revisaoav2

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

GENÉTICA
Prof. William Volino
Aula de Revisão para AV2
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Conteúdo programático
Revisão dos conteúdos das aulas 6 a 10;
Principais dúvidas dos alunos.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Aula 6: Citogenética Clínica e Citogenética Molecular
	As células humanas somáticas possuem 44 cromossomos autossômicos e 2 cromossomos sexuais, totalizando 23 pares.
	São os veículos da informação genética.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Citogenética Clínica
	Estuda as alterações cromossômicas e a relação delas com doenças ou síndromes.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Citogenética Molecular
	Estuda as doenças genéticas através de novas tecnologias que combinam técnicas de citogenética e de biologia molecular.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Mutações cromossômicas Numéricas:
	São alterações na quantidade de cromossomos.
Mutações cromossômicas estruturais:
	São alterações na estrutura dos cromossomos. 
 
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Análise cromossômica
Problemas precoces de crescimento e de desenvolvimento
Natimortos e morte neonatal 
Problemas de fertilidade
História familiar de doenças cromossômicas
Neoplasia
Gestação em uma mulher em idade avançada 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Cariótipo Normal
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Anomalias cromossômicas numéricas
	
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Aula 7: Fundamentos das Tecnologias do DNA Recombinante
	
	
	
	
	Conjunto de técnicas de clonagem de DNA que está transformando a pesquisa básica, a agricultura, a medicina, a ecologia, a medicina forense e muitas outras áreas, embora trazendo ocasionalmente à sociedade escolhas difíceis e dilemas éticos. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Campos de atuação
Comercial
Biotecnológica
Investigação de paternidade
Diagnóstico de doenças genéticas e infecciosas
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Clonagem do DNA
	Um clone é uma cópia idêntica.
	A clonagem do DNA é o principal processo da Tecnologia do DNA Recombinante.
	Envolve a separação de um gene ou um segmento de DNA específico, liga-lo a uma pequena molécula de DNA-transportador e depois replicar este DNA recombinante milhões de vezes.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Etapas da clonagem do DNA:
Escolher o gene ou segmento do DNA que será clonado;
Cortar o DNA em um local específico, isolando o gene;
Obter uma molécula de DNA com capacidade de autorreplicação, chamada de vetor;
Unir os dois pedaços de DNA (vetor e segmento de interesse) formando um DNA recombinante;
Transferir o DNA recombinante para uma célula;
Identificar e selecionar as células recombinantes. 
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Enzimas de Restrição
	São enzimas encontradas em bactérias, utilizadas para realizar cortes no DNA. 
	Cada enzima de restrição corta o material genético em um sítio específico, que são palíndromas. 
	As extremidades das partes cortadas recebem o nome de extremidades de ligação, pois se encaixam perfeitamente. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Vetores de Clonagem
	Funcionam como um veículo que transporta o gene para o interior da célula hospedeira, que é normalmente uma bactéria, embora outras células vivas possam ser utilizadas.
	Os plasmídeos, bacteriófagos e cosmídeos são frequentemente utilizados como vetores de clonagem. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Plasmídeos
	São moléculas de DNA circular, presentes em bactérias, que se replicam separadamente do cromossomo bacteriano.
	São extraídos de bactérias e utilizados como vetores de clonagem. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Bacteriófagos
	São vírus que infectam especificamente as bactérias. 
	Os fagos têm uma estrutura muito simples, consistindo numa molécula de DNA que transporta determinado número de genes, nos quais se incluem vários para a replicação do fago. 
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Cosmídeos
	
	
	
	São plasmídeos que contem um fragmento de DNA do fago, que inclui o sítio cos. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Aula 8: Tópicos avançados em Genética
Genética do Desenvolvimento
	O conhecimento da genética do desenvolvimento que inclui os mecanismos responsáveis pelo desenvolvimento humano normal no útero é essencial para médicos realizarem uma avaliação diagnóstica de um paciente com defeito congênito.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Desenvolvimento: 	Compreende uma sequência de acontecimentos muito complexos que se encontram inter-relacionados, obtendo finalmente um organismo formado por vários tipos de células diferentes. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Importância da Genética do Desenvolvimento
	As anomalias do desenvolvimento certamente possuem o maior impacto na saúde pública. 
	A consulta genética e o diagnóstico pré-natal são importantes para auxiliar indivíduos que se deparam com o risco de sérios defeitos em sua prole, aumentando suas chances de terem crianças saudáveis.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Imunogenética
	O estudo da genética do sistema imunológico é conhecido como imunogenética e tem se beneficiado pelos novos desenvolvimentos em mapeamento genético e clonagem para o estudo de vários genes. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Importância da Imunogenética
Contribui para a compreensão da patogênese da inflamação crônica, doenças autoimunes e infecciosas.
Abrange também a relação entre inflamação crônica e malignidade.  
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Imunogenética
	As investigações atuais de imunogenética utilizam duas categorias principais de substâncias antigênicas, presentes em fluidos corporais, principalmente no soro ou plasma e daqueles expressos nas superfícies de células diferentes. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	Na categoria antígenos dos fluidos corporais, uma posição de destaque é ocupada pelas imunoglobulinas. Embora os anticorpos sejam geralmente usados para detectar antígenos, eles próprios também podem servir como antígenos e anticorpos podem ser produzidos contra eles. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	As principais categorias de superfície celular de moléculas estudadas por métodos imunogenéticos são antígenos do grupo sanguíneo, os antígenos de histocompatibilidade, antígenos restritos ao tecido e aos receptores. 	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Genética do Câncer
	
	
	
	O câncer é uma das doenças mais comuns e mais graves vistas na medicina clínica. As estatísticas mostram que o câncer acomete um terço da população, sendo responsável por 20% de todas as mortes e por mais de 10% do custo total em cuidados médicos.  
	O câncer não tratado, sem dúvida, é fatal. O diagnóstico precoce e o tratamento imediato são vitais. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Importante:
	
	
	
	O câncer é uma doença genética, independentemente de ocorrer de forma esporádica ou hereditária, pois a carcinogênese sempre inicia com danos no DNA.  
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
	
	
 
	Importante: causas de câncer
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
	Esses eventos são regulados por uma grande quantidade de genes que, ao sofrerem mutações, podem ter seus produtos expressos de maneira alterada, iniciando a formação de um tumor. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
	As mutações que levam ao câncer ocorrem em três classes de genes celulares: 
Oncogenes
Genes supressores de tumor 
Genes de reparo de DNA. 
	A grande maioria das mutações em câncer é somática e presente apenas nas células tumorais. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	A maioria dos eventos genéticos que causam câncer ocorre ao longo da vida
do indivíduo, nos seus tecidos somáticos. Como esses eventos ocorrem em células somáticas, eles não são transmitidos para gerações futuras. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Entretanto, é possível que ocorram tais mutações em células de linhagem germinativa. Caso isso ocorra, pode resultar na transmissão dos genes mutantes de uma geração para outra, produzindo famílias que têm alta incidência de cânceres.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Fatores Ambientais
	De todos os casos, 80% a 90% dos cânceres estão associados a fatores ambientais que podem ser agentes químicos, físicos ou virais, conhecidos como carcinogênicos ou oncogênicos. 
Cigarro
Amianto
Radiação
Vírus
Envelhecimento 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Aula 9: Diagnóstico Molecular
Conceito:
	Utilização de técnicas moleculares para o diagnóstico de doenças, genéticas ou não genéticas.
	Nos dois casos será possível fazer o diagnóstico das doenças antes que se manifestem e fornecer informações importantes para a escolha do melhor tratamento e estabelecimento do prognóstico.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Em doenças genéticas tem como objetivo:
	- Detectar mutações em genes;
	- Caracterizar mutações;
	- Estudar a ocorrência e frequência de mutações em determinadas populações;
	- Estudar características específicas do gene em questão;
	- Estudar o tipo de mutação (mutação pontual, grandes deleções, inserções, etc.), entre outras.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Em doenças não genéticas tem como objetivo:
	- Diagnosticar doenças infecciosas;
	- Identificar o agente infeccioso (vírus, bactérias, protozoários, fungos) através da detecção do seu material genético;
	- Estudar o agente infeccioso em questão;
	- Avaliar a resposta ao tratamento.
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)
	Consiste na replicação do DNA in vitro.
	É uma técnica que revolucionou a genética molecular, permitindo muitos avanços na área, como a clonagem, a produção de alimentos transgênicos, e etc.
	É considerada uma técnica altamente sensível, por ser capaz de detectar e amplificar DNA a partir de uma pequena quantidade na amostra.
	Além disso, é altamente específica, pois é capaz de detectar sequencias específicas de DNA, que sejam o alvo do estudo.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Aplicações da PCR
Diagnóstico de doenças infecciosas e genéticas;
Amplificação de genes para posterior clonagem e estudos de sua expressão; 
Determinação de variabilidade genética e identificação; 
Detecção de OGMs 
Sexagem e diagnóstico de doenças em embriões. 
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Preparo da reação de PCR
DNA polimerase (Taq - Thermus aquaticus)
Primers ou iniciadores
Nucleotídeos (A, T, G e C)
Tampão de pH
DNA (ou RNA)
Mg++	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
A reação ocorre em três fases (ciclo)
Desnaturação – as duas fitas do DNA são separadas pela alta temperatura.
Anelamento – os primers se ligam à sequencia alvo, marcando o seu início e o seu fim.
Extensão – A Taq polimerase produz o novo DNA, complementar à sequencia alvo.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Análise com enzimas de restrição e sondas de DNA
	
	
	
	As enzimas de restrição e as sondas de DNA também podem ser utilizadas na realização do diagnóstico molecular, pois permite que o DNA seja analisado de diferentes formas.
	Este tipo de diagnóstico pode ser empregado em estudos de identificação humana e criminalística. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	Enzimas de restrição
	
	
	
	São enzimas encontradas em bactérias, utilizadas para realizar cortes no DNA. 
	Cada enzima de restrição corta o material genético em um sítio específico, que são palíndromos. 
 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
	Os fragmentos gerados pelas enzimas de restrição são separados através de uma eletroforese em gel.
	A análise destes fragmentos se chama RFLP (Polimorfismo dos fragmentos gerados por enzimas de restrição). 
	Existe um padrão de tamanho dos vários fragmentos gerados, que depende da existência dos sítios de corte no genoma do indivíduo.
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
	Após a corrida o DNA é transferido para uma membrana para posterior hibridização com sondas de DNA.
	Para identificação dos fragmentos são utilizadas sondas de DNA.
	A sonda consiste em um segmento de DNA produzido em laboratório que é complementar à sequencia alvo de DNA, que se liga (hibridiza) ao DNA e permite a sua identificação.
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
	
	Teste de paternidade: 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	Teste de identificação de criminoso: 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
FARMACOGENÉTICA E FARMACODINÂMICA
TERAPIA GÊNICA
	
Aula 10: Farmacogenética, Farmacogenômica e 
		Terapia Gênica
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Conceito:
	A farmacogenética e a farmacogenômica tratam da influência dos fatores genéticos na resposta aos medicamentos. Como muitos outros ramos das ciências biomédicas, foram impulsionadas pelos avanços recentes da genômica que conduziram às expectativas de que a segurança e a eficácia dos medicamentos seriam melhoradas notavelmente pela personalização da terapêutica, com base nos dados genéticos dos pacientes. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	Tanto a farmacogenética como a farmacogenômica buscam identificar genes que:
Predisponham às doenças.
Modulem respostas aos medicamentos.
Afetem a farmacocinética e farmacodinâmica de medicamentos.
Estejam associados a reações adversas à medicação.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
FARMACOGENÔMICA
	
	Definida como o estudo da expressão de genes individuais relevantes na susceptibilidade a doenças, bem como resposta a fármacos em nível celular, tecidual, individual ou populacional, procurando também uma relação entre o metabolismo de drogas e os estudos moleculares de DNA ou RNA. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
FARMACOGENÉTICA:
	
	Consiste no estudo das variações interindividuais na sequência de DNA, relacionadas com a resposta a fármacos, eficácia e segurança dos mesmos.
	Estudo de diferenças na resposta a drogas decorrentes de variação alélica em genes que afetam seu metabolismo, sua eficácia e toxicidade.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
	
Objetivos:
Medicina genética personalizada de acordo com o genótipo do paciente.
Melhorar os resultados e diminuir as complicações.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	TERAPIA GÊNICA
	É a introdução de um gene em tecido somático cujo produto pode aliviar o defeito causado pela perda ou mau funcionamento de um gene vital ou de seu respectivo produto.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
 	Para o sucesso da Terapia Gênica, são necessários dois importantes fatores:
• que não ocorra efeitos indesejáveis e
• que se mantenha a produção, em níveis desejáveis, do produto do gene introduzido.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Pode ser feita in vivo ou ex vivo
Ex vivo: As células alvo são geneticamente modificadas fora do organismo e, só depois, transplantadas para o indivíduo.
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
In vivo: Os genes são introduzidos diretamente nas células alvo, ou seja, no tecido do indivíduo a ser tratado. Dessa forma, a terapia gênica deve resultar na introdução de um gene que possibilite a produção no tempo, no local e na quantidade desejada de uma proteína terapêutica que alivie ou cure a doença em causa. 
GENÉTICA
Aula de Revisão para AV2
Nesta aula vimos:
Revisão dos conteúdos das aulas 6 a 10;
Principais dúvidas dos alunos.