2.Métodos de estudo em Patologia

Prévia do material em texto

Métodos de Estudo em Patologia 
 
 Estudo Morfológico 
 Representa a análise macro e microscópica das doenças 
(investigação e diagnóstico) 
 
 Exames Citológicos 
 Exames Anatomopatológicos 
 Necropsia 
 
 Exames Citológicos 
 - Constituem importante meio de diagnóstico de muitas doenças 
 - Raspados de pele ou mucosas 
 - Secreções corpóreas 
 - Líquidos 
 
 
 1 
Citologia Esfoliativa (Colpocitologia) 
 
 Importância – é um método utilizado para prevenção contra câncer 
uterino 
 
 Vantagens 
 Método simples 
 Rápido 
 Econômico 
 Bem aceito 
 
 Desvantagens 
 Evidencia apenas lesões superficiais 
 Subjetividade do observador 
 O tratamento não pode ser baseado em um resultado positivo (biópsia é 
indispensável) 
 
 Materiais para coleta 
 Fixador (álcool etílico 95%) 
 Espátula de madeira, escova endocervical 
 Lâmina de ponta fosca 
 Espéculo 
 
- 
2 
 
 
PAPANICOLAOU BETHESDA 
Classe I Normal 
Classe II Inflamatório 
Classe III LSIL 
HSIL 
HSIL 
Classe IV HSIL 
Classe V Ca 
invasor 
(LSIL = lesão intraepitelial escamosa de baixo grau; HSIL – lesão intraepitelial 
escamosa de alto grau) 
3 
Características citológicas importantes 
 
 
 
 
 
 
 
 
aumento do tamanho do núcleo 
 variação no tamanho e forma do núcleo 
bordas nucleares irregulares e proeminentes 
perda da relação núcleo-citoplasma 
nucléolos irregulares e proeminentes 
hipercromatismo 
forma e distribuição anormal da cromatina 
discrepância de maturação em conjunto de células 
4 
Dados essenciais que devem constar nos 
pedidos de exames histocitopatológicos 
 
 Idade 
 Sexo 
 Uso de medicamentos 
 Data da última menstruação 
 Nacionalidade/Naturalidade 
 Profissão 
 Local da biópsia 
 Resumo da história clínica/ Hipótese diagnóstica 
 Tipo de cirurgia 
5 
Exames anatomopatológicos - Biópsia 
 Remoção total ou parcial de um tecido vivo para fins diagnósticos 
 
 Fixação da peça – é feita com formol a 10% ou formaldeído a 4% 
(fixador universal) em um volume 6 a 10 vezes o tamanho da peça 
 
 Tipos de biópsia 
 Excisional – biópsia feita para remoção total de uma lesão, geralmente 
aplicada em pequenos nódulos e mancha. 
 
 Incisional – biópsia onde apenas uma parte da lesão e uma parte do 
tecido normal são removidas para fins diagnósticos 
 
 Punção ou biópsia aspirativa - técnicas utilizadas para coletar material 
nas cavidades ósseas e abdominal e também das mamas. 
 
 Congelamento (transcirúrgica) utilizada 
durante grandes cirurgias, geralmente 
 em casos de neoplasias malignas. 
 
6 
 
 
 Análise morfológica 
 1. Fixação 
 2. Desidratação gradativa em álcool 
 3. Inclusão em parafina 
 4. Corte ao micrótomo 
 5. Diafanização em xilol 
 6. Coloração 
 
 
 Coloração – depende do tipo de 
 biópsia e do tipo de tecido 
 P.A.S. (Ácido periódico de Schiff) 
 H.E. (Hematoxilina-Eosina) 
 Sudan 
 Prata 
 Giemsa 
 Ziehl Neelsen 
 Outras 
 
 
 
7 
Necropsia ou Autópsia – exame post mortem sistemático dos 
órgãos ou partes deles para determinar a causa da morte e conhecer as 
lesões e doenças existentes no indivíduo. 
 
 
 
 Correlacionar achados morfológicos com os clínicos (causa) 
 Instrumento de pesquisa 
 Método de ensino-aprendizagem 
 Necropsias médico-legais (causa morte) – homicídios, suicídio, acidente 
de trânsito ou trabalho – sangue e secreções/ toxicológico 
8 
 Imunohistoquímica 
 
Imunofluorescência 
 
 
Técnicas Imunoenzimáticas 
 
Aplicações: neoplasias, doenças infecciosas e 
parasitárias, etc. 
9 
Imunofluorescência direta 
Imunomarcação para 
Chlamydia 
trachomatis 
 
10 
Imunofluorescência indireta 
Trypanosoma cruzi marcado por 
anticorpos fluorescentes 
Trypanosoma cruzi 
corado com Giemsa 11 
Imunofluorescência 
Indireta 
Antígenos 
Amostra 
contendo 
Anticorpos 
Conjugado 
12 
Imunofluorescência 
 
 
13 
14 
ELISA INDIRETA 
 
Anti-Ac + 
enzima 
Antígenos 
Soro 
contendo 
Anticorpos 
Substrato 
E E E E E 
15 
Ac humano 
anti proteínas virais 
Immunoblot 
E 
E 
E 
Anti IgG humana 
conjugada 
com peroxidase 
Substrato 
E 
Proteínas Virais 
c100(p) 5-1-1(p) 
c33c 
c22(p) 
Proteínas Virais 
NS5 
E 
Nível II 
IgG 
c100 (p) 
c33c 
c22 (p) 
NS5 
hSOD 
Nível I 
IgG 
16 
Cultura celular 
 
• Consiste basicamente 
na manutenção e 
multiplicação in vitro de 
células vivas. 
• Células podem ser 
mantidas em laboratório 
se receberem 
nutrientes, vitaminas e 
estímulos hormonais 
adequados. 
• Podem ser usadas 
como modelos 
experimentais 
17 
 Exemplos de cultura de 
células 
 Fig. 4 – Células em cultura 18 
Cultivo de células 
 
Células cancerosas mantidas em meio de cultura 
19 
 Citometria 
 
- Consiste na determinação quantitativa de componentes 
celulares. O método baseia-se na ligação específica de 
uma substância a determinado componente celular, o qual 
posteriormente é reconhecido seletivamente. 
 
20 
 Técnicas de Biologia Molecular 
- Avanços promoveram grande impacto na Patologia 
 
-Aplicações: neoplasias, doenças infecciosas, 
doenças genéticas, etc. 
 
 
 
21 
Detecção do 
 sexo fetal 
22