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PROF MARIANA DONATO MARIDONATO@GMAIL .COM Imunohematologia � Responda: � Em que os testes de aglutinação se baseiam? � Qual a diferença de aglutinação direta e indireta? � Como funcionam os testes de inibição de aglutinação? � Explique os testes:� Explique os testes: � Rubéola � B-hcg �HIV � FR � PCR � VDRL � ASO � Começou a partir de procedimentos experimentais: � Mistura de sangue humano - ABO � Inoculação de ac humanos em animais – M N � Inoculação de globulos de um animal em outro – RH � Formação de novos ac por gestantes – Eritroblastose fetal� Formação de novos ac por gestantes – Eritroblastose fetal � ISBT (Sociedade Internacional de TransfusãoSanguínea) � 29 sistemas de grupos sanguíneos � total de 285 antígenos � todos estes sistemas tiveram seus genes seqüenciados � todos estes sistemas tiveram seus genes seqüenciados elocalizados em regiões cromossomicas específicas � Sistema de grupo sanguíneo: um ou mais antígenos controlados por um único gene ou por dois ou mais genes homólogos ligados, que apresentem pouco ou nenhum grau de recombinação entre eles Coleções: antígenos relacionados sorológica, bioquímica e � Coleções: antígenos relacionados sorológica, bioquímica e geneticamente, mas que não atendem a todos os critérios requeridos para serem sistemas � 6 coleções de antígenos eritrocitários � Ag eritrocitários = induzem a produção de anticorpos quando injetados por via parenteral, desde que diferentes das moléculas do receptor � Principais: � Abo � Rh � MNS � P� P � Lewis � Lutheran � Kell � Duffy � Kidd � Diego � ABO � Landsteiner – 1900 � Soros de diferentes indivíduos coagulava um ao outro � 4 grupos diferentes – dois antígenos� 4 grupos diferentes – dois antígenos � Isoaglutinogênios A e B � Isoaglutininas anti-A e anti-B � Nem todos possuem os dois, ao mesmo tempo; mas, na população geral, podemos fazer essa classificação facilmente � Considerações bioquímicas: � Genes em 3 loci separados – ABO, H, Se � 3 alelos comuns no ABO: A, B e O, formando glicosiltransferases � H e Se, cada um 2 locus: ativo e amorfo -- > substância � H e Se, cada um 2 locus: ativo e amorfo -- > substância precursora � Subgrupos � A: � A1 (80%) e A2 (19%), que também podem fazer A1B e A2B � Faz diferença na hora da reação das aglutininas � Em algumas situações, pode haver imunização entre esses � Em algumas situações, pode haver imunização entre esses subgrupos (anticorpo anti- A1 ) � Existem mais subgrupos A3 , A4 e A5 , em poucas quantidades � B: � Apresentam essa variabilidade, mas não tão acentuadamente � Gene H: � Forma a substância H � Presente em todos os grupos, inclusive o O � É o substrato no qual os genes A e B agem para formar os aglutinogenios A e Baglutinogenios A e B � Para detectá-lo, anti-H � Bombay � Indivíduos que possuem o gene H amorfo � Nesse caso, nenhum anticorpo irá reagir, nem mesmo o anti-H � Indivíduos podem até ser A, B ou AB, mas não expressam pois não possuem o Hnão possuem o H � Se � Fator secretor � Se vai eliminar os aglutinogenios na saliva da pessoa � Anticorpos ABO: � Acontecem naturalmente � Pouco nas crianças e nos idosos � Crianças até 6m: ac são da mãe � Detectados após 3-6 meses de idade� Detectados após 3-6 meses de idade � Podem ser IgG ou IgM � A ou B: IgM � Lectinas e polissacarídeos bacterianos e vegetais � Irregulares e imunes IgG naturais � acontecem após transfusões incompatíveis, gestações, vacinações e infecções bacterianas � Tubos � Microplacas � Gel � Sistema de cartão� Sistema de cartão � Tipagem � Direta: pesquisa de aglutinogenios � Indireta: pesquisa de aglutininas � Discrepâncias na Tipagem ABO � Pacientes neonatos. � Idosos. � Hipogamaglobulinemia. � Imunosuprimidos.� Imunosuprimidos. � Transplantes de medula óssea / Transfusão recente. � Erros Técnicos: identificação das amostras. � Fenômeno de rouleaux. � Anticorpos frios inespecíficos � Importância Clínica � Anticorpos ABO : naturais e fixadores de complemento. � Indivíduos Bombay: potente anti-H, além do anti-A e Anti-B, só podem ser transfundidos com hemácias Bombay � Incompatibilidade materno fetal (DHPN): em mães do grupo O e fetos do grupo A ou B. Quadro clínico mais brando � Importância em transplantes renais ou cardíacos, com menor papel nos hepáticos ou de medula óssea � Sistema Rh: � Antígeno D � Descoberto em 1940 após uso de sangue de macaco rhesus � 85% de sangue humano aglutina; 100% do macaco rhesus � 85% de sangue humano aglutina; 100% do macaco rhesus aglutina � Ac anti-rhesus animal e anti D são identicos � Após ABO, Rh é o mais importante � Ac produzidos após transfusão incorreta ou gestação � Antígeno D+ é o mais forte � Outros: C, E, c, e (os 5 juntos são 99%) � 45 antígenos � Dois genes: � RHD: codifia D � RHE: codifica C, E, c, e � Denominação � RhHr- produto do gene como aglutinógeno, chamando de fatores. Dados bioquimicos e sorológicos não apoiam � CDE: usa os 3 sets de genes D, C, E, designando por letra. Mais utilizada, só que modificada � Expressão fraca de D � Menor quantidade de ags espressos na hemácia � Pode acontecer pois não haveria força suficiente para ligar e aglutinar � Nesses casos, manter as hemácias em contato com o soro por � Nesses casos, manter as hemácias em contato com o soro por mais tempo ou usar soro de coombs � Ainda assim são consideradas D, ou Rh + � Não deve realizar a transfusão, mesmo sendo menos imunogênica � Eritroblastose fetal � Mãe Rh-, filho Rh+ � Troca de hemácias, produção de anticorpos � Teste de COOMBS � Utilizam hemaglutinação indireta para detectar anticorpos anti-Rh bloqueadores ou incompletos � Coombs direto (teste da antiglobulina direta): detecta � Coombs direto (teste da antiglobulina direta): detecta anticorpos fixados à hemácia, revelados pela mistura do soro de coombs com as hemácias � Coombs indireto (Pesquisa de anticorpos irregulares): detecta anticorpos séricos contra a hemácia, que serão primeiro fixados na hemácia e depois detectados pelo soro de coombs � Teste de coombs indireto � PAI � PAI = Pesquisa de anticorpos irregulares � demonstra anticorpos antieritrocitários irregulares, livres no soro ou plasma de doadores e pacientes, que possam soro ou plasma de doadores e pacientes, que possam provocar reações pós-transfusionais � IAI = Identificação de anticorpos irregulares � determina a especificidade deste anticorpo, ou seja, contra que aglutinógeno específico este anticorpo é voltado � Prova de compatibilidade sanguínea � Selecionar doadores para a transfusão sanguínea � Provas indiretas e provas cruzadas � Descobrir o ABO, subtipo Rh, seriam provas indiretas � Provas diretas: �Maior: compatibilidade sanguínea entre o soro do receptor e os glóbulos do doador �Menor: compatibilidade sanguínea entre os glóbulos do receptor e o soro do doador � Diminuem a possibilidade de haver erro nas transfusões � Responda: � Como podemos fazer a tipagem do tipo sanguíneo ABO? � Para que servem os gene H e Se no sistema ABO? � Em algum momento a tipagem de ABO pode funcionar erroneamente?erroneamente? � Em relação ao RH, cite os possiveis fenótipos para os indivíduos positivos. � O que é eritroblastose fetal? Explique seu mecanismo. � Como funciona o soro de Coombs? Explique o teste direto e indireto.
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