histologia básica métodos de estudo .pdf

Prévia do material em texto

Universidade Federal de Goiás 
 Do grego HISTOS = tecido e LOGIA = ramo do 
conhecimento 
 
 Histologia = CIÊNCIA DOS TECIDOS 
 
 Fornece conhecimentos básicos iniciais sobre a 
compreensão da relação entre estruturas e funções 
normais do corpo em nível celular, preparando o 
caminho para estudos subseqüentes da estrutura e 
funções anormais 
 
Universidade Federal de Goiás 
 Unidades vivas fundamentais a partir das quais os 
animais e plantas são constituídos 
ORGANELAS 
Mitocôndrias, Golgi, Rer, 
Rel, Lisossomos, 
Peroxissomos, 
Ribossomos 
CÉLULAS 
TECIDOS 
ÓRGÃOS 
SISTEMAS 
HISTOLOGIA 
NÚCLEO 
CITOPLASMA 
Unidade fundamental 
de todos os 
organismos vivos 
CÉLULAS 
Universidade Federal de Goiás 
EPITELIAL 
NERVOSO 
MUSCULAR CONJUNTIVO 
CARTILAGINOSO SANGUÍNEO ÓSSEO 
TECIDOS 
Células + Matriz 
extracelular 
 4 tipos básicos 
 Células especializadas e expressam uma ou mais propriedades 
fisiológicas 
Universidade Federal de Goiás 
 COMO SE ESTUDA A HISTOLOGIA? 
 
 
 
 
 
 
◦ MICROSCÓPIO DE LUZ 
 - aumento 
 - resolução 
◦ AMOSTRAS DE TECIDOS EM LÂMINAS 
 
 
Universidade Federal de Goiás 
 LÂMINA HISTOLÓGICA 
 
 Como a amostra pode ser obtida? 
 Como o material a ser visualizado é colocado em 
uma lâmina para ser visto ao microscópio de luz? 
OLHO 
OCULAR 
OBJETIVA 
AMOSTRA 
CONDENSADOR 
LUZ 
LÂMINA HISTOLÓGICA 
Universidade Federal de Goiás 
Processamento 
histológico pela 
inclusão (parafina) 
Distensão ou 
esfregaço 
(distensão 
sanguinea) 
Espalhamento 
(esfregaço bucal, 
vaginal) 
AMOSTRAS 
Fragmento de tecido 
Amostra de sangue 
Amostra de células 
Universidade Federal de Goiás 
 Técnica de Inclusão em 
Parafina 
◦ Técnica usada 
rotineiramente em 
LABORATÓRIO DE 
ANATOMIA PATOLÓGICA 
e PESQUISA BIOLÓGICA 
 
 Técnica de Inclusão em 
Historesina 
 
 OBJETIVOS: 
◦ Obtenção de CORTES 
FINOS possíveis de serem 
atravessados pela luz ao 
Microscópio de Luz 
◦ Análise da MORFOLOGIA 
◦ Esclarecer Diagnóstico 
(Biopsias) 
◦ Material de Pesquisa 
 
INCLUSÃO: Procedimento que tem como finalidade IMPREGNAR os tecidos 
com uma substância de CONSISTÊNCIA FIRME e uniforme que permita cortá-los 
(PARAFINA OU RESINA) 
Universidade Federal de Goiás 
 Fixação 
 Desidratação 
 Diafanização ou clareamento 
 Infiltração 
 Inclusão em parafina 
 Microtomia 
 Coloração 
 Montagem 
 
Universidade Federal de Goiás 
Universidade Federal de Goiás 
 MICRÓTOMO 
Navalha de aço 
Universidade Federal de Goiás 
BANHO MARIA 37O C 
COLORAÇÃO 
HIDRATAÇÃO 
Xilol 
I e II 
Álcool Água 
 Absoluto I e II 95% 70% 
2 min 1 min 1 min 1 min 1 min 
ESTUFA 40O C 
24 horas 
Universidade Federal de Goiás 
 Etapa indispensável para estudar os cortes 
histológicos 
 
◦ Consiste geralmente em CORAR de diferentes cores, 
estruturas presentes nos cortes previamente incolores 
 
 Facilita o estudo dos tecidos 
 Fixa seletiva ou eletivamente em determinadas estruturas 
celulares conferindo a elas diferentes graus de absorção 
de luz 
Universidade Federal de Goiás 
 Podem ser classificados em: 
◦ ÁCIDOS 
◦ BÁSICOS 
 
 Corante usual: HEMATOXILINA & EOSINA 
CORANTE BÁSICO 
Cora estruturas ácidas 
ou basofílicas 
CORANTE ÁCIDO 
Cora estruturas básicas 
ou acidofílicas 
Afinidade tintorial 
nuclear 
Demonstra 
inclusões e 
alterações 
citoplasmáticas 
Universidade Federal de Goiás 
 Corantes 
Metacromáticos 
◦ Coram determinadas 
estruturas com coloração 
diversa da sua 
◦ AZUL DE TOLUIDINA 
 
 Hematoxilina Férrica 
Universidade Federal de Goiás 
 Tricômicos  Impregnação por prata 
◦ Algumas substâncias 
intra e extracelulares 
promovem a redução do 
nitrato de prata formando 
precipitados negros em 
algumas estruturas 
 
Universidade Federal de Goiás 
COLORAÇÃO 
DESIDRATAÇÃO e MONTAGEM 
Água Álcool Xilol Montar 
70% 95% Absoluto I e II 
1 min 1 min 1 min 1 min 
ANÁLISE AO 
MICROSCÓPIO 
LAMÍNULA 
Universidade Federal de Goiás 
Universidade Federal de Goiás 
 Técnicas de preparação de tecidos duros 
 
◦ OSSOS 
 
◦ DENTES 
 (1) DESGASTE 
 (2) DESCALCIFICAÇÃO ou DESMINERALIZAÇÃO 
Universidade Federal de Goiás 
 Desgaste 
◦ Preserva a parte mineral da matriz óssea 
◦ Não preserva células 
 
Universidade Federal de Goiás 
 DESCALCIFICAÇÃO 
 
 Preserva as células do 
tecido 
 
 Remoção do cálcio tecidual 
SEM alterações na estrutura 
celular 
 
 Fragmentos pequenos: até 
5mm 
 
 
 Uso de substâncias 
descalcificadoras de natureza 
ácida - APÓS A FIXAÇÃO 
como: Ácido nítrico, clorídrico, 
acético, fórmico, pícrico 
 
Universidade Federal de Goiás 
 Distensão sanguínea ou esfregaço 
Leucócito Hemácia 
Leucócito 
 - Utilizado para: 
• fazer uma DIFERENCIAÇÃO entre os leucócitos (contagem do número de neutrófilos, 
linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos, chegando-se a uma porcentagem de cada 
uma destas células). 
• AVALIAR a série vermelha e as plaquetas. 
• DIAGNOSTICAR e GERENCIAR muitas condições e doenças. 
Universidade Federal de Goiás 
 Coradas com misturas especiais (Leishman; 
Giemsa; May-Grunwald) derivadas do corante tipo 
Romanowsky; 
 
◦ Corante ácido - EOSINA 
◦ Corante básico - AZUL DE METILENO 
◦ Corantes básicos de cor púrpura – AZURES 
 
 Resultados previstos 
◦ Estruturas ACIDÓFILAS coram-se em ROSA-AMARELADO 
◦ Estruturas BASÓFILAS coram-se em AZUL 
◦ Estruturas AZURÓFILAS coram-se em PÚRPURA 
 
Universidade Federal de Goiás 
Universidade Federal de Goiás 
Fonte: Histologia Básica, Junqueira 
e Carneiro