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PROTEINÚRIA Universidade Federal de Santa Maria Centro de Ciências da Saúde Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas Bioquímica Clínica I Manuela Sangoi Outubro/2013 1 INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 1. Equipamentos: Preço; Leitura (λ ou filtros); Expressão dos resultados; Vantagens/Desvantagens; INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 2. Equipamentos: Kits comerciais INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 2. Rotina laboratorial: Com garantir que os equipamentos e reagentes estão funcionando adequadamente? CONTROLE Normal (Glicose: 94 – 114 mg/dL) Patológico (Glicose: 251 – 307 mg/dL) Metodologia: Glicose oxidase/peroxidase 2 níveis Faixa de valores INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 2. Rotina laboratorial: Gráfico de Levey-Jennings (Controle Interno de Qualidade – CIQ) Valor esperado Concentração do controle INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 2. Rotina laboratorial: Regras de Westgard INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 2. Rotina laboratorial: CALIBRAÇÃO PADRÃO/CALIBRADOR Exemplo: Glicose: 100 mg/dL (Calibrador/Padrão) – 0,200 Relação matemática ( concentração/sinal) Glicose mg/dL (Amostra) – 0,240 Glicose (amostra)= 120 mg/dL INTRODUÇÃO – O LABORATÓRIO 2. Rotina laboratorial: Fator de Calibração Fator de calibração (FC) = Concentração do padrão Absorbância do padrão Exemplo: FC Glicose = 100/0,200 = 500 Glicose na amostra= FC x Absorbância da amostra 500 X 0,240 = 120 mg/dL PROTEINÚRIA PROTEINÚRIA Dosagem de proteínas na urina: Proteínas soro X Proteínas urina 6 – 8 g/dL 1 – 15 mg/dL PROTEINÚRIA Dosagem de proteínas na urina: Metodologia: Vermelho de pirogalol (BIOPROT U/LCR, Bioclin®); Princípio: Teste colorimétrico – Vermelho de Pirogalol As proteínas presentes na urina reagem com o vermelho de pirogalol e o molibdato formando um complexo de cor vermelha com absorção máxima em 600 nm (580 – 620 nm). A intensidade da cor formada é diretamente proporcional a concentração de proteína na amostra. PROTEINÚRIA Dosagem de proteínas na urina: Técnica: Técnica Branco Padrão Amostra Água deionizada 50µL - - Padrão - 50µL - Amostra - - 50µL Reagente de trabalho 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL PROTEINÚRIA Dosagem de proteínas na urina: Técnica: Homogeneizar bem e colocar em banho-maria a 37ºC, por 5 minutos; Ler as absorbâncias em 600 nm acertando o zero com o branco; Obs.: a cor é estável por 30 minutos. Linearidade: a reação é linear até 100 mg/dL; Sensibilidade: 2 mg/dL; Valores de referência: Urina aleatória: 1 a 15 mg/dL; Urina de 24h: 24 a 141 mg/24h; Líquor: 15 a 45 mg/dL. PROTEINÚRIA Dosagem de proteínas na urina: Como liberar os resultados: Proteinúria de amostra ou Proteinúria de 24h Amostra aleatória Amostra de 24h Expressa em mg/dL Expressa em mg ptn/24h g ptn/24h PROTEINÚRIA Dosagem de proteínas na urina: Exemplo: Volume 24h= 1250 mL Proteinúria amostra= 20 mg/dL 20 mg – 100 mL (1 dL) X mg – 1250 mL X= 250 mg/24h ou 0,25 g/24h PTU amostra=16,2 mg/dL PTU 24h= 200 mg/24h PTU amostra=30,4 mg/dL PTU 24h= 380 mg/24h Volume 24h= 1250 mL
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