APOSTILA DE MICROBIOLOGIA GERAL2

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE
CENTRO DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA AGROALIMENTAR
UNIDADE ACADÊMICA DE AGRONOMIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGIA GERAL
PROFESSORA: Dra. Alfredina dos Santos Araújo
Pombal
2010
MÓDULO I
– INTRODUÇÃO À MICROBIOLOGIA
MICROBIOLOGIA – É a ciência que estuda os microrganismos e suas atividades. Preocupa-se com a forma, estrutura, reprodução, fisiologia, metabolismo e a identificação dos seres microscópicos. Inclui o estudo de sua distribuição natural, suas relações recíprocas e com outros seres vivos, seus efeitos benéficos e prejudiciais sobre os homens; suas alterações físicas e químicas que provocam em seu meio ambiente. Está associada ao estudo das células vivas e ao seu funcionamento
O metabolismo divide-se em duas fases: Anabolismo e Catabolismo
Anabolismo – (ASSIMILAÇÃO) é a formação de substâncias próprias e especificas do organismo para crescer, manter-se ou reparar-se. Por este processo os alimentos chegados às células são transformados em substancias idênticas às que constituem o protoplasma (matéria viva)
Catabolismo – (DESASSIMILAÇÃO) – consiste num processo de desintegração de substâncias incorporadas e de sua transformação em outros compostos mais simples chamados Catabólitos , destinados a serem excretados para o interior das células.
A Microbiologia aborda dois grandes temas:
Aspectos de Natureza Básica
Aspectos de Natureza Prática ou Aplicada
2.0 DISTRIBUIÇÃO DOS MICRORGANISMOS NA NATUREZA
3.0 ÁREAS DE APLICAÇÃO
Microbiologia Médica
Microbiologia Aquática
Microbiologia do Ar
Microbiologia do Leite
Microbiologia dos Alimentos
Microbiologia do Solo
Microbiologia Industrial
Microbiologia dos Insetos
Microbiologia Espacial
4.0 – DIVISÃO DOS REINOS
REINO PROTISTA DE HAECKEL – Em 1866 o zoólogo alemão E. H. Haeckel sugeriu a criação de um terceiro reino, o qual foi denominado PROTISTA.
ANIMALLES – animais
VEGETALLES – vegetais
SUPERIOR – Algas, Fungos e Protozoários.
PROTISTA
INFERIOR – Bactérias e cianobactérias (cianofícias) 
CONCEITO DOS CINCO REINOS – outro sistema de classificação foi proposto por Whittaker em 1969.
PLANTAE – Plantas verdes, multicelulares e algas superiores.
ANIMALIA – Animais pluricelulares;
FUNGI – Mofos e leveduras;
PROTISTA – Micro algas e protozoários;
MONERA – Bactérias e cianobacterias 
VIRUS- dependem de alguns estudos fisiológicos. Não possuem vida própria e só crescem quando estão dentro da célula do organismo do homem e animais. O homem adquire esses microrganismos através da ingestão de água leite ou outro alimento contaminado, como também pelo ar ou através de pessoas doentes pelo contato direto ou da manipulação de alimentos (hepatite, sarampo, gripe, rubéola)
4.0 TEORIA CÉLULAR
	Todas as células são basicamente semelhantes. Compõem-se de protoplasma, um complexo coloidal constituído principalmente de proteínas, lipídios e ácidos nucléicos: o conjunto é circundado por membranas limitantes ou parede celular, e todas têm um núcleo ou uma substancia nuclear equivalente.
Todos os sistemas biológicos apresentam as seguintes características comuns:
Habilidade de reprodução; 2) Capacidade de ingestão ou assimilação de substancias alimentares, metabolizando-as para suas necessidades de energia e de crescimento; 3) Habilidade de excreção de produto de escória; 4) Capacidade de reagir as alterações do meio ambiente; 5) Suscetibilidade à mutação.
Célula - Corresponde à unidade fundamental do ser vivo. Uma única célula corresponde a uma entidade, separada das outras células por uma membrana, contendo uma variedade de compostos químicos e estruturas sub-celulares em seu interior.
De acordo com a estrutura celular os seres vivos se dividem em duas categorias: PROCARIONTES E EUCARIONTES. Esta divisão se baseia nas diferenças na organização da máquina celular. 
PROCARIONTES – não possuem núcleos bem definidos, não possuem membrana nuclear, por isso a região do núcleo se confunde com o citoplasma.
EUCARIONTES – possuem núcleos bem definidos, circundado por duas camadas.
As células dos organismos eucariontes compõem-se de três partes:
1. Membrana celular – é constituída de lipídios (40%), proteínas (60%) e alguns carboidratos. É a camada que envolve a célula, tem a função de transportar nutrientes e servir de suporte ao sistema de formação de energia da celula.
2. Citoplasma – é toda substancia encontrada entre a membrana e o núcleo. Seu trabalho garante a vida da célula, pois no citoplasma se realizam as funções de nutrição, fundamentais para a conservação da vida; digestão, respiração, circulação e excreção.
3. Núcleo – parte central da célula. Estrutura chave onde a informação genética (DNA) é armazenada. 
Organelas citoplasmáticas – são estruturas encontradas no citoplasma e que desempenham funções vitais na célula. São elas:
Mitocôndria – responsável pela respiração da célula. Constituem verdadeiras “usinas” de energias, onde a matéria orgânica é “moída” de maneira a fornecer, para o metabolismo celular, a energia química acumulada em suas ligações.
Complexo de Golgi – é o local de acumulo e concentração de varias substancias; onde ocorre a síntese das proteínas dos carboidratos e dos lipídios. 
Reticulo Endoplasmático – aumenta a superfície da célula, o que amplia o campo de atividades das enzimas, facilitando a ocorrência de reações químicas necessárias ao metabolismo celular; facilita o intercambio de substancias entre a célula e o meio externo; armazena substancias diversas; regula a pressão osmótica; produz lipídios. 
Cápsula – envoltório protetor e pode servir também como reservatório de alimentos armazenado e como local de despejo de substâncias de escoria.
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Esquema de células animal e de uma célula vegetal típica.
5 COMPONENTES DA CÉLULA
5.1 - COMPONENTES INORGÂNICOS
1) ÁGUA – é um importante veículo de transporte de substancias, permitindo o continuo intercambio de moléculas entre os líquidos extra e intracelular.
Funções desempenhadas pela água nos seres vivos:
Solventes de líquidos corpóreos;
Meio de transporte de moléculas;
Regulação térmica;
Ação lubrificante;
Atuação nas reações de hidrólise.
2) SAIS MINERAIS – São encontrados nos seres vivos sob duas formas básicas: insolúvel e solúvel.
Insolúvel – acham-se imobilizados como componentes do arcabouço esquelético.
Solúvel – acham-se dissolvidos na água em forma de íons – Ca++ ; Mg++; Fé++; PO4- - -; K+; Na+; Cl - - Os sais minerais desempenham um importante papel biológico nos seres vivos, agindo como ativadores de enzimas, como componentes estruturais de moléculas orgânicas fundamentais e participando da manutenção do equilíbrio osmótico.
5.2 - COMPONENTES ORGÂNICOS DA CÉLULA
		Os principais componentes orgânicos da célula são: carboidratos; lipídios; proteínas; enzimas; ácidos nucléicos e vitaminas.
5.2.1- CARBOÍDRATOS – compostos orgânicos constituídos de carbono, hidrogênio e oxigênio. Na molécula de um carboidrato existe sempre um grupo aldeído ou um grupo cetona. Nos demais carbonos existem grupamentos hidroxilas (-OH) Por essa razão, os carboidratos são definidos como poliidroxialdeídos ou poliidroxicetonas.
Monossacarídeo – são carboidratos simples que não sofrem hidrólise, de fórmula geral Cn(H2O)n, onde n varia de 3 a 7(trioses, tetroses, pentoses, hexoses e heptoses.
Oligossacarídeos – carboidratos formados pela junção de 2 a 10 monossacarídeos que se separam por hidrólise
Sacarose (glicose + frutose)
Lactose (glicose + galactose)
Maltose (glicose + glicose)
Polissacarídeos – formados pela junção de muitos monossacarídeos. Tem fórmula geral (C5H10O5)n Ex: Amido; Celulose; Glicogênio.5.2.2 LIPÍDIOS – (do grego lipo – gordura) são moléculas orgânicas que resultam da associação entre ácidos graxos e álcool. Insolúveis em água. Solúveis em solventes orgânicos como benzena, éter e álcool. 
Lipídios simples – possuem em sua composição apenas átomos de carbono, hidrogênio e oxigênio. Compreendem os glicerídeos, cerídeos e os esterídeos.
Lipídios Complexos – apresentam, além do Carbono, Hidrogênio e Oxigênio, átomos de fósforo e nitrogênio, Ex: fosfolipídios - encontrados em plantas e animais. Esfingolipídios – abundantes no tecido nervoso.
Função:
São reservas alimentares
Fornecem energia 
Protegem mecanicamente
São isolantes térmicos 
Auxiliam a absorção de vitaminas e outras substâncias lipossolúveis.
5.2.3 PROTEÍNAS – quimicamente são macromoléculas complexas, de alto peso molecular constituídas de moléculas menores denominadas AMINOÁCIDOS.
AMINOÁCIDOS – são substâncias orgânicas que contem sempre um grupo amina 
 (- NH2) e um radical ácido, com seguinte fórmula geral.
Figura representativa da estrutura de uma proteína.
PAPEL BIOLÓGICO DAS PROTEÍNAS
Função estrutural
Função enzimática função hormonal
Função de defesa
Função nutritiva. 
5.2.4 ENZIMAS: São substâncias de natureza protéica, elaborada pelos seres vivos, funcionando como agente catalítico que acelera a velocidade da reação química e não são consumidoras durante a reação que catalisam.
E + S ( ES (.E + P
FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DE REAÇÃO DE UMA ENZIMA
CONCENTRAÇÃO DO SUBSTRATO – a medida que transcorre uma reação, ocorre uma diminuição na concentração dos reagentes. Em geral a velocidade da reação depende da concentração dos reagentes pelo que a velocidade especifica de conversão diminui simultaneamente.
TEMPERATURA – Devido a sua natureza protéica a desnaturação enzimática diminui a concentração efetiva e conseqüentemente, decresce a velocidade da reação.
PH – Extremos de pH podem levar a desnaturação da enzima pois afetarão o caráter iônico dos grupos amina e carboxila da proteína, conseqüentemente modificarão suas propriedades.
5.2.6 ÁCIDOS NUCLÉICOS 
	São moléculas gigantes, constituídas por unidades menores denominadas nucleotídeos. Cada nucleotídeo é constituído de uma molécula de ácido fosfórico ligada a uma pentose, que se acha ligada a uma base nitrogenada.
		Nos seres vivos existem dois grandes tipos de ácidos nucléicos: ácido desoxirribonucléicos (DNA ou ADN) e o ácido ribonucléico (RNA ou ARN).
		As bases nitrogenadas são classificadas em duas categorias: púricas e pirimídicas.
Uma das mais importantes características do DNA é a sua capacidade de autoduplicação, de forma a originar cópias exatas de si mesmo.
O DNA produz RNA e o RNA comanda a fabricação de enzimas e outras proteínas.
Fórmulas estruturais das cinco bases nitrogenadas que podem ser encontradas nos ácidos nucléicos.
5.2.7 VITAMINAS
	São substâncias orgânicas de natureza química heterogênea que atuam como coenzima, ativando enzimas fundamentais no processo metabólico dos seres vivos. 
Coenzimas - São compostos orgânicos, quase sempre derivados de vitaminas, que atuam em conjunto com as enzimas. Podem atuar segundo 3 modelos:
- Ligando-se à enzima com afinidade semelhante à do substrato
- Ligando-se covalentemente em local próximo ou no próprio sítio catalítico da apoenzima
- Atuando de maneira intermediária aos dois extremos acima citados.
Vitaminas são substâncias necessárias para o metabolismo no organismo, mas que não podem ser produzidas em nosso corpo. Assim, elas são obtidas através de alimentos, bebidas ou suplementos vitamínicos. As exceções são a vitamina D, que é sintetizada no organismo em uma escala limitada, e as vitaminas B12 e K, as quais são sintetizadas pela flora bacteriana no intestino.
Sem as vitaminas as reações metabólicas em nosso organismo ficariam tão lentas que não seriam efetivas. Algumas vitaminas (C, E e A) também tem papel antioxidante diminuindo a ação nociva dos radicais livres.
Ao contrario dos carboidratos lipídios e proteínas as vitaminas não tem função estrutural, nem função energética; alem disso são exigidas pelo organismo em doses mínimas. Cada vitamina tem um papel biológico especifico; portanto nenhuma vitamina pode substituir outra vitamina diferente. 
As vitaminas podem ser classificadas de acordo com a sua solubilidade em lipídios ou água
Hidrossolúveis 
	As vitaminas solúveis em água são absorvidas pelo intestino e transportadas pelo sistema circulatório até os tecidos em que serão utilizadas. O grau de solubilidade varia de acordo com cada vitamina e influi no caminho que essa substância percorre no organismo. Quando ingeridas em excesso, as vitaminas hidrossolúveis são armazenadas até uma quantidade limitada nos tecidos orgânicos, mas a maior parte é secretada na urina. 
Lipossolúveis 
	
		As vitaminas solúveis em gorduras são absorvidas no intestino humano com a ajuda de sais biliares segregados pelo fígado. O sistema linfático as transporta as diferentes partes do organismo. O corpo pode armazenar uma quantidade maior de vitaminas lipossolúveis do que de hidrossolúveis. As vitaminas A e D são armazenadas sobre tudo no fígado e a E nos tecidos gordurosos e, em menor escala, nos órgãos reprodutores. O organismo consegue armazenar pouca quantidade de vitamina K. Ingeridas em excesso, algumas vitaminas hidrossolúveis podem alcançar níveis tóxicos no interior do organismo. 
	As vitaminas são produzidas pelas plantas clorofiladas e por certos organismos unicelulares. Os animais adquirem as vitaminas de que necessitam através dos alimentos que ingerem.
Esses grupos possuem características importantes:
As vitaminas hidrossolúveis devem ser ingeridas diariamente pois não podem ser armazenadas e são expelidas dentro de um a quatro dias . Elas não resistem ao cozimento. Como exemplo citamos a vitamina C e as vitaminas do complexo B . 
As vitaminas lipossolúveis podem ser armazenadas por períodos maiores no tecido adiposo e no fígado . Elas são solúveis em gordura e geralmente são resistentes ao cozimento . Dentre essas encontram-se as vitaminas A , D , E e K .
As vitaminas lipossolúveis devem ser administradas antes das refeições e as vitaminas hidrossolúveis entre ou após as refeições 
7.0 - NUTRIÇÃO DOS MICRORGANISMOS
Para o crescimento e multiplicação os organismos necessitam de:
Uma fonte de carbono, hidrogênio e oxigênio.
Uma fonte de sais minerais, ferro, enxofre, fósforo, sódio e magnésio.
Uma fonte de energia.
Existem entre os seres vivos 2 tipos de comportamento que caracterizem as maneiras de enfrentar o problema de obtenção de alimentos, ou seja sua fonte de energia. O comportamento AUTOTRÓFICO E HETEROTRÓFICO.
AUTOTRÓFICO – são seres que sintetizam seu próprio alimento, a partir de moléculas de baixa E. desenvolve-se em meios minerais. FOTOSSÍNTESE E QUIMIOSSINTESE
HETEROTRÓFOS – seres que não conseguem sintetizar seu próprio alimento e o adquirem do meio onde se encontram. Necessitam de substancias orgânicas para o seu desenvolvimento. FERMENTAÇÃO E RESPIRAÇÃO.
AUTOTRÓFICO
FOTOSSÍNTESE – é um processo de produção de alimentos onde ocorre a transformação de substancias simples em compostos orgânicos através da luz solar.
				CO2 + H2O ( CH2O + O2
QUIMIOSSINTESE – é o processo pelo qual certos organismos sintetizam moléculas orgânicas utilizando energia proveniente da oxidação de compostos inorgânicos. Estes organismos oxidam substancias inorgânicas e a energia liberada nesta reação é utilizada na síntese da glicose que serve então como matéria prima para síntese de outras moléculas orgânicas e como fonte de energia para as reações celulares.
HETEROTRÓFOS
FERMENTAÇÃO – é um processo de obtenção deenergia utilizado pelos seres vivos. É um conjunto de reações enzimáticas através das quais uma molécula orgânica é degradada a molécula orgânica mais simples. Neste processo o aceptor final de hidrogênio produzido pela oxidação das moléculas orgânicas é uma substancia orgânica, produto da reação em questão.
RESPIRAÇÃO – consiste no processo de extrato de energia química acumulada nas moléculas de substancias orgânicas diversas, tais como carboidratos e lipídios. Nesse processo, verifica-se a oxidação ou “queima” de compostos orgânicos de alto teor energético conseqüentemente, formam-se substancias de menor conteúdo energético, como CO2 e H2O. 
Respiração aeróbica – quando o aceptor final de hidrogênio produzido pela oxidação das moléculas orgânicas é o oxigênio.
O2 + 4H+ + 4 e- ( 2H2O
Respiração anaeróbica - quando o aceptor final de hidrogênio produzido pela oxidação das moléculas orgânicas é uma substancia inorgânica diferente do oxigênio. Ex. nitrato, sulfato, carbonato etc.
2HNO3 + 10 H+ + 4 e- ( N2 + 6 H2O
8.0 - NECESSIDADE DE OXIGÊNIO
	De acordo com o oxigênio, os microrganismos são divididos em 4 grupos fisiológicos: 
Microrganismos Aeróbios – necessitam de oxigênio
Microrganismos Anaeróbios – não podem crescer em presença do ar e não utilizam oxigênio para as reações de produção de energia
Microrganismos Facultativos – são aqueles que crescem na presença do ar atmosférico e podem crescer também na ausência de oxigênio. Eles não requerem oxigênio para o crescimento, embora possam utiliza-lo para a produção de energia em reações químicas.
Microrganismos Microaerófilos – necessitam de pequena quantidade de oxigênio (1 a 15%).
9.0 - FAIXA DE TEMPERATURA
	Para todos os microrganismos existem 3 temperaturas cardeais
Temperatura mínima – abaixo da qual não há crescimento
Temperatura máxima – acima da qual não há crescimento
Temperatura ótima – onde o crescimento é máximo
De acordo com essa temperatura os microrganismos podem ser classificados em 3 grandes grupos:
Psicrófilos – crescem em baixa temperatura
Mesofílicos – crescem em temperatura moderada
Termofílicos – crescem em alta temperatura
	
	T. máxima
	T. mínima
	T. ótima
	Psicrófilos
	25ºC
	< 0ºC
	15ºC
	Mesofílicos
	45ºC
	20ºC
	35 – 37ºC
	Termofílicos
	95ºC
	45ºC
	60 – 70ºC
10.0 CARACTERÍSTICAS DOS MICRORGANISMOS
CARACTERÍSTICAS CULTURAIS
CARACTERÍSTICAS MOFOLÓGICAS
CARACTERÍSTICAS METABÓLICAS
CARACTERÍSTICAS ANTIGÊNAS
CARACTERISTICAS GENÉTICAS
10.1 - CARACTERÍSTICAS DAS BACTÉRIAS
Bactérias são seres procarionte amplamente distribuído na natureza, sendo encontrada em todos os ambientes. A célula bacteriana é, normalmente envolvida por uma parede espessa (parede celular). Muitas bactérias possuem estruturas locomotivas denominadas “FLAGELOS”
PRINCIPAIS CARACTERÍSTICAS: 
DIMENSÕES – 0,5 a 10 micra de comprimento
FORMA: Cocos – células de forma esférica
Bacilos – forma de bastonetes
Espirilos – forma espiralada
Vibrião – forma de vírgula
ARRANJO - Há formas coloniais decorrentes da agregação das formas individuais 
Diplococos – colônias formadas por dois cocos ligados
Estreptococos – cocos unidos em fileiras, como se fossem contas de colar
Estafilococos – cocos agregados desordenadamente
ESTRUTURA - As bactérias são constituídas, normalmente, por uma parede celular, que contém em sua composição polissacarídeos, proteínas e também lipídios. Internamente à parede celular, encontra-se a membrana plasmática, que é lipo-protéica e o citoplasma,. O cromossomo encontra-se no citoplasma e possui forma circular. É constituído por uma molécula de DNA que está ligado a uma membrana de proteína. 
REPRODUÇÃO DAS BACTERIAS – Reproduzem-se por divisão binária, onde uma célula se divide, formando duas células. Assim sendo, partindo de uma única bactéria, o aumento populacional se faz em progressão geométrica:
1( 2 ( 22 ( 23 ( 24 ( 25 ..... 2n
O tempo necessário para que a célula se divida ou seja, que a população duplique é conhecido como “TEMPO DE GERAÇÃO”
A reprodução das bactérias é ASSEXUADA
Algumas bactérias formam sob certas condições, formas resistentes que são chamadas de “ESPOROS”. O fenômeno de da formação de esporos é chamado “ESPORULAÇÃO”
EXIGÊNCIAS NUTRICIONAIS – há bactérias que fabricam seu próprio alimento (AUTOTRÓFICAS) e outras que retiram seu alimento do meio em que se encontram (HETEROTRÓFICAS).
COLORAÇÃO DE GRAM
	De acordo com a constituição da parede, as bactérias podem ser divididas em dois grandes grupos: Gram-positivas e gram-negativas.
	A técnica de Gram consiste essencialmente, no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os seguintes reagentes: cristal violeta, lugol, álcool e fucsina. Depois da adição de cada reagente, o esfregaço é lavado com água para retirar o excesso do reagente.
Quando se examina ao microscópio um esfregaço bacteriano corado pelo método Gram, as bactérias Gram + se apresentam de cor roxa e as Gram -, de cor avermelhada. 
Diferenças básicas entre Paredes Gram-Positivas e Gram-Negativas
	A parede das bactérias Gram-positivas é praticamente formada de uma só camada enquanto que a parede das bactérias Gram-negativas é formada de duas camadas. 
	O complexo cristal violeta lugol não é retirado do citoplasma das bactérias Gram-Positivas devido a menor permeabilidade do espesso peptidoglicano destas bactérias ao álcool.
Figura (A) Representação esquemática das diferenças entre a estrutura fina da parede celular da bactéria Gram +, (B) Representação esquemática das diferenças entre a estrutura fina da parede celular da bactéria Gram -.
CIANOBACTÉRIAS
Chamadas de algas azuis ou cianofíceas, as cianobactérias têm organização celular semelhante à das bactérias. O núcleo e as organelas não são organizados, o material genético fica em contato direto com o citoplasma. Por este motivo são do reino Monera.
As cianobactérias vivem na água, no solo bem úmido, sobre plantas, em fontes termais sob altas temperaturas e até entre os pêlos de certos animais, como as preguiças.
As vezes a água das represas torna-se esverdeada; isso acontece porque o número de cianobactérias aumenta muito. Nessas ocasiões é eliminada uma toxina, fazendo com que a água apresente odor e sabor ruins. Como algumas bactérias, as cianobactérias do solo conseguem transformar o nitrogênio gasoso em sais de nitrogênio, absorvidos dos solos pelos vegetais.
11.2 - CARACTERÍSTICAS DOS FUNGOS
Os fungos são organismos heterotróficos, obtendo sua alimentação a partir da matéria orgânica inanimada ou nutrindo-se como parasitas de hospedeiros vivos. Como saprófitas, decompõem resíduos complexos de plantas e animais, transformando-os em formas químicas mais simples, que retornam ao solo. Tais substâncias são, então, absorvidas pelas gerações vegetais subseqüentes. Desse modo, a atividade fúngica é amplamente responsável pela fertilidade do solo.
	O crescimento dos fungos saprofitas, contudo pode ser prejudicial – apodrecimento da madeira, dos tecidos e dos alimentos.
	Como parasitas causam doenças em vegetais, no homem e nos animais, embora a maior parte das micoses seja menos severa que as bacterioses ou as viroses.
	São importantes na fabricação de queijos, antibióticos etc.
MORFOLOGIA DOS FUNGOS
	São microrganismos eucarióticos, pluricelulares, reproduzem-se, naturalmente, por meio de esporos. Não tem clorofilas, e, portanto não podem fazer a fotossíntese, são filamentosos, medem em geral 5 a 10 (m de dimensão transversal, são comumente ramificados. Em sua maioria são imóveis. A maior parte entre todas as classes de fungo produz esporos de dois modos: SEXUADA E ASSEXUADA.
	O talo de um fungo é tipicamente composto por filamento tubular chamado“HIFAS”. O conjunto de hifas recebe a denominação de “MICÉLIO”.
Fisiologia e nutrição dos fungos
Fisiologicamente, os fungos adaptam-se a sobrecargas mais severas do que a maioria dos microrganismos. Desenvolvem-se em altas concentrações de açucares.
Podem tolerar e crescer em concentrações altas de ácidos, suportando variações de pH entre 2,0 e 9,0.
São capazes de viverem em ambientes úmidos e secos.
A maioria dos fungos são estritamente aeróbios
Desenvolve-se numa ampla faixa de temperatura, com um ótimo de 22 a 30ºC. 
A glicose é a fonte de carbono adequada para, praticamente, todos os fungos. A sacarose e a maltose, assim como muitos compostos orgânicos de carbono mais complexos (amido celulose). Nitrogênio orgânico, sob a forma de sais de amônio ou de hidratos. 
11.2.1 - CARACTERISITICAS DAS LEVEDURAS
As leveduras são fungos, mas deles se diferenciam por serem unicelulares. 
Sua reprodução se faz, geralmente por divisão binária. Como células crescem e se reproduzem mais rapidamente que os bolores. 
São desprovidas de clorofilas
Medem de 10 a 15 micras, com formato esférico, oval ou em forma de bastão.
São similares as bactérias na morfologia, formação de colônias, métodos de cultivos e atividades bioquímicas
Crescem dentro da faixa de temperatura de 25 a 40ºC
Desenvolve-se em meios contendo uma quantidade relativa de umidade
Crescem na presença e também na ausência de oxigênio
São ativos agentes oxidativos e fermentadores dos ácidos orgânicos e carboidratos
São proteolíticos embora algumas espécies decompõem a gordura
São usadas na fabricação de vinhos, cervejas, aguardente, pão .
11.3- CARACTERÍSTICAS DAS ALGAS
As algas são organismos autotróficos, clorofilados e portanto fotossintetizantes
Existem na natureza, milhares de espécies de algas.
As pequenas formas aquáticas formam grande parte da vida microscópica livremente flutuante na água, chamada PLANCTON que é o principal alimento dos animais aquáticos
MOFOLOGIA DAS ALGAS
	As algas demonstram grande variedade de formas e de dimensões. Muitas espécies ocorrem como células simples que podem ser esféricas, em bastão. Outras formas colônias multicelulares.
REPRODUÇÃO DAS ALGAS
	As algas podem reproduzir-se por via sexuada ou assexuada. Algumas espécies demonstram complicados ciclos vitais, utilizando ambos os meios de reprodução.
IMPORTÂNCIA ECONÔMICA DAS ALGAS
FERTILIDADE DO SOLO – fixam o nitrogênio atmosférico 
ALIMENTOS – agente clarificante em sucos de frutas, fonte protéica, carboidratos
COSMÉTICOS 
DOENÇAS – Prototheca identificada como capaz de provocar doenças no homem e outros mamíferos nos trópicos.
11.4 - CARACTERÍSTICAS DOS PROTOZOÁRIOS
	
São protistas eucarióticos, heterotróficos, unicelulares, em sua maioria são aquáticos. Seu tamanho pode variar de 2 a 3 (m a 250(m ou mais existindo certas espécies visíveis a olho nu. Alguns protozoários são de vida livre podendo nadar livremente ou fixados a um substrato, outros podem viver no interior de animais e nas plantas, sendo em alguns casos parasitas. 
Doenças causadas por protozoários: disenteria amebiana, malaria, doença das chagas.
11.5. CARACTERISTICAS DOS VIRUS
		São microrganismos muito pequenos (em media 0,1 micra). Não possuem estrutura celular, são construídos por ácido nucléico (DNA ou RNA) circundado por uma camada protéica e são incapazes de produzir ATP, ou seja, energia necessária para as atividades de uma célula ou organismo superior. Assim precisam de uma célula viva para se replicar, da qual utilizam as estruturas celulares que lhes faltam e o ATP da célula parasitada. São inativos nos alimentos. Nos alimentos provocam problemas na fabricação de iogurtes e queijos, pois os bacteriófagos destroem as células das culturas starter. Os vírus patogênicos como o da hepatite A, da poliomelite e os causadores da gastroenterite (rotavirus e vírus Norwalk) podem ser veiculados ao homem por água e alimentos. 
12.0 CURVA DE CRESCIMENTO
A – FASE LAG – (fase de latência) Imediatamente após sua inoculação no meio, as células começam a se ajustar às condições físicas e aos nutrientes disponíveis, sintetizando enzimas e coenzimas necessárias ao seu crescimento. Durante esse período não ocorre divisão celular. A medida que as células se tornam adaptadas ao meio, sintetizam componentes celulares, aumentando sua massa e começam a se dividir. O aumento do número de indivíduos no fim da fase lag é gradual, uma vez que nem todas as células completam sua adaptação ao mesmo tempo. Quando todas as células da cultura estão aptas a se dividir em tempos regulares, inicia-se a fase seguinte.
B - FASE LOG – durante esta fase todas as células dividem-se a intervalos regulares de tempo resultando num aumento exponencial do numero de indivíduos na população. Durante a fase exponencial, o gráfico que relaciona o logaritmo do número de microrganismo com o tempo é uma reta. Esta fase de intensa multiplicação dura enquanto não houver limitação de nutrientes ou acumulo de produtos tóxicos.
C – FASE ESTACIONARIA – a diminuição do ritmo de crescimento, que ocorre ao fim da fase exponencial, dá início à fase estacionaria onde o número de individuo permanece constante no decorrer do tempo. Nesta fase existe um equilíbrio entre a taxa de morte e a taxa de divisões na população e sua duração é variável, dependendo não só da espécie do microrganismo como também do meio e condições de cultivo.
D – FASE DE DECLINIO OU MORTE – Algum tempo depois da população ter entrado na fase estacionaria, a taxa de morte começa a exceder a de divisão, ocasionando um decréscimo no número de microrganismos, entrando a cultura na fase de morte cuja duração é também bastante variável.
13.0 - MEIOS DE CULTURA
	O cultivo dos microrganismos, em condições laboratoriais, é um pré-requisito para um estudo adequado. Para que isso possa ser realizado, é necessário o conhecimento de suas exigências nutricionais e das condições físicas requeridas.
MEIOS DE CULTURA – são substancias de composição química definida, destinada ao cultivo de tipos específicos e conhecidos de microrganismos.
Matérias primas como: peptonas, extrato de carne, extrato de levedura são empregadas nos meios de cultura resultando um meio que promove o desenvolvimento de grande números de microrganismos.
Os meios de cultura podem ser líquidos ou sólidos.
TIPOS DE MEIOS
Meios de Enriquecimento – permite o crescimento
Meios Seletivos – previne o crescimento de um grupo de microrganismos sem agir sobre outros
Meios Diferenciais – permite distinguir o tipo de microrganismos
Meios de dosagem – são empregados para dosagem de vitaminas, aminoácidos e antibióticos.
Meios para Contagem –
Meios para Identificação –
14 - REGRAS BÁSICAS EM MICROBIOLOGIA
Usar bata; não comer, beber, nem fumar no laboratório,
Limpar e sanitizar as bancadas antes e depois do trabalho
Identificar as amostras antes de iniciar a analises, não descartar a amostra até obter os resultados.
Usar bico de Busen, entre o material e o analista.
As pipetas devem conter algodão na extremidade de sucção para evitar contaminação do material e do analista.
Não conversar na hora do trabalho para evitar contaminações
O material utilizado deve receber o seguinte tratamento:
Esterilização (autoclave)
Lavagem
Secagem em estufa
Esterilização em estufa 170ºC por 2 horas
Armazenamento
TÉCNICAS DE LAVAGEM
Lavar com detergente
Imersão em solução de HNO3; HCl (1%) ou solução sulfocrônica
Lavar com água da torneira
Enxágüe com água destilada
15.0 - CONTROLE DOS MICRORGANISMOS PELA AÇÃO DOS AGENTES FÍSICOS
15.1.1 -TEMPERATURA
Esterilizar – é inativar todosos microrganismos existentes no material.
Calor seco
Flambagem em chama direta ( bico de Busen, lâmpada germicida
Ar quente – estufas, forno de Paster
Calor úmido
Pasteurização – visa à destruição dos germes patogênicos e não a eliminação total de germes contaminantes.
Água Fervente - A fervura destrói quase que instantaneamente os germes patogênicos não esporulados.
Vapor sob pressão – autoclave.
O calor úmido é mais eficiente, pois tem um poder de penetração maior que o calor seco. O calor seco age, promovendo uma oxidação violenta de componentes do protoplasma, enquanto que o calor úmido age promovendo a desnaturação das proteínas e dissolução de lipídios.
c) Congelamento 
Congelamento lento – promove a formação de cristais de gelo, que perfura a membrana e a parede celular.
Congelamento brusco- temperaturas inferiores a – 30ºC não leva a formação de cristais, os microrganismos sobrevivem durante muito tempo nestas condições principalmente se o processo é seguido de um dessecamento à vácuo – Liofilização.
15.1.2 – RADIAÇÕES – atividades letais dos microrganismos
Ultravioleta (UV) – comprimento de onda entre 240 e 280 nm são absorvidos pelas purinas e piridinas dos ácidos nucléicos provocando mutações. Anéis aromáticos de aminoácidos também absorvem radiação levando à inativação das enzimas.
Ionizantes – atingem os átomos e são incomparavelmente mais eficientes – seringas, agulhas outros materiais descartáveis.
15.1.3 – FILTRAÇÃO – passagem de soluções ou gases através de filtros de poros suficientemente pequenos que retém os microrganismos.
15.2. CONTROLE DOS MICRORGANISMOS PELA AÇÃO DOS AGENTES QUÍMICOS
Os agentes químicos empregados para matar ou inativar os microrganismos são: Desinfetantes e Agentes Quimioterápicos
Desinfetantes – são substancias que agem diretamente sobre as estruturas microbianas, causando a morte dos microrganismos. Não matam necessariamente todos os microrganismos, diminuem o numero de tal forma que os indesejáveis não representam mais um risco para o processo.
Quimioterápicos – são substancias que interferem na grande maioria dos casos, em determinadas vias metabólicas, isto é, a ação dos agentes quimioterápicos se restringe as células de microrganismos que possuem a via metabólica sensível.
Microbicida – determinando a morte dos microrganismos
Microbiostático – apenas impedindo a sua proliferação
MICROBIOLOGIA SANITÁRIA
SAÚDE E SANEAMENTO
SANEAMENTO – Segundo a OMS é o controle de todos os fatores de meio físico do homem, que exercem ou podem exercer efeitos nocivos sobre o bem estar físico, mental e social.
SAÚDE – é o estado de completo bem estar físico, mental e social, e não apenas ausência de doença. 
SAÚDE PÚBLICA – é a ciência, e a arte de evitar doenças prolongando a vida.
SANEAMENTO AMBIENTAL – é o conjunto de ações socioeconômicas que tem por objetivo alcançar salubridade ambiental, por meio de abastecimento de água potável, coleta e disposição sanitária de resíduos sólidos, líquidos e gasoso, promovendo a disciplina sanitária do uso do sólido, drenagem urbana, controle de doenças transmissíveis, com a finalidade de proteger e melhorar as condições de vida urbana. 
IMPACTO AMBIENTAL – qualquer alteração das propriedades físicas, químicas e biológicas do meio ambiente, causada por qualquer forma de matéria ou energia resultante das atividades humanas que, direta ou indiretamente, afetam:
A saúde a segurança e o bem estar da população;
As atividades sociais e econômicas;
A biota;
As condições estéticas e sanitárias do meio ambiente;
A qualidade dos recursos ambientais
ATIVIDADES BÁSICAS DO SANEAMENTO
Abastecimento de água à população, com qualidade compatível com a proteção da saúde e em quantidade suficiente para a garantia de condições básicas de conforto.
Coleta, tratamento e disposição ambientalmente adequada e sanitariamente segura dos esgotos sanitários proveniente das atividades domesticas, comerciais e de serviços públicos. 
Coleta, tratamento e disposição ambientalmente adequada e sanitariamente segura dos resíduos sólidos rejeitados pelas mesmas atividades.
Coleta de águas pluviais e controle de empoçamentos e inundações.
Controle de vetores de doenças transmissíveis (insetos, roedores, molúsculos, etc) 
 SANEAMENTO E MEIO AMBIENTE
O meio ambiente tem sido degradado através de diferentes formas:
A água é utilizada como meio de transporte de dejetos e rejeitos;
O solo é prejudicado pelo lançamento do lixo a céu aberto
A qualidade do ar é alterada pela emissão de gases nocivos pelas indústrias e veículos.
As ações de saneamento devem ter como principal objetivo, assegurar um meio ambiente favorável à vida humana e de outros seres vivos, através da poluição da água, do solo e do ar.
 POLUIÇÃO
O termo poluição provém do latim “polluere” – SUJAR
POLUIÇÃO – é tudo que ocorre com um meio e altera prejudicialmente, suas características originais, de forma a:
Afetar a saúde, a segurança e o bem estar da população;
Criar condições adversas às atividades sociais e econômicas
Ocasionar danos relevantes à flora, fauna e a qualquer recurso natural, aos acervos históricos, culturais e paisagísticos.
O termo poluição abrange hoje três determinações básicas:
Introdução de substancias artificiais e estranhas ao meio (agrotóxicos) ou contaminação por organismos patogênicos. 
Introdução de sedimentos em suspensão nas águas de um lago, ocupando seu volume útil tornando-o turvo.
Alteração na proporção ou nas características dos elementos constituintes do próprio meio, como diminuição do OD nas águas de um rio, devido a presença de MO.
 SANEAMENTO E SAÚDE PÚBLICA
	O controle da transmissão das doenças, além da intervenção em saneamento e dos cuidados médicos, completa-se quando é promovida a educação sanitária, adotando-se hábitos higiênicos como:
Utilização e manutenção adequada das instalações sanitárias;
Melhoria da higiene pessoal, doméstica e dos alimentos.
– DOENÇAS RELACIONADAS COM A HABITAÇÃO
Moradias construídas a concentração elevadas de vetores;
Nas habitações deve ser promovida a higiene domestica, esta é uma das estratégias preventivas na transmissão de doenças oral-fecal e das controladas pela limpeza com a água.
As habitações têm influência nas doenças transmitidas pelo ar, como catapora, cachumba, menigite, difteria e doenças respiratórias. O projeto de uma habitação deve, então, prever condições adequadas de espaço, ventilação, temperatura e umidade, de forma a não favorecer a transmissão de patógenos pelo ar;
O acabamento inadequado nas habitações pode favorecer a proliferação de ratos, mosquitos, carrapatos, piolhos, etc.
DOENÇAS RELACIONADAS COM O LIXO
5.3 DOENÇAS RELACIONADAS COM A ÁGUA
	De varias maneiras a água pode afetar a saúde do homem: pela ingestão direta, na preparação de alimentos; na higiene pessoal, na agricultura, na higiene do ambiente, nos processos industriais ou nas atividades de lazer.
As doenças relacionadas com a água podem ser agrupadas em duas categorias:
DOENÇAS DE ORIGEM HÍDRICA – são aquelas causadas por determinadas por substâncias químicas (orgânicas e inorgânicas) presentes na água em concentrações inadequadas que causam danos à saúde. Estas substâncias podem existir naturalmente no manancial ou resultarem da poluição
Compostos Orgânicos
Pesticidas
Trihalometanos
Hidrocarbonos Polinucleares aromáticos
Compostos Inorgânicos
Antimônio, Arsênico (0,10 mg/L); Bário (1,0mg/L); Cádmio (0,001mg/L); Cobalto, Chumbo (0,03mg/L); Mercúrio (0,002mg/L); Molibdeno, Selênio (0,01mg/L); Urânio.
Flúor em concentrações de 2 a 4 mg/L causa mancha no esmalte dos dentes, rigidez e dores nas articulações e deformação do esqueleto. A concentração sugerida para águas é de 1,0 mg/L.
Também podem ser consideradas doençasde origem hídrica aquelas causadas pela carência de alguns elementos na água. Assim, a ausência de iodo é responsável pelo bócio e consequentemente pelo cretinismo. Da mesma forma a falta de flúor causa crescimento debilitado de dentes e ossos.
DOENÇAS DE VEICULAÇÃO HÍDRICA – neste caso a água age como veiculo transmissor de agente infeccioso ou de vetores biológicos e mecânicos dos mesmos. As infecções relacionadas com a água podem ser classificadas de acordo com o mecanismo pelo qual o patógeno é transmitido desde uma pessoa doente para um novo hospedeiro sadio. Essa classificação apresenta 4 categorias:
MECANISMO QUE TEM COMO ORIGEM A ÁGUA – o patógeno está presente na água e é ingerido pelo novo hospedeiro (homem ou animal) o qual adquirirá a infecção. Nesta categoria estão incluídas as infecções causadas por bactérias como: cólera, febre tifóide, disenteria bacilar; por vírus: hepatite infecciosa (hepatite A), poliomelite, diarréias e doenças causadas por protozoários: amebíase.
Todos esses patógenos seguem a via oral-fecal, isto é são eliminadas com as fezes do doente e penetram pela boca da pessoa susceptível que se tornará novo doente
A água é apenas a via de transmissão.
MECANISMO ASSOCIADOS A ÁGUA DE LAVAGEM E HIGIENE PESSOAL - numerosas doenças intestinais, da pele e dos olhos estão relacionadas com a falta de higiene e/ou uso de água contaminada. 
Infecção do aparelho digestivo – diarréias – morte nas crianças –
Infecções nos olhos, pele, furúnculo, micoses, sarnas, tracomas –Infecções causadas por piolhos, pulgas e percevejos. 
MECANISMO BASEADO NA ÁGUA - São doenças cujo agente etiológico passa parte do seu ciclo na água, dentro de um hospedeiro intermediário como o caramujo. Todos estes patógenos são vermes parasitas (helmintos) que dependem do hospedeiro aquático para completar seu desenvolvimento.
Exemplos:
Esquistossomose – a água poluída com excretas contém ovos de S. mansoni os quais eclodem infectam os caramujos evoluem e infectam o homem penetrando pela pele.
Verme Guinea (Dracunculos medinensis) – a larva sai do homem através de feridas na pele penetra no crustáceo. O homem se re-infecta ao ingerir a água com o crustáceo contaminado.
MECANISMO QUE TEM INSETOS COMO VETORES - são doenças transmitidas por insetos os quais se criam na água ou se alimentam e picam o individuo próximo da água.
Exemplos: malaria; dengue, febre amarela e a doença do sono (mosca Tsé-Tsé). 
6. DOENÇAS DE VEICULAÇÃO HÍDRICA
6.1 DOENÇAS DE ORIGEM VIRAL
	VIRUS
	RSERVATÓRIO
	DOENÇA
	1. ENTEROVIRUS
	
	
	
Polivirus
	
Homem
	Poliomelite, febre, meningite
	
Echovirus
	
Homem
	Diarréia, febre, meningite, doenças respiratórias
	
Coxsackie
	
Homem
	Febre, meningite, doenças respiratórias
	
Adenovirus
	
Homem e animais
	Doenças respiratórias, infecções de olhos
	
Reovirus
	
Homem e animais
	
Não tem definidas
	
2. Vírus da Hepatite A
	
Homem
	
Hepatite infecciosa
	3.Virus associados com gastroenterite
	
	
	
Rotavirus
	
Provavelmente o homem
	
Diarréia e vômitos
	
Calicivirus
	
-
	Diarréia e vômitos
6.2. DOENÇAS DE ORIGEM BACTERIANO
	
BACTERIAS
	
RESERVATORIOS
	
DOENÇAS
	
E. coli patogênica
	
Homem
	
Diarréia
	
Salmonella
	
	
	
S. tyfho
	
Homem
	
Febre tifóide
	
S. paratyphi
	
Homem
	
Febre para tifóide
	
Outras Salmonellas
	
Homem e animais
	
Intoxicação alimentar e diarréia
	
Shigela spp
	
Homem
	
Disenteria bacilar
	
V. cholerae
	
Homem
	
Cólera
	
Outros vibrios
	
Homem
	
Diarréia
	
Campylobacter spp
	
Homem e animais
	
Diarréia
	
Yersinia enterocolitica
	
Homem e animais
	
Diarréia e septicemias
	
Leptospira
Icterohaemonhagiae
	
Ratos
	
Leptospirose
6.3 DOENÇAS CAUSADAS POR PROTOZOÁRIOS
Os protozoários mais freqüentes em fezes e transmitidos pela água correspondem apenas a três espécies:
	PROTOZOARIOS
	TRANSMISSÃO
	DOENÇA
	
Giárdia lamblia
	
Homem-solo-agua-homem
	
Giardiase
	
Entamoeba histolytica
	
Homem-solo-agua-homem
	
Amebiase
	
Balantidium coli
	
Homem-solo-agua-homem
	
Balantidiase
6.4 DOENÇAS CAUSADAS POR HELMINTOS
	
HELMINTOS
	
TRANSMISSÃO
	
DOENÇA
	
Schistosoma mansoni
	
Homem e animais-caramujo aquático –homem
	
Esquistossomose
	
Schistosoma haematobium
	
Homem-caramujo aquático –homem
	
Esquistossomose
	
Schistosoma japonicum
	
Homem-caramujo aquático –homem
	
Esquistossomose
	
Fasciola hepática
	
Homem-caramujo aquático -homem
	
Fasciolase
Principais Vias de Transmissão de Patogenos
7. INDICADORES DE POLUIÇÃO FECAL
	Os indicadores de poluição fecal são grupos de bactérias que pela sua origem e ecologia demonstram a contaminação por fezes ou esgotos.
	Os requisitos básicos que deve reunir um bom indicador estão indicados a seguir:
Ser um componente normal da flora intestinal de indivíduos sadios;
Estar ausente no meio ambiente e em animais
Estar presente sempre que microrganismos patogênicos intestinais estiverem presentes;
Apresentar números mais elevados que os patógenos intestinais;
Não se reproduzir fora do intestino
Apresentar taxa de morte igual ou levemente menor que os patógenos intestinais
Ter resistência igual ou maior aos fatores ambientais que os patógenos fecais
Fáceis de detectar e quantificar
Não serem patogênicos.
Nenhuma bactéria reúne todas estas condições. Os principais grupos de bactérias que servem como indicadores que cumprem com alguns requisitos anteriores são: coliformes a 35 e 45ºC, Estreptococos fecais; Clostridium perfringens e os colifádos somáticos.
7.1 INDICADORES DE ÁGUAS RECREACIONAIS
	
Águas recreacionais são águas superfícies como rios e lagos destinados à natação, piscinas e praias. 
Tradicionalmente a qualidade destas águas é monitorada através das bactérias do grupo coliformes e contagem padrão de bactérias heterótrofas. A detecção dos primeiro grupo serve para indicar a qualidade de águas destinadas para o consumo humano tratadas ou não, cuja ingestão poderá causar doenças intestinais. Portanto, estes indicadores são de uso limitado em águas destinado à recreação. Tornam-se necessários microrganismos que indiquem riscos à saúde pelo contato direto do individuo com a água e não apenas pela ingestão da mesma. Foram estão sugeridas, como indicadores adicionais, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus.
8. DEFINIÇÕES E APLICAÇÕES DE MICRORGANISMOS INDICADORES
8.1 Coliformes
	O grupo de coliformes a 35ºC inclui as bactérias na forma de bastonetes Gram-negativos, não esporuladas, aeróbias ou anaeróbias facultativas, capazes de fermentar a lactose com produção de gás, em 24-48 horas a 35ºC, o grupo inclui cerca de 20 espécies, dentre as quais encontram-se, tanto bactérias originárias do trato gastrintestinal de humanos e outros animais de sangue quente, como também diversos gêneros e espécies de bactérias não entéricas, como Serratia e Aeromonas. Por essa razão, sua enumeração em água e alimentos é menos representativa como indicação de contaminação fecal, do que a enumeração de E. coli.
8.2 Escherichia coli
	A E. coli é um membro da família Enterobacteriaceae apresentando-se como um bacilo Gram–negativo anaeróbio facultativo, capazes de fermentar a lactose com produção de gás, em 24-48 horas a 44-45ºC. É geralmente encontrada no intestino do homem e animais de sangue quente e pode ser isolada de alimentos de origem animal.
Cerca de 95% dos coliformes existentes nas fezes humanas e de outros animais são E. coli, e dentre as bactérias de habitat reconhecidamente fecal a E. coli é o melhor indicador de contaminação fecal conhecido até o momento, pois satisfaz quase todas as exigências de um indicador ideal.
Aplicação:
Avaliação da contaminação fecal em águas superficiais,de estuários e marinas.
Monitoramento de águas recreacionais como piscinas, praias e lagos. É um indicador fundamental para avaliar as condições de balneabilidade, de acordo com os padrões nacionais.
Avaliação da qualidade bacteriológica de águas destinadas à irrigação, descendentação de animais, criação de ostras e mariscos.
Avaliação da eficiência dos sistemas de tratamento de ETE’S
Monitoramento da qualidade de água para consumo humano, da rede de distribuição, de águas minerais, poços, etc.
Gêneros: Citrobacter,
Escherichia, Enterobacter e
Klebsiella
Citrobacter, Enterobacter e
Klebsiella: coliformes ambientais
8.3. Estreptococcus faecalis
	São cocos Gram-positivos presentes em fezes humanas e animais. São mais resistentes que os coliformes às condições ambientais externas (pH, temperatura, salinidade, etc).
Aplicação:
As mesmas que para os coliformes
Confirmação contaminação de origem fecal, quando os resultados de coliformes são duvidosos;
Avaliação da qualidade de águas subterrâneas (devido à maior resistência no solo que os coliformes, tornam-se indicadores confiáveis). 
8.4 Clostridium perfringens
	São bastonetes Gram-positivos, esporulados, anaeróbios que fermentam a lactose com produção de gás. Produzem fermentação turbulenta do leite, reduzem os nitratos (atividade desnitrificante), reduzem sulfitos na água, produzem lecitinase e fosfatase ácida e hidrolizam a gelatina. 
Aplicação:
Avaliação da qualidade da água de novas fontes de abastecimentos.
Detecção da contaminação em sedimentos marinos e resíduos industriais.
Análises da qualidade de águas recicladas e fontes reconhecidamente poluídas.
Avaliação da qualidade de águas minerais.
8.5 Pseudomonas aeruginosas
	São bactérias Gram-negativas, aeróbias, moveis por filamentos polares, oxidase e catalase positivos. A maioria das cepas produzem pigmentos esverdeados. Crescem a 37ºC e 41ºC, mas não a 4ºC.
	Apresentam elevada resistência a antibióticos e desinfetantes (portanto são bons indicadores do grau de higiene de águas de piscinas) e a biocidas. Toleram valores de pH relativamente altos (pH= 8,5).
Aplicação:
Avaliação da qualidade bacteriológica de águas recreacionais, águas industriais e corpos receptores de esgotos domésticos, hospitalares e industriais.
Avaliação da qualidade bacteriológica de águas potáveis e minerais.
Monitoramento da rede de abastecimento, quando esta bactéria é detectada em testes prévios.
8.6 Staphylococos áureos
São cocos Gram positivos, catalase positiva, fermentadores de glicose e manitol em anaerobiose. São coagulase positivo e produzem uma nuclease termoresistente.
Aplicação:
Avaliação da qualidade sanitária de águas de piscinas e recreacionais em geral.
Avaliação da eficiência da desinfecção em piscinas, devido sua alta resistência ao cloro e outros desinfectantes
Apresentam as mesmas aplicações que os coliformes e a E. coli.
8.7 Colifagos
	Os colifagos são vírus (bacteriófagos) que infectam e se replicam em bactérias coliformes e aparentemente estão presentes sempre que coliformes a 35ºC, coliformes a 45ºC e E.coli estão presentes.
Aplicação
Indicadores da qualidade sanitária de águas doces, salobras e salinas.
Indicadores da provável presença de enterovirus
Servem como modelo do comportamento de enterovirus em sistema de tratamento.
9.0. AGUA NA NATUREZA
9.1 DISTRIBUIÇÃ DA AGUA NA TERRA
	As águas cobrem ¾ da superfície da terra; deste total, 97% da água sã salgadas 3% são água doce. Dessa ultima 77% estão congeladas nos círculos polares; 22% compõem-se de águas subterrâneas. Esses valores ressaltam a grande importância de se preservar os recursos hídricos na terra, e de se evitar a contaminação. 
Há uma forte ligação entre a falta d’água e altos índice de mortalidade infantil
9.2. QUALIDADE DA ÁGUA
	A água de chuva, ao cair, é quase pura; ao atingir o solo seu poder de dissolver e carrear substâncias altera suas qualidades.
	Dentre o material dissolvido encontram-se as mais variadas substâncias tais como: substancias calcarias e magnesianas que tornam a água dura; substancias ferruginosa que dão cor r sabor; partículas finas que dão durbidez; e também organismos patógenos resultantes das atividades humana. Em conseqüência da sua grande atividade, a água pura não é encontrada na natureza.
Água potável é aquela que é própria para o consumo humano, pelas suas qualidades organolepticas, físicas, químicas e biológicas. Em outras palavras é aquela que não contem germes patogênicos, nem substâncias químicas alem do limite de tolerância.
Água poluída - é aquela que contem substancias que modificam suas características e a tornam impróprias para consumo.
Água contaminada – é aquela c que contem germes patogênicos.
10. ABASTECIMENTO DE ÁGUA
O Sistema de Abastecimento Público de Água constitui-se no conjunto de obras, instalações e serviços, destinados a produzir e distribuir água a uma comunidade, em quantidade e qualidade compatíveis com as necessidades da população, para fins de consumi domestico, serviços públicos, industrial e outros A água constitui elemento essencial à vida vegetal e animal. O homem necessita de água em qualidade adequada e quantidade suficiente para atender suas necessidade, para proteção da saúde e para proporcionar o desenvolvimento econômico.
10.1 IMPORTANCIA DO SISTEMA DE ABASTECIMENTO DE ÁGUA
A importância do sistema de abastecimento de água pode ser considerada nos seguintes aspectos: 
10.2 ASPECTO SANITÁRIO E SOCIAL
Melhoria da saúde e das condições de vida de uma comunidade
Diminuição da mortalidade, principalmente infantil;
Diminuição da incidência de doenças relacionada com a água;
Implantação de hábitos higiênicos na população
Facilidade na implantação e melhoria dos sistemas de esgotos sanitários
Possibilidade de proporcionar conforto e bem estar
Melhoria das condições de segurança. 
10.3 ASPECTO ECONÔMICO
Aumento da vida produtiva dos indivíduos economicamente ativos;
Diminuição dos gastos particulares e públicos com consultas e internações hospitalares.
Facilidade para instalação de indústrias, onde a água é utilizada como matéria-prima ou meio de operação;
Incentivo à industria turística em localidades com potencialidade para seu desenvolvimento.
10.4 SISTEMA DE ABASTECIMENTO DE ÁGUA
	Quando a densidade demográfica de uma comunidade aumenta, a solução mais econômica e definitiva é a implantação de um sistema de abastecimento de água. Sob o ponto de vista sanitário, a solução coletiva é a mais indicada, por ser mais eficiente no controle dos mananciais, e da qualidade da água distribuída à população.
Um sistema de abastecimento de água é composto das seguintes unidades:
Manancial – é fonte de onde se retira a água com condições sanitárias adequadas e vazão suficiente para atender a demanda. A escolha de um manancial é feita considerando-se são só a quantidade e a qualidade mas, também o aspecto econômico.
Captação – é o conjunto de equipamentos e instalações utilizados para a tomada de água do manancial, com a finalidade de lançá-la no sistema de abastecimento. O tipo de captação varia de acordo com o manancial e com o equipamento empregado.
Adução – adutora é o conjunto de tubulações, peças especiais, dispostas entre:
Captação e a estação de Tratamento;
Captação e o reservatório de distribuição;
Captação e a rede de distribuição
ETA e reservatório de distribuição;
ETA e a rede de distribuição
A adutora pode ser por gravidade e por recalque
Estação de Tratamento – O trata mento de água consiste em melhorar suas características organolepticas, físicas, químicas e bacteriológicas, a fim de que se torne adequada ao consumo humano. A qualidade físico química e bacteriológica da água obtida no manancial definirá o método de tratamento necessário para atender aospadrões de potabilidade estabelecidos pela portaria nº 1.469/2000 do Ministério da saúde.
Reservatório – é empregado para o acumulo da água com o propósito de:
Atender às variações de consumo na hora que este é maior;
Manter a pressão mínima ou constante n a rede;
Atender às demandas de emergências, em caso de incêndio, ruptura de rede, etc.
Distribuição – leve a água do reservatório ou da adutora para os pontos de consumo.
11. UNIDADES DO SISTEMA DE ABASTECIMENTO 
11.1 ESTAÇÃO CONVENCIONAL
A estação de tratamento tem como função de eliminar certas impurezas e/ou corrigir algumas impropriedades que as tornem inadequadas para o consumo humano.
Finalidade do tratamento – submete-se a água a um tratamento com o objetivo de melhorar a sua qualidade sob os seguintes aspectos fundamentais.
a) higiênico
b) estético 
c) econômico 
ETA – ESTAÇÃO DE TRATAMENTO DE ÁGUA
AERAÇÃO - é um processo físico onde a área de contato, entre a água e o ar, é aumentada, de modo a facilitar a transferência ou i intercambio de gases.
DECANTAÇÃO – é a remoção de partículas sólidas que decantam, sem emprego de processos químicos, pela ação da gravidade em unidades de decantadores primários.
COAGULAÇÃO – é a desestabilização das partículas coloidais, ou seja, é fazer com que as partículas coloidais que não se agregam lentamente passem a se agregar.
FLOCULAÇÃO – é um processo mecânico que visa aglutinar as partículas minúsculas coaguladas por meio de um contato estabelecido entre elas e outras existentes na água, através de uma agitação prolongada durante a qual elas se unem, aumentam de tamanho e se acondicionam, tornando-se mais densas.
Coagulante: sulfato de alumínio ( Al2(SO4)3 . 18 H2O)
FILTRAÇÃO – é a remoção de sólidos dissolvidos, coloidais e em suspensão, através da passagem da água por meio poroso (areia, silte, brita) resultam em um efluente de melhores características de potabilidade, em virtude da ação puramente física de filtração ou retenção de impurezas. Remove alto teor de bactérias (90 a 99%), cor, turbidez, mas pouca remoção de sabor e odor.
DESINFECÇÃO – é o processo de tratamento que visa a eliminação dos germes patogênicos presentes na água. Esta desinfecção pode ser feita através do cloro ou de seus compostos (cloração); por meio de ozônio (ozonização) e também por meio da radiação ultra-violeta, produzida em lâmpadas especiais, que exerce uma ação esterilizante. 
12. ANALISES MICROBIOLÓGICAS
12.1 COLETA DE AMOSTRAS
ÁGUA DE TORNEIRA – abre-se a torneira, deixa-se correr à água para eliminar a que ficou retida na tubulação. Fecha-se, esteriliza-se com algodão embebido de álcool e cesso.
BALNEÁRIOS – os pontos de coletas são os mais freqüentados, as amostras devem ser coletadas na hora de maior pico; a freqüência de amostragem será aumentada na época de chuva.
PISCINAS – coletar a água a 30 cm de profundidade. O frasco deverá conter Tiosulfato de sódio, as amostras devem ser coletadas na hora de maior concorrência. 
RIOS, LAGOS – em reservatórios utilizados como fonte de água potável, os pontos de coletas serão próximos a captação. Não deve coletar amostras nas bordas do rio, reservatório, porque nessa região a água é mais poluída e há acumulo de matéria orgânica, crescimento de plantas e insetos, o que eleva o teor de microrganismos e os resultados não seriam representativos.
12.2 TÉCNICAS BACTERIOLÓGICAS
1- A amostra deve ser coletada em frascos estéreis; 
2- A amostra deve ser representativa
3- Deve evitar contaminação da amostra durante e após a coleta;
4- A amostra deve ser examinada logo após a coleta
5- Em caso de demora a amostra deve ser guardada a uma temperatura entre 0ºC e 10ºC. 
No Brasil os padrões de potabilidade da água para o consumo humano são estabelecidos pelo Ministério da Saúde e atualmente encontra-se em vigor a Portaria MS nº 1.469/2000.
 
COLORAÇÃO DE GRAM
	A coloração de Gram é um dos mais importantes procedimentos para a caracterização de bactérias. As bactérias são divididas em dois grupos, baseados na capacidade de que possuem de reter ou perder o corante primário (cristal violeta). Os organismos que retém o cristal violeta (aparecem azul escuro ou violeta) são chamados Gram positivos, aqueles que perdem o cristal violeta e são posteriormente corados pela safranina (aparecem vermelhos) são denominados Gram negativos.
	O mecanismo de Gram é o seguinte: há um elevado conteúdo de lipídeos nas paredes celulares dos organismos Gram. O álcool empregado extrai as graxas, aumentando a porosidade ou permeabilidade da parede celular nas bactérias Gram 
(-). O complexo Cristal violeta é extraído pelo álcool e o microrganismo fica descolorido.
	As paredes celulares das bactérias Gram (+), devido a sua diferente composição, desidratam pelo álcool, o tamanho dos poros diminui, a permeabilidade é reduzida e o complexo cristal violeta se fixa. 
PROCEDIMENTO
MATERIAL: Lâmina; Bico de Bunsen; Estufa; Microscópio; Cristal violeta; Lugol; Safranina e Álcool.
METODOLOGIA:
Lavar a lâmina com água e sabão e/ou álcool e éter. Secar a lâmina e verificar se toda gordura foi removida.
Colocar uma ou duas gotas do liquido contendo a suspensão na lâmina. Espalhar sobre uma área de cerca de 1,5 cm de diâmetro.
Deixar o esfregaço secar à temperatura ambiente ou em estufa.
Passar o esfregaço 3 vezes sobre a chama do bico de Bunsen para fixação do mesmo.
Adicionar o Cristal violeta, aguardar 20 a 60 segundos.
Aplicar solução de Lugol esperar 60 segundos. Lavar com água.
Descorar com álcool ate que a cor livre tenha saído.
Corar com Safranina esperar 20 a 60 segundos. Lavar e secar.
Examinar ao microscópio com a objetiva de imersão.
OBSERVAÇÕES:
Quando o material a ser analisado for viscoso, deve-se proceder à diluição usando-se uma gota de água destilada.
A fixação do esfregaço faz-se necessária para manter o microrganismo aderido à lâmina.
O Lugol é uma substancia mordente empregada com o objetivo de fixar o corante à célula.
O álcool é agente descorante que remove o corante de certas bactérias.
Cultivos antigos de algumas bactérias Gram positivas podem perder a propriedade de reter o Cristal violeta, e, conseqüentemente, poderão se corar com a safranina.
	(a)								(B)
Figura 1: Técnica para identificar as bactérias Gram – e Gram+.
São exemplos de bactérias Gram-positivas várias espécies de:
- Estreptococos;
- Estafilococos;
- Enterococos.
São exemplos de bactérias Gram-negativas:
- Vibrão Colérico
- Colibacilo;
- Salmonelas.
Entre a grande variedade de doenças provocadas por cocos salientam-se:
- Pneumonia nosocomial (adquirida em meio hospitalar);
-Pneumonia adquirida na comunidade;
- Infecções da pele e tecidos moles.
PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA
 
INTRODUÇÃO
	Os microrganismos necessitam, para o seu crescimento, de nutrientes próprios e condições físicas e químicas especificas.
	Um meio de cultura é um conjunto de ingredientes formulados no laboratório ou adquiridos desidratados, que é empregado com o objetivo de possibilitar a multiplicação de microrganismos.
	Cada microrganismo ou grupo de microrganismo possui exigências nutritivas especificas.
MEIOS DESIDRATADOS
	A maior parte dos meios de cultura pode ser obtida na forma desidratada e neste caso alguns aspectos devem ser obtidos:
1. ARMAZENAMENTO E CONSERVAÇÃO
Anotar em livro próprio a data da recepção dos meios de cultura e ingredientes empregados na formulação.
Armazená-lo de acordo com as especificações contidas no rotulo, em uma área de pouca umidade, afastada da luz direta do sol, das autoclaves, estufa de secagem e qualquer outra fonte de calor.
Quando especificado no rotulo, mantersob refrigeração.
Após o uso assegurar-se de que o frasco esta bem fechado e armazena-lo em local próprio.
Descartar o meio caso o pó não esteja fluindo facilmente ou se houver alterações na cor e/ou consistência.
2. PESAGEM
	Ao preparar meios e cultura deve-se usar primeiro o estoque mais velho. Não se deve abrir um novo lote de meio ate que o anterior tenha esgotado.
	Usar uma balança cuja exatidão se verifique freqüentemente. Os meios desidratados são hidroscópicos e desta forma, a pesagem deve ser feita rapidamente e em local de pouca umidade. 
3. DISSOLUÇÃO
	Usar vidros bem lavados e enxaguados. Não usar água suspeita de conter cloro, cobre ou detergentes. Usar água deionizada ou destilada.
	Antes a aplicar calor dissolver meios desidratados deve-se ler o rotulo. Alguns meios não devem ser submetidos a temperaturas acima de 55ºC, (Caldo urea, Agar urea) enquanto que outros meios desidratados devem ser aquecidos a fim de garantir a completa dissolução e distribuição uniforme dos ingredientes.
	O aquecimento deve ser feito sob agitação continua e suave, evitando que o mesmo se queime no fundo do frasco. A agitação do meio durante o aquecimento deve ser feita com cautela porque alguns meios, especialmente os que contém Agar, podem formar espuma e transbordar.
	Os meios que contém Agar devem permanecer, em geral durante 5 a 10 minutos em repouso na água, antes de serem aquecidos, para permitir que as partículas de Agar se reidratem adequadamente, elevando a solubilidade do Agar resultando em gel mais uniforme.
	O meio preparado deve ser distribuído em frasco ou tubo (permitindo uma pequena folga da tampa) apropriado e levado para esterilização.
	Ao distribuir o meio em recipientes adequados, não devemos colocar mais de 2/3 da capacidade do mesmo.
ESTERILIZAÇÃO
	Alguns meios não devem ser esterilizados em autoclave. Em alguns casos, os meios devem ser esterilizados por filtração, outros são tão seletivos que não necessitam de calor nem de filtro (Agar Salmonella-shiguella, Agar citrato desoxicolato, Caldo de tetrationato, Caldo de selenito). A atividade seletiva destes meios é destruída durante a autoclavação.
	O microbiologista dispõe de numerosos filtros de diferentes tipos e poros de tamanhos variáveis. Os filtros de membrana (Millipore, Belford, Mass) são provavelmente o sistema de filtro mais usado e podem ser empregados com adaptadores próprios permitindo a esterilização de grandes volumes. 
	Na esterilização por autoclavação o meio não deve ser tratado deficientemente ou excessivamente. O excesso de tratamento em um meio pode acarretar um erro pior do que a subesterilização. É necessário pré-aquecer meios em volumes maiores, para evitar demora em alcançar a temperatura de esterilização. Nunca deve ser autoclavado mais de dois litros por recipiente. Antes de esterilizar o pH do meio deve ser comprovado em potenciômentro (ajustado com tampões). Esta medida deve ser tirada a 25ºC e normalmente não precisa ser ajustada. A adição de componentes pode afetar o equilíbrio do meio.
ARMAZENAMENTO DO MEIO PRONTO
	De forma geral, os meios prontos devem ser armazenados a temperatura entre 2 e 8ºC (geladeira). O efeito nocivo comumente associado ao armazenamento é a desidratação. Esta não será problema em meios líquidos e sim em meios em placas, principalmente em laboratórios pequenos onde certos meios são usados ocasionalmente. Estes meios em placas devem ser conservados em sacos plásticos, selados, para minimizar a perda de umidade, e estocados em posição invertida. Todos os meios devem ser levados a temperatura ambiente antes de seu uso. 
	Meios como Agar padrão, Agar batata e outros, podem ser guardados em volumes para serem adicionados em placas (15 mL). No momento da analise serão fundidos e resfriados. 
	
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