativo
FP: Falso Positivo
FN: Falso Negativo
Exemplo Numérico Prático
Exemplo Numérico Prático
Resultado Pessoas Situação real
Positivos 275 210 doentes / 55 saudáveis
Negativos 225 200 saudáveis / 25 doentes
Cálculos:
•VPP = 210 / 275 = 0,76 (76%)
•VPN = 200 / 225 = 0,8G (8G%)
➢ Ǫuanto maior o VPP, maior a prevalência da doença; quanto maior o VPN, mais 
confiável é o teste negativo.
Onde:
VP: Verdadeiro Positivo
VN: Verdadeiro Negativo
FP: Falso Positivo
FN: Falso Negativo
Parâmetro Função Principal Uso mais comum
Eficiência
Mede acertos globais 
do teste
Avaliação geral
Sensibilidade
Detectar doentes (evita 
FN)
Triagem
Especificidade
Identificar saudáveis 
(evita FP)
Confirmação
VPP/VPN
Predizem chance real 
do resultado
Interpretação clínica
	Slide 1: Controle de qualidade -Métodos imunológicos 
	Slide 2
	Slide 3
	Slide 4
	Slide 7: IMUNOENSAIOS
	Slide 8
	Slide 9: O princípio fundamental do imunoensaio é que anticorpos reconhecem antígenos de forma específica, formando um complexo imune.
	Slide 10: IMUNOENSAIOS
	Slide 11
	Slide 12: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 13
	Slide 14: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 15: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 16: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 17: Um teste rápido de triagem para HIV precisa ter alta sensibilidade, pois é importante não deixar passar pessoas infectadas.
	Slide 18: Um teste confirmatório para HIV precisa ser altamente específico, para evitar diagnosticar como doente alguém que não tem a infecção.
	Slide 19
	Slide 20: O teste ideal seria aquele que apresentasse 100% de sensibilidade e 100% de especificidade.
	Slide 21: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 22: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 23: PARÂMETROS IMPORTANTES
	Slide 24
	Slide 25
	Slide 26
	Slide 27
	Slide 28
	Slide 29
	Slide 30
	Slide 32: Podem ser qualitativos (indicam se há ou não resposta imune) ou quantitativos (indicam quanto existe dessa resposta).
	Slide 33
	Slide 34
	Slide 35
	Slide 36: Testes Quantitativos e Semiquantitativos
	Slide 37
	Slide 38: Caso prático: arboviroses
	Slide 39
	Slide 40
	Slide 41: Por que é importante? Garante resultados verdadeiros, seguros e confiáveis. Reduz erros e diagnósticos falsos.
	Slide 42: CONTROLE DE QUALIDADE EM TESTES SOROLÓGICOS
	Slide 43: Armazenamento e Normas
	Slide 44
	Slide 45
	Slide 46
	Slide 47: Testes Rápidos e Interpretação dos Resultados
	Slide 48
	Slide 49: AVALIAÇÃO DOS MÉTODOS SOROLÓGICOS
	Slide 50: Fórmula da Eficiência Cálculo:
	Slide 51
	Slide 52
	Slide 53: Valor Preditivo Positivo (VPP)
	Slide 54: Valor Preditivo Negativo (VPN)
	Slide 55: Exemplo Numérico Prático
	Slide 56