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Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Histologia Roteiro de Aulas Práticas Prof a . Dr a . Noemia Pereira da Silva Santos Prof a . Dr a . Katharine Raquel Pereira dos Santos Prof. Dr. Francisco Carlos Amanajás de Aguiar Júnior Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Epitelial de Revestimento Objetivos: Identificar os epitélios de revestimento indicados por NÚMEROS, observando-os ao microscópio óptico, classificando-os de acordo com os seguintes critérios: número de camadas celulares, forma das células superficiais e especializações. Identificar estruturas presentes na lâmina indicadas por LETRAS. Rim – Hematoxilina-Eosina (H.E.) Palato – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A B 1 2 A 1 2 Informações adicionais: Nos túbulos renais existe uma única camada de células cúbicas, na qual a altura é semelhante à largura. Funcionalmente este epitélio pode absorver ou secretar, modificando dessa forma, a composição do filtrado que circula na luz dos túbulos. Os corpúsculos renais (estruturas arredondadas) circundadas pelo folheto parietal da cápsula de Bowman. Observe que este folheto apresenta uma única camada de células achatadas. Informações adicionais: Diferencie o epitélio intensamente basófilo do tecido conjuntivo adjacente, pouco acidófilo. As células epiteliais formam várias camadas. As células basais, mais próximas do tecido conjuntivo, são prismáticas, com núcleos alongados (camada basal); acima desta camada as células são poliédricas com núcleos mais esféricos e mais distantes uns dos outros (camada espinhosa) e, à medida que se aproximam da superfície epitelial, as células vão se pavimentosas, apresentando núcleos achatados e pouco corados (camada granulosa). A camada lúcida, muito delgada, forma uma linha eosinofila clara, refringent e e homogênea, núcleos pouco visíveis. Mais superficialmente observa-se uma camada acidófila de células mortas, anucleadas e queratinizadas (camada córnea). Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Seio Paranasal (Maxilar) – Hematoxilina-Eosina (H.E.) Esôfago – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A 1 2 1 2 Informações adicionais: Localize o epitélio, camada basófila e o tecido conjuntivo, região levemente acidófila, adjacente ao epitélio. Este epitélio é formado por uma única camada de células, em sua maioria cilíndricas e com cílios, porque observamos ao MO células com núcleos em alturas diferentes. Identifique ao MO três tipos de células: células basais, células prismáticas ciliadas e caliciformes. Observe ainda a presença de cílios das células prismáticas. Informações adicionais: O epitélio do revestimento interno do órgão é constituído por várias camadas celulares, cuja forma varia desde prismático, com núcleos alongados nas células da camada basal; poliédrico com núcleos arredondados, nas camadas subseqüentes, até que adquire um aspecto pavimentoso, com núcleos alongados e densos, na camada superficial. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Epidídimo – Hematoxilina-Eosina (H.E.) Bexiga – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A B 1 1 2 O epitélio está constituído por apenas uma camada de células com núcleos em alturas diferentes. É composto pelas células basais (servem como células-fontes) e pelas células principais (as longas cilíndricas). Neste epitélio observamos longos e ramificados microvilos (estereocílios) projetando-se na luz, a qual contém espermatozóides. Este epitélio participa da absorção e digestão dos corpos residuais das espermátides, que são eliminados durante a espermiogênese. Informações adicionais: O epitélio, ligeiramente basófilo, revestindo a cavidade da bexiga e o tecido conjuntivo, acidófilo adjacente. Observe que este epitélio aparentemente apresenta várias camadas e seus núcleos estão em várias posições. Suas células mais superficiais apresentam-se arredondadas ou achatadas, dependendo do estado funcional do órgão. Os limites celulares são bem visíveis, devido à presença de grande quantidade de glicocálix entre as células deste epitélio. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Epitelial Glandular Objetivos: Identificar os tipos de epitélios glandulares indicados por NÚMEROS, observando-os ao microscópio óptico, classificando-os de acordo com os seguintes critérios: número de células, local onde a secreção é lançada,ducto e porção secretora e modo de secreção. Identificar demais estruturas ou tecidos presentes na lâmina indicados por LETRAS. Orelha – Hematoxilina-Eosina – H.E. Adrenal – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A B 1 2 1 2 Informações adicionais: Abaixo do epitélio, e mergulhada no tecido conjuntivo adjacente, localize as glândulas, que são consideradas como uma glândula acinar modificada, porque tem um aspecto maciço, não havendo luz no interior do adenômero. Observe que o ácino é preenchido por células claras, cheias de gotículas de lipídios, citoplasma pouco eosinófilo e núcleo central. Seu ducto excretor desemboca geralmente em um folículo piloso. A secreção destas glândulas é eliminada juntamente com toda a célula, caracterizando-as como holócrinas. Informações adicionais: Identifique o tecido epitelial glandular, constituído de células epiteliais dispostas em fileiras ou cordões irregulares. Observe que estas células, em sua maioria são poliédricas. Às vezes apresentam citoplasma intensamente corado, conforme a região do corte. Observe a proximidade das células, característica de células epiteliais. Observe ainda os núcleos que, geralmente, são arredondados com cromatina pouco condensada e de posição central nas células. Entre os cordões celulares ocorre tecido conjuntivo, com pequenos vasos sanguíneos. Nesta glândula não há ductos e o produto de secreção (hormônios) é lançado diretamente nos vasos sanguíneos. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Intestino Delgado – Ácido Periódico de Schiff – P.A.S. 1 2 A B 3 Informações adicionais: Identifique o epitélio e o tecido conjuntivo adjacente, onde se observam secções longitudinais e transversais de glândulas (Glândulas intestinais ou Lieberkühn). Observeos túbulos glandulares: cada túbulo corresponde a uma glândula, constituída predominantemente de células caliciformes e que praticamente não possui ducto típico, uma vez que o seu epitélio é o mesmo até a superfície da glândula. Informações adicionais: As células colocadas entre as células do epitélio de revestimento, caracterizam-se por tomarem uma coloração avermelhada em contraste com as células vizinhas que não tomam coloração devido a técnica do PAS. Por ser formada apenas uma célula epitelial, ela é classificada como uma glândula unicelular. Em algumas preparações podemos encontrar, por sobre os cílios das células vizinhas, o produto de síntese (glicoproteínas ácidas do tipo mucina) destas células, corado em púrpura. Apesar de ser exócrina, essa glândula não apresenta ducto, sendo intraepitelial, abre-se diretamente na superfície do epitélio que a contém. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Conjuntivo Objetivos: Identificar os tipos de tecidos conjuntivos, suas fibras ou células indicadas por NÚMEROS, observando-os ao microscópio óptico. Identificar demais estruturas ou tecidos presentes na lâmina indicados por LETRAS. Artéria Aorta – Verhoeff Fígado – Prata Reticulina 1 1 Informações adicionais: Observe os feixes de fibras, comumente evidenciados na parede de artérias de grande calibre. Nesta técnica os feixes coram-se de púrpura, roxo ou grafite. Os feixes apresentam uma forma sinuosa e são mais espessos que os feixes de fibras reticulares. Informações adicionais: Observe os feixes de fibras corados em grafite, constituídas principalmente de colágeno do tipo III associado a elevado teor de glicoproteínas e proteoglicanas. Este tecido conjuntivo constitui o estroma que promove suporte para os hepatócitos do fígado. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Fígado – Tricrômico de Masson Útero – Hematoxilina-Eosina (H.E.) 1 1 Informações adicionais: Observe o tecido conjuntivo interlobular. A coloração indicada no corte ao lado, revela a presença de delgadas fibras colágenas coradas em azul. O referido tecido conjuntivo promove suporte para a tríade (bilífero, vênula e arteríola) hepática. Informações adicionais: O endométrio uterino está constituído pelo epitélio simples prismático com células secretoras e ciliadas, subjacente a este, a lâmina própria de tecido conjuntivo. O endométrio é dividido em duas camadas: a basal mais profunda composta por tecido conjuntivo e porção inicial das glândulas uterinas, e a camada funcional, que está formada pelo restante do tecido conjuntivo da lâmina própria, porção final e desembocadura das glândulas uterinas, assim como o epitélio superficial. A camada funcional sofre alterações ao longo dos ciclos menstruais, enquanto a basal, permanece praticamente inalterada. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Palato – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A 1 2 3 4 Informações adicionais: Identifique abaixo do epitélio de revestimento, o tecido conjuntivo. Observe que o tecido conjuntivo, situado imediatamente abaixo do epitélio, é rico em fibras colágenas finas, substância fundamental amofa e fibrócitos. Embora presentes neste tecido, alguns elementos como fibras reticulares, fibras elásticas, macrófagos e mastócitos são de difícil reconhecimento em HE. Identifique mais profundamente o tecido conjuntivo que se caracteriza pela predominância de fibras colágenas espessas que se intercruzam em vários sentidos, assim como a substância fundamental amorfa e grande número de fibrócitos. Informações adicionais: Neste tecido observam-se espessos feixes de fibras acidófilos dispostos irregularrmente e variados tipos celulares. Alguns destes tipos celulares podem ser reconhecidos a partir da caracterização abaixo: Fibroblasto: célula fusiforme, núcleo bastante corado e citoplasma quase imperceptível à microscopia de luz. Linfócito: é uma célula arredondada e muito pequena, com núcleo bem corado (cromatina condensada) que ocupa praticamente toda a célula (o citoplasma dificilmente é visualizado). Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Cordão Umbilical – Hematoxilina-Eosina (H.E.) Tecido Adiposo Objetivos: Identificar as células indicadas por NÚMEROS, observando-os ao microscópio óptico. Timo – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A B 1 A 1 2 Informações adicionais: Identifique a presença dos vasos sanguíneos mergulhados no tecido conjuntivo. Observe as características deste tecido como: fibroblastos imersos em uma abundante matriz extracelular frouxa, constituída principalmente por ácido hialurônico e esparsas fibras colágenas. Este tecido é conhecido também como geléia de Wharton. É encontrado no cordão umbilical e na polpa jovem do dente. Informações adicionais: As células adiposas podem ser encontradas isoladas ou em pequenos grupos no tecido conjuntivo. Armazenam lipídios na forma de triglicerídeos. O tecido adiposo varia quanto à morfologia, fisiologia, patologia e distribuição no corpo, o que diferencia este tecido em: Adiposo Amarelo ou Unilocular e Adiposo Pardo ou Multilocular. O tecido adiposo Unilocular apresenta uma única gotícula grande e tem função principal de reserva energética. Enquanto o Multilocular contêm várias gotículas e funciona como termorregulador. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Cartilaginoso Objetivos: Identificar os tipos de tecido cartilaginoso, suas fibras, estruturas ou células indicadas por NÚMEROS, observando-os ao microscópio óptico. Identificar demais estruturas ou tecidos presentes na lâmina indicados por LETRAS. Orelha – Verhoeff Laringe – Hematoxilina-Eosina (H.E.) 1 2 A 1 2 Informações adicionais: Este tipo de cartilagem se assemelha à cartilagem hialina, porém inclui além das fibrilas de colágeno do tipo II, uma abundante rede de fibras elásticas, coradas nesta preparação em grafite. Assim como a hialina, esta cartilagem apresenta um pericôndrio. Entretanto, diferencia-se da hialina, pois os grupos isógenos são menos freqüentes, e sua coloração é menos basófila em coloração H.E. devido a grande quantidade de fibras elásticas. Informações adicionais: Observe a cartilagem revestida por um tecido conjuntivo denso. Identifique os condroblastos (alongados, citoplasma pouco corado, cromatina pouco condensada), os condrócitos (arredondados, observados isolados ou em ninhos de até 8 células-grupos isógenos) situados em lacunasna matriz cartilaginosa altamente basófila (ác. hialurônico e proteoglicanas) e homogênea (fibrilas e fibras colágenas finas). O material intercelular próximo aos condrócitos tem menos fibrilas colágenas, é mais basófilo e é denominada matriz territorial ou capsular. A região mais afastada dos condrócitos é denominada matriz interterritorial. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Ósseo Objetivos: Identificar as estruturas, tecidos ou células indicadas por NÚMEROS, observando-os ao microscópio óptico. Fêmur – Hematoxilina-Eosina (H.E.) 1 5 2 6 3 7 4 Informações adicionais: Observe o tecido conjuntivo denso modelado que recobre externamente o osso e o tecido conjuntivo frouxo, contendo osteoblastos em repouso, osteoblastos ativos, células osteogênicas. Os Espaços medulares, entre as trabéculas, são ocupados por tecido mesenquimal ou por tecido mielóide. No tecido ósseo primário ou imaturo, os osteócitos são grandes e muito numerosos, apresentam disposição irregular assim como as fibras colágenas da matriz óssea, enquanto o inverso é observado no tecido ósseo secundário ou maduro. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Osso – Desgaste Células do Sangue Objetivos: Identificar os elementos figurados presentes nas lâminas de esfregaço com base nas figuras abaixo. Sangue- Esfregaço 1 2 3 Informações adicionais: Identifique as lamelas ósseas paralelas de fibras colágenas na superfície da matriz óssea entremeadas por fileiras de lacunas, e as lamelas ósseas concêntricas que formam os canais de Havers mais internamente. Estes canais consistem em espaços longos, cilíndricos, paralelos ao maior eixo da diáfise, revestidos por endósteo, contendo vasos sanguíneos e nervos. Já os Canais de Volkmann, transversais ou oblíquos, através dos quais os canais de Havers se comunicam uns com os outros, ou com o canal medular e/ou com a superfície externa. Informações adicionais: Glóbulos vermelhos/hemácia/eritrócitos apresentam a forma de disco bicôncavo circular, não possuindo núcleo nos mamíferos. Enquanto os glóbulos brancos/leucócitos estão classificados em granulócitos/polimorfonucleares (com grânulos específicos no citoplasma) e agranulócitos/ mononucleares (sem granulações específicas no citoplasma). A diferenciação dos diferentes tipos de leucócitos é realizada de acordo com a morfologia do núcleo das células. As plaquetas consistem em pequenos fragmentos de células precursoras da medula óssea (megacariócitos). Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Muscular Objetivos: Distinguir ao microscópio óptico os tipos de tecido muscular, observando a morfologia de suas células, forma e distribuição de suas células indicadas por NÚMEROS. Identificar demais estruturas ou tecidos presentes na lâmina indicados por LETRAS. Língua – Hematoxilina-Eosina (H.E.) A B C D E F 1 2 3 4 5 Informações adicionais: Observe as fibras (células), cilíndricas, multinucleadas, apresentando estriação transversal nos cortes longitudinais devido à disposição paralela das miofibrilas. Estas miofibrilas proporcionam tais estriações devido à disposição das proteínas contráteis (miosina, actina, troponina e tropomiosina) nos filamentos grossos e finos que formam os sarcômeros. Observe o tecido conjuntivo que envolve um feixe de fibras/células musculares (ou o espaço deixado pela retração deste tecido) . O endomísio é o tecido conjuntivo que envolve cada uma das fibras/células, e é de difícil observação, às vezes só se identifica o espaço originado pela retração do mesmo. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Coração – Hematoxilina-Eosina (H.E.) Útero – Hematoxilina-Eosina (H.E.) 1 2 1 2 Informações adicionais: A camada média mais espessa do coração (miocárdio) é constituída de tecido muscular. As fibras musculares cortadas transversalmente exibem 1 ou 2 núcleos, geralmente centrais. Podem ser evidenciados em corte longitudinal, as estriações transversais e os discos intercalares. Estes discos, encontrados apenas nas células musculares cardíacas consistem em três especializações juncionais (zônulas de adesão, desmossomos e Junções comunicantes). Informações adicionais: A parede uterina está constituída por três camadas: uma mais externa (serosa ou dependendo da porção do órgão, chamada de adventícia), uma camada intermediária (miométrio) e a mais interna (endométrio). O Miométrio é a camada mais espessa do útero, está constituído por fibras musculares lisas que se distribuem em quatro camadas não muito bem definidas. Durante a gestação o miométrio sofre hiperplasia e hipertrofia, e pós o parto, há degeneração de algumas destas fibras musculares lisas e o útero reduz o seu tamanho às dimensões próximas de antes da gravidez. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Tecido Nervoso Objetivos: Identificar ao microscópio óptico as células e estruturas do tecido nervoso indicadas por NÚMEROS. Identificar demais estruturas ou tecidos presentes na lâmina indicados por LETRAS. Medula Espinhal – Hematoxilina-Eosina (H.E.) 1 2 3 4 5 6 7 8 Informações adicionais: A medula espinhal que se caracteriza por apresentar: a substância cinzenta central, em forma de H, fortemente corada (constituída principalmente por pericários e neuroglias) e a substância branca periférica, menos corada (formadas basicamente por axônios mielinizados e neuroglias). Podem ser evidenciados neurônios multipolares gigantes. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Cerebelo – Hematoxilina-Eosina (H.E.) Orelha – Verhoeff 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 Informações adicionais: Observe a substância branca no centro e a substância cinzenta na periferia, disposição inversa da medula espinhal, mas com constituição histologia semelhante. As células de Purkinje delimitam as camadas granulosa e molecular da substância cinzenta (córtex cerebelar). Estas células são caracterizadas por serem muito grandes, bastante visíveis, com forma geral piriforme e dendritros desenvolvidos, os quais estãoinseridos na camada molecular. Informações adicionais: Um nervo consiste em um conjunto de feixes de fibras nervosas fora do SNC. Observem no interior do feixe, as fibras nervosas que aparecem como um ponto rosado, o axônio, rodeado por uma zona clara, não corada, que era ocupada pela mielina, que foi dissolvida nesta preparação histológica. Envolvendo cada fibra nervosa, encontram-se núcleos, que poderão pertencer às células de Schwann (bainha de mielina), ou a fibroblastos do endoneuro. As fibras nervosas são reunidas por um tecido conjuntivo, chamado de perineuro. Quando se observa mais de um feixe de fibras nervosas reunidos, eles irão compor o nervo, estando envolvido pelo epineuro, podendo aparecer também tecido adiposo no mesmo. Roteiro de Aulas Práticas – Histologia Básica -2017/1 SANTOS, N.P.S.; SANTOS, K.R.P.;AGUIAR JÚNIOR, F.C.A. Bibliografia Básica GARTNER, L. P. Tratado de Histologia em cores. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007. JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO, J. Histologia Basica. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013. GARTNER, L. P.; HIATT, J. L. Atlas Colorido de Histologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007.
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