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Prof. Alan Brito INTRODUÇÃO A MICROBIOLOGIA PROF. DRA. FABÍOLA KEGELE INTRODUÇÃO A MICROBIOLOGIA PROF. DRA. FABÍOLA KEGELE Estudo dos organismos microscópicos Origem do nome 3 palavras gregas - mikros Pequeno - bios Vida - logos Ciência Microrganismos Seres vivos microscópicos, em células únicas ou agrupamentos, capazes de realizar processos vitais INTRODUÇÃO Característ icas gerais dos microrganismos - ~ 1940 Avanços na Microbiologia Estudos taxonômicos Microscopia Elet rônica INTRODUÇÃO Procariotos (Bactérias) Eucariotos (Fungos, protozoários e algas unicelulares) INTRODUÇÃO EUCARIOTOS PROCARIOTOS INTRODUÇÃO Característ icas gerais dos microrganismos - ~ 1953 até hoje Avanços na Biologia Molecular Taxonomia - Classificação dos organismos * Reino (Monera, Prot ista, Fungi, Plantae e Animalia) * Filo * Classe * Ordem * Fam ília * Gênero * Espécie Morfologia e estrutura da célula bacteriana Disciplina: Microbiologia Prof.: Alan Brito Rio de Janeiro, 2014 CONCEITOS BÁSICOS Parasitologia estuda as relações, entre os seres vivos, que resultam danos a uma das partes A microbiologia estuda parasitas microscópicos Podemos dividir a microbiologia em: Bacteriologia – estudo das bactérias Micologia – estudo dos fungos Virologia – estudo dos vírus Bacteriologia clínica trata dos estudo de bactérias patogênicas ao homem MORFOLOGIA BACTERIANA Características gerais: • Unicelulares, tamanho entre 0,2 m a 4 m, haplóides, com parede celular de peptídeoglicano, cromossomo circular, e consistem em parasitas intra e extracelulares; • Exceção Micoplasma e Ureaplasma Ausência de peptideoglicana na parede celular. BACTÉRIAS ESTÃO ENTRE OS MENORES ORGANISMOS VIVOS PODEM MEDIR DE 0,5 A 2,0 µm DE DIÂMETRO PAREDE CELULAR MEMBRANA CELULAR CITOPLASMA RIBOSSOMOS DNA FLAGELO MESOSSOMA CÁPSULA MORFOLOGIA BACTERIANA Cápsula ou slime Parede celular Membrana celular Citoplasma Ribossomos Material genético Cromossomo, plasmídio, transposons Mesossoma Flagelo Pili MORFOLOGIA BACTERIANA MORFOLOGIA BACTERIANA Características morfológicas: • Formas; • Arranjos ou agrupamentos; • Tamanho / Dimensão. Formas Básicas: • Cocos; • Bacilos ou Bastonetes; • Espiral. MORFOLOGIA BACTERIANA Cocos Geralmente imóveis; Esféricos; Ovais (ou Elípt icos); Arranjos dos cocos Depende do plano de divisão e no Diplococos Aos pares Pneumococo e Meningococo; Est reptococos Em cadeias Streptococcus pyogenes; Tét rades De 4 em 4; Sarcina De 8 em 8 Sarcina lutea ; Estafilococos Em cachos ou grumos Staphylococcus aureus MORFOLOGIA BACTERIANA MORFOLOGIA BACTERIANA Bacilos Imóveis ou móveis (Flagelos); Arranjos dos bacilos Diplobacilos; Est reptobacilos; Cocobacilos; Paliçada (Empilhamento); Dobra (“Let ra chinesa”); Algumas denominações Vibrio Bastonete encurvado (vírgula) MORFOLOGIA BACTERIANA MORFOLOGIA BACTERIANA Espirilos / Espiral Forma rígida de hélice ou espiral; Locomoção por flagelo; Ex: Helicobacter pylor i; Campylobacter jejuni Espiroquetas Forma flex ível, ondulada ou helicoidal; Locomoção por filamento axial ou endoflagelo; Três gêneros Borrelia sp, Treponema sp e Leptospira sp MORFOLOGIA BACTERIANA MORFOLOGIA BACTERIANA BACTÉRIAS ESTÃO ENTRE OS MENORES ORGANISMOS VIVOS PODEM MEDIR DE 0,5 A 2,0 µm DE DIÂMETRO MORFOLOGIA BACTERIANA Cápsula ou slime Estrutura localizada mais externamente a parede celular Constituída por polissacarídeos organizados Retarda o reconhecimento da bactéria pelo sistema imune Impede a fagocitose da bactéria pelas células do sistema imune Presença de Substâncias Poliméricas Extracelulares (SPE) Slime Constituído por polissacarídeos desorganizados Possui a mesma função da cápsula Cápsula Slime ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES Substâncias Poliméricas Extracelulares (SPE) • Reservatório de água e nutriente • Aumento da capacidade invasiva de bactérias patogênicas • Aderência: – Formação de Biofilmes – Aumento do poder infectante de alguns tipos de bactérias: • Rihizobium • Streptococcus mutans • Aumento da resistência microbiana a biocidas ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES COLÔNIAS DE BACTÉRIAS QUE POSSUEM CÁPSULA APRESENTAM ASPECTO MUCÓIDE ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES COLÔNIAS DE BACTÉRIAS QUE POSSUEM CÁPSULA APRESENTAM ASPECTO MUCÓIDE ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES Parede Celular Estrutura rígida que é responsável pela forma da célula; Protege a célula das variações de pressão osmótica ; Ponto de ancoração de flagelos; Sítio de ação de alguns antibióticos ; Constituída por peptideoglicano Estrutura alvo da coloração de gram Permite agrupar bactérias em gram positivas ou negativas Gram positivas a parede celular tem ± 80% de peptideoglicano Gram negativas a parede celular tem ± 20% de peptideoglicano ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES PAREDE CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS PROTÉINA ASSOCIADA A PAREDE CELULAR ÁCIDO TEITÓICO ÁCIDO LIPOTEICÓICO PEPTIDEOGLICANO MEMBRANA CELULAR ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CITOLOGIA BACTERIANA Parede celular bacteriana Síntese do pept ideoglicano - Transglicosidases Ligações glicosídicas - Transpept idases Ligações pept ídicas - Autolisinas “Dest ruição programada” N-acetilglicosamina (NAG) N-acetilmurâmico (NAM) PAREDE CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS MEMBRANA EXTERNA ESPAÇO PERIPLASMÁTICO MEMBRANA CELULAR PEPTIDEOGLICANO LIPOPROTÉINA ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CITOLOGIA BACTERIANA Parede celular bacteriana Lipopolissacarídeo (LPS) Formado de duas partes dist intas Polissacarídica Ant ígeno “O”, Ant ígeno de superfície Especificidade Lipídica Lipídeo “A” Toxicidade Periplasma ou espaço periplasmát ico PAREDE CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS o Enzimas hidrolíticas (lipases, nucleases, proteases); o Enzimas capazes de inativar drogas (ex.: beta- lactamases); o Proteínas transportadoras de solutos. CITOLOGIA BACTERIANA Parede celular bacteriana Bactérias Gram Posit ivas x Bactérias Gram Negat ivas BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS - Alto teor de pept ideoglicano - Presença de ácidos teicóicos - Ausência de: membrana externa, LPS e periplasma - Protoplasto BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS - Baixo teor de pept ideoglicano - Ausência de ácidos teicóicos - Presença de: membrana externa, LPS e periplasma - Esferoplasto PAREDE CELULAR MEMBRANA PLASMÁTICA ESTRUTURA LOCALIZADA ABAIXO DA PAREDE CELULAR BICAMADA DE FOSFOLÍPIDIOS COM PROTEÍNAS INSERIDAS EM SUA EXTENSÃO AS PROTEÍNAS INSERIDAS PODEM SER: INTEGRAIS (INTRÍNSECA) PERIFÉRICAS (EXTRÍNSECAS) FUNÇÕES: TRANSPORTE DE SOLUTOS; PRODUÇÃO DE ENERGIA POR TRANSPORTE DE ELÉTRONS E FOSFORILAÇÃO OXIDATIVA; BIOSSÍNTESE; DUPLICAÇÃO DO DNA; SECREÇÃO. ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES MEMBRANA PLASMÁTICA BICAMADA DE FOSFOLÍPIDIOS COM PROTEÍNAS INTEGRAIS (INTRINSECAS) OU PERIFERICAS (EXTRÍNSECAS) INSERIDAS PROTEÍNA PERIFÉRICA PROTEÍNA INTEGRAL ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CITOPLASMA ESPAÇO CONTIDO PELA MEMBRANA CELULAR PREENCHIDO POR UM LÍQUIDO VISCOSO LÍQUIDO COMPOSTO POR PROTEÍNAS, PEQUENAS MOLÉCULAS E ÍONS NESTE LOCAL OCORREM VÁRIAS REAÇÕES QUÍMICAS NA CÉLULA BACTERIANA A DUPLICAÇÃO,A TRANSCRIÇÃO E A TRADUÇÃO DE PROTEÍNAS OCORREM NO CITOPLASMA OS RIBOSSOMOS TEM PAPEL FUNDAMENTAL NA TRADUÇÃO DE PROTEÍNAS NO CITOPLASMA ESTÃO DISPERSAS ESTRUTURAS COMO: RIBOSSOMOS, MOLÉCULAS DE DNA, GRÂNULOS DE RESERVA ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES LEMBRANDO: DUPLICAÇÃO, TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO DUPLICAÇÃO DO DNA DNA DNA TRANSCRIÇÃO DO DNA DNA RNA TRADUÇÃO DO DNA SÍNTESE DE PROTEÍNAS RNA PROTEÍNAS ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CITOPLASMA : DESTACANDO CROMOSSOMA E RIBOSSOMOS PLASMÍDEOCROMOSSOMO RIBOSSOMOS ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES MATERIAL GENÉTICO BACTÉRIAS PODEM TER TRÊS TIPOS DE MATERIAL GENÉTICO: CROMOSSOMO - DUPLA MOLÉCULA DE DNA PLASMÍDEOS – MOLÉCULA DE DNA QUE CARREIA GENES DE RESISTÊNCIA TRANSPOSONS – PEDAÇOS DE DNA (ILHAS DE RESISTÊNCIA) TODAS AS CÉLULAS POSSUEM UM CROMOSSOMO MAS NEM TODAS TEM PLASMÍDEOS E TRANSPOSONS PLASMÍDEOS E TRANSPOSONS PODEM SER DOADOS/TROCADOS COM OUTRAS BACTÉRIAS ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES TRANSPOSON CROMOSSOMO BACTERIANO CITOPLASMA : CROMOSSOMO MOSTRANDO A INSERÇÃO DE UM TRANSPOSON ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CITOPLASMA : DESTACANDO CROMOSSOMA E PLASMÍDEOS ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES MESOSSOMO DOBRAS DA MEMBRANA PLASMÁTICA NÃO SE CONHECE A FUNÇÃO DO MESOSSOMA MAS PODE ESTAR RELACIONADA COM A DIVISÃO CELULAR E/OU PRODUÇÃO DE ENERGIA, OU AINDA SER APENAS UM ARTEFATO RESULTANTE DE TÉCNICAS DE FIXAÇÃO PARA OBSERVAÇÃO EM MICROSCÓPIO ELETRÔNICO ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CÉLULA BACTERIANA MOSTRANDO O MESOSSOMO CROMOSSOMO ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES PILI OU FÍMBRIA MICROFILAMENTOS PROTÉICOS TEM ORIGEM NA PAREDE CELULAR DE MUITAS ESPÉCIES DE BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS FUNCIONAM ANCORANDO A BACTÉRIA AO MEIO AUXILIAM NA LOCOMOÇÃO DA CÉLULA BACTERIANA PILI F OU PILI SEXUAL É UM PILI QUE TEM FUNÇÃO SEXUAL O PILI F LIGA DUAS BACTÉRIAS PARA A TROCA DE PLASMÍDEOS ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES CÉLULA BACTERIANA MOSTRANDO O MESOSSOMO ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES FLAGELO ESTRUTURA FILAMENTOSA DE COMPOSIÇÃO PROTÉICA SUA FUNÇÃO ESTA RELACIONADA A MOVIMENTAÇÃO DA CÉLULA BACTERIANA POSSUI MOVIMENTO ROTATÓRIO CLASSIFICAÇÃO BACTERIANA QUANTO A QUANTIDADE E LOCALIZAÇÃO DE FLAGELOS: MONÓTRIQUIAS LOFÓTRIQUIAS ANFRÍTRIQUIAS PERÍTRIQUIAS ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES DESTAQUE PARA PILI OU FÍMBRIA E FLAGELO ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES DESTAQUE PARA PILI OU FÍMBRIA E FLAGELO ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES DESTAQUE PARA PILI OU FÍMBRIA E FLAGELO ESTRUTURAS BACTERIANAS E SUAS FUNÇÕES COLORAÇÃO DE GRAM Metodologia utilizada para classificar as bact[erias com base na morfologia de acordo com as diferenças de composição da parede celular; As bactérias gram-positivas possuem uma parede espessa de peptidoglicano e grandes quantidades de ácido teicóico, retendo o cristal violeta (azul-escuro); As bactérias gram-negativas possuem uma parede celular constituída de uma camada delgade de peptidoglicano, permitindo a descoloração (cristal violeta) e posterior coloração com o corante de fundo (safranina ou fucsina) corados em rosa. COLORAÇÃO DE GRAM Calor 1 min 1 min Álcool-cetona 1 min COLORAÇÃO DE GRAM
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