Aula de Citomorfologia Bacteriana 2013

Prévia do material em texto

*
Citomorfologia Bacteriana: Componentes e Estruturas
*
As Bactérias: Reino Monera
São seres procariontes, 
Encontram-se na maioria dos ambientes naturais, 
Apresentam forma variada,
Multiplicam-se com rapidez, principalmente quando o substrato é farto, 
Em condições adequadas uma simples célula procariótica pode dividir-se a cada 20 minutos e originar 5 bilhões de células em 12h!
A habilidade de dividir-se de forma rápida promove a habilidade de se adaptar às mudanças de ambiente.
*
Morfologia bacteriana
As células bacterianas são caracterizadas pelo tamanho, forma, arranjo e estrutura que apresentam.
 São vistas microscopicamente;
 A sua maioria possui diâmetro variando entre 0,2 a 1,5 µm (micrometro) de diâmetro e 1 a 6 µm de comprimento.
*
Célula bacteriana
Essencial
Essencial
Essencial
Essencial na maioria
*
CITOPLASMA
COMPOSIÇÃO DO CITOPLASMA
1- NUCLEÓIDE
 Composto de DNA (molécula única)
 Plasmídios
2-RIBOSSOMOS
 Síntese Protéica
3-INCLUSÕES ( DEPÓSITOS DE RESERVA)
 Grânulos de volutina (polifosfatos)- característicos do Corynebacterium diphtheriae 
*
COMPOSIÇÃO DO CITOPLASMA
 GRÂNULOS DE POLISSACARÍDEOS : Glicogênio e Amido
 GRÂNULOS DE ENXOFRE: Reserva de energia
 INCLUSÕES LIPÍDICAS (Mycobacterium, Bacillus...)
 CARBOXISSOMOS: Contêm a enzima ribulose 1,5-difosfato carboxilase – “bactérias autotróficas”
 VACÚOLOS DE GÁS: Flutuação
 MAGNETOSSOMOS: Contêm óxido de ferro – magnetotáticas 
 CLOROSSOMAS: bactérias fotossintéticas verdes
*
Microscopia Eletrônica
 Ausência de Membrana Nuclear
 Cromossomo Único, Circular, compactado por ligações covalentes
 Composição:
	- DNA
	- RNA
	- Proteínas
Corpo Nuclear
*
Estrutura Segundo Modelo de Watson & Crick
 Super enrolamento:
	- DNA Girase
	- Topoisomerase
 Proteínas Fixadas ao DNA
 Replicação – Semi-conservativa
Estrutura do DNA
*
Ribossomos
Ribossomos são os locais de síntese de proteína. 
Eles não são limitados por membranas e portanto 
ocorrem em procariontes quanto em eucariontes. 
Unidos pelo RNAm formam o polissomo
 						
 30s – 16s + 21 Proteínas
	
Rib. : 70 S	 26s
	 	 50s + 32 Proteínas
			 5s
*
Modelo Mosaico Fluido De Singer y Nicholson
Membrana Citoplasmática
Estrutura - Bicamada de
 Fosfolipídios 
 Proteínas
 ( Periféricas e Integrais) 
 Mesossomas 
( Invaginações)
*
 FUNÇÕES
 Permeabilidade seletiva e Transporte de Solutos.
 Difusão passiva: não requer energia.	
 Excreção de Exoenzimas Hidrolíticas e Proteínas de Patogenicidade.
 Degradar macromoléculas em subunidades.
 Transporte quimiosmótico impulsionado. 	
Membrana Citoplasmática
*
Transporte de elétrons e fosforilação oxidativa em espécies aeróbias 
 - análogo funcional da membrana mitocondrial
 Biosíntese de outras estruturas como:
 Sede de enzimas para formação da parede celular e de lipídios transportadores
…Funções Membrana Citoplasmática
*
 Determina a forma celular;
 Protege de pressão 
osmótica;
 Permite a classificação 
bacteriana;
 Importante Antígeno de superfície;
 É alvo de ntibióticos.
 Contém peptidoglicano!
Parede Celular
*
Parede Celular
COMPOSIÇÃO
 CAMADA DE PEPTIDOGLICANO: polímero
Constituída de monômeros:
 n-acetilglicosamina 
 ácido n-acetilmurâmico (ou mureína)
 Tipos de Parede:
	- Espessa (bactérias gram positiva): cerca de 40 camadas
	- Única (bactérias gram negativa) 
*
 Estrutura em Bactérias
 Proteção de Lise celular e da 	forma da Bactéria.
ESTRUTURA
 Estrutura Básica do 	Peptidoglicano.
Parede Celular
*
 GRAM
POSITIVO
~ 40 camadas
lisozima
Peptidoglicano
Ponte de tetrapeptídio
Pentaglicina
*
Coloração de Gram: Christian Gram (1884)
Confeccionar o esfregaço; 
Secar ao ar e fixar em chama; 
O 1° Corante: Cobrir a lâmina com cristal violeta; 
Lavar em água corrente; 
O Mordente: Cobrir a lâmina com lugol por 2 minutos; 
Lavar a lâmina; 
O Diferenciador: Descorar rapidamente com álcool-cetona; 
Lavar a lâmina; 
Cobrir com safranina ou fucsina diluída de gram por 30 segundos; 
Lavar a lâmina, secar e ler. 
*
Esquema da Coloração de Gram
*
Análise microscópica
Coloração de Gram
*
Constituintes especiais da Parede Celular de Bactérias Gram +
 ácido teicóico e lipoteicóico
*
Ácido Teicóico
Regulam a atividade de enzimas que participam da síntese da parede celular
 importantes na resistência à lise pela lisozima;
 Importância na patogênese de doenças causadas pro bactérias Gram-positivas: promove a sobrevivência bacteriana servindo como adesinas;
*
 MEMBRANA EXTERNA 
 Possui canais especiais constituídos de moléculas de proteínas (porinas ) - permitem a difusão passiva de compostos hidrofílicos de baixo peso molecular
 LIPOPOLISSACARÍDEOS
 LIPÍDIO ‘A’ : Propociona barreira contra moléculas hidrofóbicas e funciona como ENDOTOXINA
 ANTÍGENO ‘O’ 
Constituintes especiais da Parede Celular de Bactérias Gram -
*
Parede Celular de Bactérias Gram- 
*
Parede celular: método de Gram
Bactéria gram-positiva
*
Parede celular: método de Gram
Bactéria gram-negativa
*
Morfologia das Bactérias
*
Formas Bacterianas
cocos
G-
G+
Bacilos
G+
Vibrião
G-
*
Micoplasmas: bactérias sem parede
Micrografia eletrônica de Varredura
*
GLICOCÁLICE 
GLICOCÁLICE
 REDE FROUXA DE FIBRILAS QUE SE ESTENDE PARA FORA DA CÉLULA
 DESEMPENHA PAPEL NA ADERÊNCIA
*
CÁPSULA
Cápsula
 Camada condensada e bem definida que circunda a célula;
 Contribui para
 Capacidade de invasão das bactérias 
Patogênicas;
- Produção de vacinas;
 Biotecnologia: cosméticos, uso odontológico etc.
*
FLAGELOS
 Apêndices filiformes
 Compostos de protéina
 ( Flagelina )
 Órgãos de locomoção 
 Altamente antigênicos
 ( Antígenos h )
 Dividem-se:
 Monotríquio (polar)
 Lofotríquio (polares múltiplos)
 Peritríquio (distribuídos por toda superfície)
 Anfitríquio (único ou múltiplos nos dois polos)
*
FLAGELOS – Gram-
*
FLAGELOS – Gram+
*
*
PILI ( FÍMBRIAS )
 Apêndices superficiais rígidos 
 Compostos de proteínas ( pilinas )
 Antígenos de colonização
Classificam-se:
 Pili comuns aderência das bactérias às células hospedeiras. 
 Pili sexuais: fixação das células doadoras e receptoras da conjugação bacteriana
*
ENDOSPOROS
 Células especializadas de repouso;
 Altamente resistentes à dessecação, ao calor e agentes químicos
 Produção de uma única célula vegetativa
PROCESSO DE FORMAÇÃO 
1. ESPORULAÇÃO OU ESPOROGÊNESE
 Formacão de endosporos dentro de uma célula mãe. 
2. GERMINAÇÃO
 Ativada pela lesão física ou química ao revestimento do endosporo com liberação de enzimas e rompimento das camadas externas com entrada de água-recomeça o metabolismo.
*
ENDOSPOROS
*
Esporos bacterianos
É liberado para o meio ambiente juntamente com a morte da célula parental que o originou.
Quando o meio externo se torna favorável, os esporos revertem para a forma vegetativa do bacilo, processo de germinação.
Doenças graves causadas por bactérias formadoras de esporos: antraz, tétano, botulismo e gangrena gasosa.
*