Estudo da Salmonelose em Bezerros

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ARS VETERINARIA, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº 1, 062-066, 2004. ISSN 0102-6380
ESTUDO DO PERFIL EPIDEMIOLÓGICO DA SALMONELOSE EM
BEZERROS E DA SENSIBILIDADE A ANTIMICROBIANOS NA
REGIÃO DE RIBEIRÃO PRETO –SP, BRASIL
(A STUDY OF THE EPIDEMIOLOGICAL PROFILE OF THE CALVES SALMONELOSIS AND
ANTIMICROBIANS SENSIBILITY IN THE RIBEIRÃO PRETO REGION - SP, BRAZIL)
(ESTUDIO DEL PERFIL EPIDEMIOLÓGICO DE LA SALMONELOSIS EN BECERROS Y
SENSIBILIDAD A ANTIBACTERIANOS EN LA REGIÓN DE RIBEIRÃO PRETO – SP, BRASIL)
R. N. PEREIRA1, F. A. ÁVILA2, S. A. FERNANDES3
RESUMO
Foram analisadas 204 amostras de fezes de bezerros com diarréia de raças leiteiras, na faixa etária de 20 a 90 dias, na
região de Ribeirão Preto-SP, com objetivo de estudar a freqüência de Salmonella e outros enteropatógenos, como também
caracterizar o perfil de sensibilidade a antibióticos e quimioterápicos Das amostras de fezes analisadas, foram isoladas
sete cepas de Salmonella sp (3,43%) de bezerros com seis semanas de idade, sendo seis pertencentes ao sorotipo Dublin
(2,94%) e uma ao sorotipo Typhimurium (0,49%). O teste de sensibilidade a antibióticos e quimioterápicos determinou para
os dois sorotipos de Salmonella (Dublin e Typhimurium) uma resistência de 100% para lincomicina, cefalotina, bacitracina,
eritromicina e penicilina.
PALAVRAS-CHAVE: Salmonella. Diarréia. Bezerro. Bovino de leite.
SUMMARY
Fecal samples collected from 204 calves with 20 to 90 days old, of dairy breeds, with diarrhea, in the region of Ribeirão Preto,
state of São Paulo were examined with objective of to study the frequency of Salmonella and other enteropathogens and
to determine the sensibility of this strains to antimicrobial agents. A total of seven (3,43%) Salmonella sp strains were
isolated of calves with six week old, been six of them of the serotype Dublin (2,94%) and one of the serotype Typhimurium
(0,49%). Among the antibiotics tested, those to which Salmonella (Dublin and Typhimurium) presented 100% resistence
were lincomicin, cefalotin, bacitracin, eritromicin and penicillin.
KEY-WORK: Salmonella. Diarrhea. Cattle. Dairy cattle
1 Acadêmico do Curso de Medicina Veterinária da FCAV/Unesp – Campus de Jaboticabal/SP.
*2 Professor Titular da FCAV/Unesp – Campus de Jaboticabal/SP. Rod. Prof. Paulo Donato Castellani, km 5. CEP. 14884-900.
End. Eletrôn.: favila@fcav.unesp.br
3 Pesquisador do Instituto Adolfo Lutz, São Paulo/SP.
 Apoio Financeiro FAPESP e CNPq.
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R. N. PEREIRA, F. A. ÁVILA, S. A. FERNANDES. Estudo do perfil epidemiológico da salmonelose em bezerros e sensibilidade a antimicrobianos na região de Ribeirão Preto
- SP, Brasil./ A study of the epidemiological profile of the calves salmonelosis and antimicrobians sensibility in the Ribeirão Preto region - SP, Brazil./ Estudio del perfil
epidemioógico de la salmonelosis en becerros y sensibilidad a antibacterianos en la region de Ribeirão Preto - SP, Brasil. Ars Veterinaria, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº
1, 062-066, 2004.
RESUMEN
Muestras de heces de 204 becerros con diarrea, de 20 a 90 días de edad, de razas lecheras, en la región de Ribeirão
Preto – SP, Brasil, fueron analizadas con el objetivo de estudiar la frecuencia de presentación de Salmonella y otros
patógenos entéricos, como también de caracterizar el perfil de sensibilidad a los antibióticos y quimioterápicos. De las
muestras analizadas fueron aisladas siete cepas de Salmonella sp (3,43%) de becerros con seis semanas de edad, de esas
muestras seis fueron pertenecientes al serotipo Dublin (2,94%) y una al serotipo Typhimurium (0,49%). El test de sensibilidad
a los antibióticos y quimioterápicos, para los dos tipos de Salmonella (Dublin y Typhimurium), determinó resistencia de
100% a lincomicina, cefalotina, bacitracina, eritromicina y penicilina.
PALABRAS CLAVE: Salmonella. Becerro. Diarrea. Bovino de leche.
INTRODUÇÃO
As salmonelas constituem um vasto grupo de
bactérias pertencentes a família Enterobacteriaceae que
inclui mais de 2200 sorotipos bioquimicamente
relacionados, capazes de infectar homens e animais. A
salmonelose dos bezerros causa sérios prejuízos à
bovinocultura, porque a enfermidade determina perdas
devidas à mortalidade e à queda na produção.
No Brasil, apesar de a salmonelose ocorrer há
bastante tempo, as diferentes condições de manejo,
escassez de recursos, combinada com a falta de infra-
estrutura para o diagnóstico laboratorial nas diversas
regiões do País, torna difícil estabelecer a incidência da
enfermidade entre os bovinos. Segundo TZIPORI (1985),
cerca de 31,9% das infecções que afetam bezerros com
diarréia e idade superior a 60 dias, podem ser atribuídas a
Salmonella enteritidis, sorotipo Dublin. Ainda, segundo
o mesmo autor, nos Estados Unidos da América, a
incidência pode chegar a mais de 50% dos casos de diarréia
em animais com até quatro semanas de vida.
HOWIE (1998) relatou os resultados de
monitoramento do Departamento de Agricultura dos
Estados Unidos referente à ocorrência de Salmonella e
E. coli O157 realizado em 96 fazendas produtoras de leite.
Pelos isolamentos realizados, os sorotipos de Salmonella
mais comuns encontrados foram: S. montivideo (21%), S.
cerro (13,4%), S. kentucky (8,5%), S. menhaden (7,7%),
S. anatum (6,2%), S. meleagridis e S. muenster (4,7%).
O Serviço Nacional de Saúde Animal (NAHMS)
estimou que a salmonelose bovina é responsável por
prejuízo de cem milhões de dólares na produção anual
dos Estados Unidos (SCHWARTZ, 1990). No Brasil, não
existem dados relativos às perdas causadas pela
salmonelose em bezerros.
No final da década de 50 e príncipio da de 60,
autores japoneses revelaram a existência dos plasmídios
R. Os fatores de resistência às drogas antimicrobianas (R)
são, na sua maioria, de natureza plasmidial. A partir de
então, vários outros pesquisadores, como NAKANO et
al. (1988), detectaram a sua presença nas enterobactérias
patogênicas “Salmonella”, “Escherichia coli” e outros
microorganismos do homem e animais. O presente trabalho
tem como objetivo estudar a freqüência de Salmonella sp
como agente etiológico de diarréia em bezerros de raças
especializadas na produção de leite na região de Ribeirão
Preto-SP,bem como caracterizar bioquímica e
sorologicamente os principais sorotipos de Salmonella
sp e outros enteropatógenos, e determinar a resistência
mediante a diferentes antimicrobianos.
MATERIAL E MÉTODOS
Durante o período de junho de 2000 a março de
2001, foram analisadas 204 amostras de fezes diarréicas
de bezerros com idade entre 20 a 90 dias, provenientes de
8 propriedades da região de Ribeirão Preto- SP. Estas
amostras foram colhidas com “swabs” estéreis do reto de
bezerros e colocadas em tubos de ensaio esterilizados
contendo 0,2 mL de solução fisiológica tamponada cada,
e transportados para o laboratório. Não foi possível colher
material (fragmentos de intestino, fígado e baço) de
animais mortos pela doença para isolamento bacteriano e
exames histopatológicos.
No laboratório, as amostras foram semeadas em
caldo selenito, incubadas por 24 horas a 37°C e
posteriormente semeadas em placas contendo ágar EMB
(Eosina- azul de metileno) e ágar McConkey e colocadas
em estufa a 37 ° C por 24 horas. As colônias (circulares,
transparentes e de 2-3 mm de diâmetro) não fermentadoras
de lactose que se formaram foram preservadas para
posterior identificação bioquímica.
De cada placa foram colhidas em média de 2 a 3
colônias lactose negativas, com características sugestivas
do gênero Salmonella. Algumas colônias lactose
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positivas também foram avaliadas. Essas colônias foram
semeadas em ágar Tríplice açúcar ferro (TSI) inclinado e
incubadas a 37° C por 24 horas. Realizada a primeira etapa
de identificação bioquímica com resultados sugestivos
de pertencerem ao gênero Salmonella, as amostras foram
analisadas de maneira mais detalhada perante a diversos
testes bioquímicos (produçãode Indol, vermelho de metila,
Voges & Proskauer, citrato, urease, H2S, lisina
descarboxilase, fenilalanina, motilidade, liquefação da
Quadro 1 - Número e porcentagem de Salmonella Dublin
e Salmonella Typhimurium e outros
enteropatógenos isolados de 204 amostras
de fezes diarréicas de bezerros.
Quadro 2 - Antibiograma de seis amostras de Salmonella Dublin e uma amostra de Salmonella Typhimurium diante de 17
antimicrobianos.
PL = Polimixina, TT = Tetraciclina, NT = Nitrofurantoina, KN = Kanamicina, TRI = Trimetoprim, LN = Lincomicina, CF = Cefalotina,
NO = Neomicina, NA = Ácido nalidixico, AP = Ampicilina, GN = Gentamicina, CO = Cloranfenicol, BC = Bacitracina, ET = Estreptomicina,
EL = Eritromicina, PN = Penicilina, DO = Doxiciclina. R = Resistente, I = Intermediário, - = Sensível.
gelatina, crescimento em caldo KCN, dulcitol, inisitol,
lactose, manitol, glicose, produção de gás, sacarose, xilose
e rafinose), recomendados por EDWARDS & EWING
(1972).
As amostras de Salmonella sp isoladas foram
identificadas bioquimicamente e sorologicamente usando
soros polivalentes anti-Salmonella sp somático e anti-
Salmonella sp flagelar e sorotipadas no Instituto Adolfo
Lutz- São Paulo, de acordo com a técnica preconizada por
POPPOF & MINOR (1997).
As amostras de Salmonella sp isoladas foram
submetidas a teste de sensibilidade a antimicrobianos
seguindo a metodologia estabelecida por BAUER et al.,
(1966), utilizando os seguintes discos de antibióticos e
ou quimioterápicos ( polimixina 300 UI, tetraciclina 30 mcg,
nitrofurantoína 300mcg, kanamicina 30 mcg, trimetoprim 5
mcg, lincomicina 2 mcg, cefalotina 30 mcg, neomicina 30
mcg, ácido nalidíxico 30 mcg, ampicilina 10 mcg,
gentamicina 10 mcg, cloranfenicol 30 mcg, bacitracina 10
un, estreptomicina 10 mcg, eritromicina 25 mcg, penicilina
10 UI e doxiciclina 30 mcg), que eram colocados e
pressionados levemente sobre o meio disposto em cada
placa e depois incubados a 37°C por 24 horas.
RESULTADOS
O quadro 1 mostra o número e porcentagem de
Salmonella sp e outros enteropatógenos isolados das
204 amostras de fezes diarréicas de bezerros, de oito
fazendas da região de Ribeirão Preto-SP. Sete amostras de
R. N. PEREIRA, F. A. ÁVILA, S. A. FERNANDES. Estudo do perfil epidemiológico da salmonelose em bezerros e sensibilidade a antimicrobianos na região de Ribeirão Preto
- SP, Brasil./ A study of the epidemiological profile of the calves salmonelosis and antimicrobians sensibility in the Ribeirão Preto region - SP, Brazil./ Estudio del perfil
epidemioógico de la salmonelosis en becerros y sensibilidad a antibacterianos en la region de Ribeirão Preto - SP, Brasil. Ars Veterinaria, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº
1, 062-066, 2004.
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Salmonella sp foram isoladas de fezes de bezerros com
diarréia e aproximadamente 6 semanas de idade, sendo
seis pertencentes ao sorotipo Dublin e uma ao sorotipo
Typhimurium, todas estando associadas a outros
enteropatógenos. Neste mesmo quadro pode-se também
observar que foram isoladas cepas de Escherichia coli
(49,5%), Arizona sp (1,9%), Citrobacter freundii (18,62%),
Enterobacter cloacae (5,3%), Proteus vulgaris (4,9%),
Pseudomonas aeruginosa (4,4%) e outros agentes
(11,95%).
DISCUSSÃO
No quadro 1, pode-se observar os resultados dos
isolamentos em 204 amostras de fezes colhidas, através
de “swab” retal, de bezerros com diarréia, em oito fazendas
leiteiras da região de Ribeirão Preto-SP. Foram isoladas
sete amostras de Salmonella sp, sendo seis de Salmonella
Dublin e uma de Salmonella Typhimurium. Também foram
isolados outros enteropatógenos tais como: Escherichia
coli – 101 amostras (49,5%), Citrobacter freundii - 38
amostras (18,62%), Enterobacter cloacea - 11 amostras
(5,30%), Proteus vulgaris - 10 amostras (4,90%),
Pseudomonas aeruginosa - 9 amostras (4,40%), Arizona
sp - 4 amostras (1,90%) e outros enteropatógenos - 24
amostras (11,95%). Um fato importante é que todos os
isolamentos de Salmonella sp estavam associados a
outros enteropatógenos. Os isolamentos de Salmonella
sp foram realizados em bezerros com aproximadamente seis
semanas de idade e todos apresentavam diarréia,
inapetência e emagrecimento como sintomas, contudo
BRENNER (1995) relataram a presença de outros sintomas,
como septicemia, caquexia, enterite e pneumonia,
associados à salmonelose dos bezerros. A salmonelose
dos bovinos, ao contrário de outras infecções entéricas
que se restringem ao intestino, pode ser sistêmica,
mostrando deste modo um quadro clínico mais amplo, em
que a diarréia não é o sintoma mais importante (TZIPORI,
1985). Ainda, o mesmo autor relata que cerca de 31,9%
das infecções que afetam bezerros com diarréia, nos
Estados Unidos, acontecem em animais com idade igual
ou superior a 60 dias e podem ser atribuídas à Salmonella
Dublin. No presente trabalho este sorotipo também foi o
mais freqüente, entretanto, não foi isolado na mesma faixa
etária (seis semanas). Os resultados aqui descritos
concordam todavia com os de MARTEL et al (1996), que
relatam que os sorotipos mais comuns encontrados em
bovinos são os da Salmonella Typhimurium e Salmonella
Dublin. Da mesma forma, MACKIE et al.(1996) isolaram
dezoito amostras de Salmonella Typhimurium e treze de
Salmonella Dublin em materiais colhidos de 92 animais
provenientes de 65 fazendas. Isto reforça a afirmativa de
que bovinos com idade aproximada de seis semanas
podem desempenhar um papel importante na epidemiologia
de diarréia causada por Salmonella Dublin e Salmonella
Typhimurium.
Na salmonelose dos bezerros, pode ser verificada
a presença secundária de Salmonella Montivideo,
Salmonella Anatum e Salmonella Newport ( ANDERSON
& BLANCHARD, 1989 e CAMPOS & HOFER, 1989), o
que não foi constatado na presente pesquisa. Roedores
ou pássaros (ÁVILA et al., 1972) são citados como fontes
de Salmonella Typhimurium nas granjas de aves, sendo
a bactéria passível de ser transferida às fazendas leiteiras
do consumo de camas de frangos pelos bovinos, porém a
contaminação principal ocorre por conta de animais
portadores introduzidos nas instalações das propriedades
(NEWEEL & WILLIANS, 1971).
Não foi realizada a colheita de fragmentos de
órgãos de animais mortos pela doença, para exame
histopatológico, devido ao tratamento precoce da diarréia
realizado pelos fazendeiros e tratadores.
O quadro 2 mostra a sensibilidade das sete amostras
de Salmonella, isoladas de fezes diarréicas, diante de
dezessete agentes antimicrobianos, podendo observar
que os dois sorotipos apresentaram 100% de resistência
à lincomicina, à cefalotina, à bacitracina, à eritromicina e à
penicilina. Somente a amostra de Salmonella
Typhimurium apresentou 100% de resistência à
estreptomicina. Estes resultados são coerentes com a
constatação de NAKANO et al. (1988), que relataram que
os plasmídios R são responsáveis pela resistência
adquirida a diversos antibióticos e quimioterápicos, e pelo
aparecimento de amostras multirresistentes. O uso
indiscriminado desses agentes terapêuticos tem sido um
dos grandes responsáveis pela disseminação dos fatores
R e conseqüente resistência das cepas. Os tratamentos
prolongados ou repetidos exercem sobre a flora bacteriana
pressões de seleção, originando populações com alto
índice de resistência.
ARTIGO RECEBIDO: SETEMBRO/2002
APROVADO: FEVEREIRO/2004
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