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tecido morto) Punção Biópsia Aspiração Traqueal Expectoração Fricção Aspiração Bronquica Outros Micologia – Resumo – 2ª Prova 15 Alberto Galdino - Biomedicina Diagnóstico Micológico Exame Direto Cultura Histopatológico Imunológico Biologia Molecular Amostras Clínicas Vias respiratórias Pus ganglionar LCR Sangue Escarro Fragmento de tecido Exame Direto A fresco: Sem clarificação ou corante Clarificado: KOH, NaOH Corado: Giemsa, PAS... *SE VERÁ CÉLULAS LEVEDURIFORMES COM MEMBRANA BIREFRINGENTE E MULTIBROTANTE *Padrão Ouro: células multibrotantes com duplo contorno refrigente. (Células Mickey Mouse, Roda de Leme, Catenulada). *PB não permite forma filamentosa em Parasitismo, são Termodimórficos Micologia – Resumo – 2ª Prova 16 Alberto Galdino - Biomedicina Cultura Ágar Sabouraud Ágar BHI (temperatura 25°C a 37°C) Ágar Sab+BHI (acompanhamento 5 a 30 dias) *Cloranfenicol ou Cicloheximida (antibióticos para o meio) *FASE LEVEDURIFORME – aspecto cerebriforme *FASE FILAMENTOSA – aspecto de pipoca Histopatológico Reação inflamatória Parasito (células leveduriformes com brotação múltipla) Teste Imunológico Pesquisa de Antígenos Pesquisa de Anticorpos - Imunodifusão dupla evidenciando linha de precipitação - Auxilia diagnóstico e no acompanhamento clínico - Apresenta quase 100% de especificidade e sensibilidade - Casos de falsos + e falsos - (H. capsulatum) Diagnóstico Molecular Ácidos nucléicos DNA PRIMER Tratamento ANFOTERICINA B SULFAMÍDICOS (Trimetropim+Sulfametazona) AZÓLICOS Teste de Susceptibilidade à Antifúngicos - Não existe um método de referência padronizado para P. braziliensis - Resistência microbiológica é rara - Altos CIM para Itraconazol e fluconazol tem sido reportado para alguns isolados - Em geral, baixo CIM tem sido retratado para Anfotericina B, Citoconazol, Fluconazol, Voriconazol, Itraconazol. Micologia – Resumo – 2ª Prova 17 Alberto Galdino - Biomedicina HISTOPLASMOSE Histoplasma capsulatum (termodimórfico) Histoplasma capsulatum var. capsulatum Histoplasma capsulatum var. duboisii *Fase Infectante (FILAMENTOSA) *Forma Patogênica (LEVEDURIFORME) *histoplasmina 37°C: leveduras ‘ovais’ multibrotantes Fontes de Infecção -Solo habitat natural (sapróbia) -Tropismo por locais que abriguem alto teor de ácido úrico e outros compostos nitrogenados (Excretas de aves e morcegos) Distribuição Geográfica - Cosmopolitas - Predomina na América do Norte - Brasil (todas as regiões) Patogênese -Inalação de microconídios; -Nos alveólos, são fagocitados pelos macrofágos (fase leveduriforme) - multiplicação; -Ao vencer barreiras de defesa pode disseminar por via linfo-hematogênica; -Paciente com deficiência de imunidade - doença com caráter progressivo de gravidade variável. FORMAS CLÍNICAS Assintomática Pulmonar Disseminada Assintomática -90-95% dos casos de histoplasmose; -Teste da histoplasmina (teste cutâneo do – para +); nódulos pulmonares calcificados -Alguns casos: focos de calcificação nos pulmões – Sintomas semelhante a um processo gripal - Cura espontânea. Micologia – Resumo – 2ª Prova 18 Alberto Galdino - Biomedicina Pulmonar -Sintomas de gripe podem persistir e torna-se mais graves: tosse, perda de peso, eritema. Disseminada -1 para cada 50.000 casos de infecção pulmonar; -Mais frequente em pacientes com AIDS e outras patologias como linfomas e leucemias; -Mortalidade nos imunossuprimidos chega a 90%. Sintomas Clínicos o Febre o Perda de peso o Hepatoesplenomegalia o Anemia o Linfoadenopatia o Leucopenia o Lesões cutâneas da pele Diagnóstico - Exame Direto - Cultura - Imunológico - Histopatológico Tratamento -Anfotericina B e seus derivados lipossomais; -Elevada toxicidade -Tratamento domiciliar – Itraconazol. *FUNGO MAIS ACOPLADO À VIDA INTRACELULAR *Th1: resposta efetora *Th2: severidade da doença COCCIDIOIDOMICOSE Descrita como uma protozoose (Coccidium) por muitos anos; Coccidioides sp. (fungo dimórfico) C. immitis X C. posadasii (morfologicamente idênticos, diferenças genéticas) Clima semi-árido, estiagem, vegetação xerófila e solos alcalinos *Fase Filamentosa (artroconídeos) Pedúnculos “dejuntores” são mais facilmente dispersos. *Não é termodimórfico *Esporos e Esférula Micologia – Resumo – 2ª Prova 19 Alberto Galdino - Biomedicina Distribuição Geográfica -Doença do Novo Mundo; -Geograficamente limitada aos continentes da América do Norte, Central e do Sul; -Brasil - NE: PI, BA e CE: caçadas a tatus. Vias de Infecção -Inalatória: Respiratória -Tegumentar: Traumatismo -Digestiva Ciclo 1. Solo (filamentoso – artroconídio) 2. Desarticulação 3. Dispersão pelo vento 4. Inalação 5. Forma leveduriforme 6. 1 artrosporo se transforma em esférula (imatura madura) 7. Ruptura da esférula 8. Liberação de artrosporos/endosporos Quadro Clínico Micose sistêmica, predominantemente pulmonar, podendo, também, comprometer pele, laringe, ossos, articulação, meninges. Após a contaminação, 60% dos indivíduos apresentam infecção primária assintomática. 1 a 3 semanas após contágio – febre, dor torácica, tosse, hemoptises. Reumatismo do deserto – conjuntivite, artrite, eritema nodoso. Forma progressiva (rara) – associação de hiporexia, emagrecimento, dispnéia. Diagnóstico - Exame Direto -Cultura -Imunológico -Histopatológico Tratamento - Anfotericina B - Dificuldade de tratamento nas meninges Diagnóstico Diferencial -Tuberculose -Leishmaniose -Neoplasia -Doença granulomatosa -Entre micoses -Outras patologia Micologia – Resumo – 2ª Prova 20 Alberto Galdino - Biomedicina MICOSES OPORTUNISTAS São doenças fúngicas causadas por fungos contaminantes acometendo indivíduos imunossuprimidos. Sistema imunológico do indivíduo está comprometido (Resposta Imune) Imunossupressão transitória ou permanente Equilíbrio Parasito-Hospedeiro Não são fungos patogênicos Imunocomprometidos (imunossuprimidos/imunodeficientes) Patogenicidade Discutida Agentes Etiológicos o DIFERENCIAÇÃO Fungos Patógenos (lesões atípicas no couro cabeludo e nariz por Paracoccidioides braziliensis) Fungos de comportamento oportunista (micetoma no esterno, lesões geradas por pitiríase) Fungos Oportunistas Fungos Contaminantes (presentes no ambiente; parede mofada, inalação por imunossuprimidos gera micose oportunista). *Difícil diagnostico - SED (Síndrome do Edifício Doente) Características do Fungo - Adesinas (adesão do fungo às células do hospedeiro) - Adaptação à temperatura corpórea - Enzimas - Quantidade de propágulos fúngicos - Toxinas Micoses Sistêmicas e Imunodiagnóstico o CARACTERÍSTICAS Importância dos fatores predisponentes Diversidade das espécies Aumento da incidência Relação H/P Faz parte da microbiota normal Fatores Predisponentes o Intrínsecos: idade, fatores nutricionais, doenças de base, transplante o Extrínsecos: terapias imunossupressoras, antibioticoterapia prolongada, dispositivos médico-hospitalares invasivos