Imuno-Hematologia - Resumo Hematologia

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Imun�-Hematologi�
KWL:
Know: o que eu sei?
Want to Know: o que eu quero saber?
Learned: o que eu aprendi?
Imuno-Hematologia:
. É o estudo dos antígenos presentes nas
hemácias e dos seus anticorpos
correspondentes
. Interação entre o antígeno e o anticorpo
Antígeno:
. É uma proteína ou um açúcar que fica na
proteína da hemácia
. Os antígenos tem como principal função a
indução da produção de anticorpos pelo
sistema imune
Herança Genética:
. O sistema ABO é uma herança genética,
herdada dos nossos pais
. O ABO fica localizado no cromossomo 9 da
nossa carga genética
Anticorpo:
. Os anticorpos ficando circulando ao redor
dos antígenos na proteína da hemácia
. O anticorpo é uma imunoglobulina, e é
produzido pelo sistema imune em resposta
aos antígenos
. Os anticorpos possuem uma ligação
específica aos antígenos
→ o anticorpo se liga ao se antígeno
correspondente
Função:
- neutralização dos antígenos
- opsonização (marcação de uma superfície,
de uma célula ou bactéria por exemplo)
- ativação do complemento
- citotoxicidade
. No sistema ABO será encontrado
principalmente anticorpos IgG e IgM
IgG:
- imunoglobulina monomérica
- possui um peso molecular menor que o IgM
(160 mil daltons)
- realiza a opsonização das células em
temperatura corporal (37ºC)
- respostas imunológicas (respostas
secundárias)
- IgG são anticorpos imunes
- ‘’in vitro’’ são incapazes de produzir
aglutinação
IgM:
- imunoglobulina pentamérica
- possui um peso molecular maior que o IgG
(900 mil daltons)
- realiza a opsonização das células em
temperaturas frias (com atividade máxima em
4ºC , atividade baixa em 25ºC e atividade nula
em 37ºC)
- respostas com ativação de linfócitos B
(respostas primárias)
- IgM são anticorpos naturais
- ‘’in vitro’’ são capazes de sensibilizar as
hemácias e produzir aglutinação
Classificação de Anticorpos
Antieritrocitários:
Classificação pela Origem:
Alo-Anticorpos: dirigidos contra antígenos que o
indivíduo não possui
Auto-Anticorpos: dirigidos contra antígenos que o
indivíduo possui
ACss Heterófilos: dirigidos contra antígenos de
outras espécies
Classificação por Estímulo:
Imunes: ativação do sistema imune
Naturais: ABO como exemplo principal
Regulares: ocorrência esperada, ABO
novamente como exemplo principal
Irregulares: ocorrÊncia não esperada,
aloimunização por transfusão como exemplo
principal
Classificação por Testes Imuno-Hemato:
Completos: promovem a aglutinação de hemácia
em meio alcalino, anticorpo IgM como
exemplo principal
Incompletos: reagem com o antígeno mas não
produzem aglutinação, anticorpo IgG como
exemplo principal
Grupos Sanguíneos:
. São classificados pelo sistema ABO, esses
grupos sanguíneos podem ser classificados
em:
sorológicos
bioquímicos
genéticos
Sistema de Classificação de Grupos Sanguíneos
Eritrocitários:
. A nomeação dos anticorpos desse sistema
vai de acordo com a primeira letra da pessoa
que descobriu esse anticorpo, ou do paciente
onde esse anticorpo foi descoberto
→ exemplo: antígeno LW - homenagem aos
pesquisadores Landsteiner e Wiener
antígeno Rh - homenagem ao
animal utilizado na pesquisa Macacus Rhesus
Sistema de Classificação de Grupos Sanguíneos ABO:
. é formado por uma estrutura complexa,
formada por glicoproteínas ligadas ao
antígeno H
. As estruturas imunodominantes são o A e o
B
. Possui uma grande importância clínica pela
sua função e distribuição nos tecidos
. Frequência do Sistema ABO no Brasil:
1º lugar: O (com 45%)
2º lugar: A (com 40%)
3º lugar: B (com 11%)
4º lugar: AB (com 4%)
Antígeno H: para o fenótipo do sistema ABO
acontecer, ele precisa ter como base o
antígeno H
- o antígeno H serve como base para todos os
antígenos ABO
- se não tiver o genótipo ‘’hh’’, que é um
genótipo recessivo e muito raro, o antígeno H
não é produzido e, consequentemente, o
antígeno ABO não pode ser expresso
→ quando o fenótipo recessivo acontece
(‘’hh’’) o genótipo irá se chamar O Bombay
- somente os indivíduos que tiverem os
fenótipos ‘’HH’’ ou ‘’Hh’’ irão conseguir
expressar e produzir essa proteína precursora
que dá origem ao antígeno H
- quando o indivíduo não apresenta nenhum
tipo sanguíneo, nem A nem B, ele irá ter o tipo
sanguíneo O
Fenótipo O Bombay: configura o indivíduo que não
produz o antígeno H, ou seja, aquele indivíduo
que não consegue expressar os seus
antígenos no sistema ABO
- composições gênicas de um indivíduo O
Bombay:
OA
OB
OAB
- esse indivíduo O Bombay não poderá
receber transfusão sanguínea de O comum,
pois ele não possui o antígeno H
→ se o indivíduo não possui antígenos H ele
possui anticorpos contra o antigo H, esses
anticorpos irão reagir com os antígenos H do
O comum e irão gerar uma incompatibilidade
nesta transfusão
Grupo A: molécula de carboidrato (L-frutose)
que se liga a molécula do antígeno H,
formando o gene A
AA: homozigoto dominante
aa: homozigoto recessivo
AO: heterozigoto
- AA ou AO produzem o antígeno A que ocupa
parte dos sítios do antígeno H
- também produzem os antígenos H
Grupo B: molécula de carboidrato (D-galactose)
que se liga a molécula do antígeno H,
formando o gene B
BB: homozigoto dominante
bb: homozigoto recessivo
BO: heterozigoto
- BB ou BO produzem o antígeno B que ocupa
parte dos sítios do antígeno H
- também produzem os antígenos H
Grupo AB: produzem glicoproteínas que serão
ligadas ao antígeno H, sendo expressas nas
hemácias do indivíduo
- indivíduos de constituição genéticas AB
possuem ambos os alelos em codominância
- produzem os antígenos A e B
- também produzem os antígenos H
Grupo O: se o indivíduo não produzir nenhum
dos dois genes, o gene A e o gene B, não vai
haver a adição de nenhuma dessas
glicoproteínas ao antígeno H, fazendo com
que o indivíduo seja OO
- não há a adição de carboidratos no antígeno
H
- índividuos OO são duplo recessivos,
produzindo apenas antígenos H
- expressam apenas antígeno H
. O sistema ABO apresenta algumas
particularidades, como a presença dos
anticorpos naturais Anti-A e Anti-B
Anticorpos Imunes: só surgem no soro de um
determinado indivíduo após a inoculação ou
contato com antígenos A ou B
- presentes no sistema Rh
Anticorpos Naturais: existem no soro da maioria
dos seres humanos, sem que estes tenham
sido expostos aos antígenos A e B
- presentes no sistema ABO
- ocorrem através de estímulos passivos
→ hipótese do porque isso ocorre: quando há o
contato com bactérias do trato gastrointestinal,
por alimento que apresentam estruturas
semelhantes aos açúcares A e B das
hemácias
Antígeno + Anticorpo: os anticorpos presentes nas
hemácias não podem ser os mesmos que os
antígenos das hemácias
Produção de Anticorpos do Sistema ABO: irá
acontecer a partir do 6º mês de gestação,
após o nascimento ocorre dos 3 a 6 meses
indo até 1 ano, com produção máxima dos 5
aos 10 anos de idade
- com o passar dos anos a produção de
anticorpos vai decaindo, idosos, por exemplo,
podem ter níveis de anticorpos não
detectáveis ou até mesmo ausentes
Qual a Metodologia para a Identificação do tipo
Sanguíneo no Sistema ABO: para a identificação do
sistema sanguíneo pode ser feito dois tipos de
provas, a prova direta e a prova reversa
Prova Direta: também conhecido como
Beth-Vicent
- é a pesquisa dos antígenos fixados nas
hemácias, utilizando o sangue total
- nesse método é utilizado uma suspensão de
5% das hemácias do paciente, essa
suspensão é disposta em 5 tubos de amostras
- no primeiro tubo irá ser colocado o soro
Anti-A, o segundo o Anti-B e o terceiro o
Anti-AB
- após a colocação dos soros é feita uma
centrifugação dos tubos, essa centrifugação
força a reação antígeno-anticorpo
- se em algumas das hemácias do paciente
tiver a presença de alguns desses antígenos
irá ocorrer a aglutinação
→ a aglutinação é quando as hemácias ficam
precipitadas, como se elas tivessem
coaguladas
*Aglutinação: ocorre nos microtubos durante o
estágio de centrifugação
- quando as hemácias são aglutinadas por
anticorpos elas se depositam no fundo do
microtubo
- quando as hemácias aglutinam pela
interação com anticorpos elas são retiradas
pelo gel durante a centrifugação
Prova Reversa: também conhecidocomo Simonin
- é a pesquisa do anticorpo circulante nas
hemácias, utilizando o plasma
- nesse método é utilizado uma suspensão de
100mmL do plasma do paciente, essa
suspensão é disposta em 2 tubos de amostras
- nesses tubos serão colocadas hemácias
tipadas, no primeiro tubo será a hemácia
tipada A e no segundo a hemácia tipada B
- assim como no método de prova direta, irá
ocorrer a centrifugação, forçando uma reação
nessas amostras
- o tubo que tiver aglutinação irá nos mostrar
qual o tipo de anticorpo circulante que o
paciente apresenta
- a contraprova é fundamental para a
conclusão dos exames, a prova direta só será
100% eficaz quando com a realização da
prova reversa
Reação Antígeno-Anticorpo: quando uma hemácia,
com um determinado antígeno, entra em
contato com o anticorpo correspondente ela
sofrerá uma aglutinação
Antes da Reação Antígeno- Anticorpo
Após a Reação Antígeno- Anticorpo
Sistema de Classificação de Grupos Sanguíneos Rh:
. Pesquisa do antígeno D, sendo um sistema
de classificação bem mais complexo devido a
sua formação ser por outros antígenos e não
só pelo antígeno D
. Esse sistema compreende cerca de 45
antígenos, porém, o antígeno D é o antígeno
que está mais ligado a problemas clínicos,
sendo, então, o mais estudado
→ os 5 principais antígenos do sistema Rh
são:
D
E
e
C
c
. Não possuem anticorpos de ocorrência
natural (os anticorpos pré-formados)
. Para um indivíduo apresentar anticorpos
Anti-D, ele precisa ser sensibilizado, ou seja,
ele precisa entrar em contato com o sangue
de um outro indivíduo que possua um
antígeno D
→ a partir do momento em que o indivíduo
entra em contato com um sangue de antígeno
D, o sangue desse indivíduo irá reconhecer
esse antígeno como algo não próprio e irá
começar a produzir anticorpos contra esse
novo antígeno
. O antígeno D é altamente imunogênico
Classificações das Manifestações dos Antígenos D: o
antígeno D pode se manifestar e se classificar
em Antígeno D positivo e Antígeno D variante
Antígeno D+: quando o indivíduo apresenta o
antígeno D completo em sua hemácia
Antígeno D variante: quando o indivíduo apresenta
alterações quantitativas e/ou qualitativas
→ quantitativas: D Fraco (alterações na
diminuição ou aumento das expressões)
- é encontrado em pacientes com Rh negativo,
quando o Rh do paciente é negativo é preciso
ser feita uma pesquisa do antígeno D Fraco
- para essa pesquisa é utilizado uma técnica
de gel-centrifugação
- o objetivo da pesquisa é detectar o anticorpo
que foi formado fracamente
→ qualificativas: D Parcial
Composição Genética:
Determinação do Fator Rh:
- na pesquisa do Rh também é necessário o
uso do sangue total, porque o antígeno D
estará fixado nas hemácias do sangue
- além do soro total, também será necessário
o uso do soro com o anticorpo Anti-D do
paciente
→ o soro é necessário para que haja uma
reação com as hemácias e seja possível a
análise dos resultados a partir dessa reação
Controle do Rh:
- é o controle da reação em si, sendo utilizado
um reagente específico que sirva como
controle durante esse processo de reação
- esse controle garante que não haja a
aglutinação das hemácias
→ a aglutinação que quer ser evitada com
esse controle é uma aglutinação de uma
reação que já pode estar acontecendo com o
paciente, e não que tenha sido provocada
durante as pesquisas e testes
→ evita uma reação inespecífica, para
garantir uma reação antígeno-anticorpo
Interpretação do Rh:
Importância Clínica dos Sistemas ABO e
Rh:
. Esses sistemas são fundamentais,
principalmente para as transfusões
sanguíneas e para a doença hemolítica do
recém nascido (DHRN)
Transfusões Sanguíneas:
- deve-se garantir a compatibilidade
transfusional, para isso, existe uma série de
leis que garanta essa compatibilidade e os
cuidados necessários para que haja uma
transfusão correta e segura para o paciente
- a portaria 1.376, de 19/11/1993, definiu como
obrigatória:
prova direta e reserva para o Sistema ABO
pesquisa do D Fraco para o Sistema Rh
uso de hemácias tipadas para o Coombs indireto
DHRN:
- doença hemolítica do recém nascido
- mães com Rh negativo que em uma primeira
gestação nasce um bebe Rh positivo
- no momento do parto, sempre volta um
pouco do sangue do bebe para dentro do
organismo materno, é nesse momento que o
sangue Rh negativo da mãe entra em contato
com o sangue Rh positivo do bebe
- como o sangue da mãe não reconhece o
antígeno D, ele passa a produzir anticorpos
Anti-D
- essa mesma mãe, em uma segunda
gestação, também de um bebe de Rh positivo,
irá começar a enviar os anticorpos Anti-D para
o feto, devido a sensibilidade desenvolvida por
essa mãe a antígenos D
- os anticorpos Anti-D, produzidos pela mãe e
inseridos no feto, são acoplados nas
hemácias do bebe, eles irão marcar todas as
hemácias com antígenos D para que elas
sejam eliminadas a partir de um
reconhecimento do próprio organismo do bebe
- o organismo do bebe irá começar a destruir
essas hemácias, marcadas pelos anticorpos
da mãe, essa eliminação das hemácias irá
levar a anemia do feto
- em geral, a maioria dessas reação irão
ocorrer por incompatibilidade de Rh, mas
também pode haver incompatibilidades de
ABO
→ para haver a incompatibilidade de ABO, o
tipo sanguíneo da mãe deve ser O e o do filho
A e/ou B
- a DHRN é caracterizada pela destruição das
hemácias e pela anemia do feto ou do recém
nascido
- durante a gestação ocorre a passagem de
anticorpo da mãe para o filho, ou vice-versa,
através da placenta
→ podendo haver acidentes vasculares na
placenta, o que permitiria a passagem de
hemácias do feto para a circulação materna
Formas de Diagnósticos da DHRN:
- para diagnóstico deve ser feito uma tipagem
sanguíneo tanto da mãe quanto do pai
→ durante a gestação alguns exames são
realizados como forma de prevenção dessa
doença, como o teste de Coombs
Teste de Coombs: detecta se está havendo uma
produção de anticorpos pela mãe contra o
antígeno Rh
- existem dois tipos de testes de Coombs, o
Coombs Direto e o Coombs Indireto
→ Teste de Coombs Direto: pesquisa se as
hemácias do bebe estão com anticorpos da
mãe (hemácias marcadas por anticorpos
maternos)
- teste realizado em recém nascido
- diagnóstica, além da DHRN, a anemia
hemolítica autoimune
- teste com resultado positivo demonstra que
os antígenos eritrocitários do bebe estão
marcados por anticorpos e/ou complementos
materno
- esse teste pode ser realizado com dois
métodos, o método de gel-centrifugação ou o
método que utiliza a análise de tubos de
amostra
*Método Gel-Centrifugação: dentro do gel,
além das hemácias do bebe, terá a presença
de um reagente de Coombs, sendo um
anticorpo Anti-Anticorpo (um anticorpo que irá
reconhecer outro anticorpo)
Reações Positivas Fortes: 4+
Reações Positivas Fracas: 3+, 2+ e 1+
Reações Negativas: nenhum
- junto com esse método é utilizado um teste
de controle positivo, para garantir o resultado
da análise do exame, a partir de hemácias de
controle (hemácias sensibilizadas com
anticorpos) e o soro de Coombs
*Método Teste em Tubo: dentro do tubo, além
das hemácias do bebe, terá um soro de
Coombs
- nessa técnica é feito dois tipos de lavagem
das hemácias, para tentar retirar todo o
excesso do anticorpo, para que se possa ficar
apenas com os anticorpos que estão fixados
nas hemácias
Lavagem I Lavagem II
Coombs com Resultado Positivo
Coombs com Resultado Negativo
→ Teste de Coombs Indireto: pesquisa a hemácia
ligada ao anticorpo (hemácias ‘’in vitro’’)
- é realizado em grávidas (para a detectação
de DHRN), em pré-transfusional (em todos os
candidatos a transfusões), em reações
transfusionais hemolíticas (com a maior
sobrevida eritrocitária pós-transfusional)
- esse teste detecta anticorpos
antieritrocitários clinicamente significativos nos
soros dos pacientes
*Reagentes: suspensão eritrocitária de
doadores selecionados do grupo O, com
fenótipo conhecido (esses doadores nunca
devem ser misturados, devido ao risco de
ocorrer uma diminuição da sensibilidade
técnica)
- antígenos reagentes:
D, C, c, E, e, K, k, Jka, Fya, Fyb, M, N, S, s e Lea
- fenótipos incluídos nasolução:
DCCee (R1R1), DccEE (R2R2) e ccee (rr)
Jk (a+b-), Jk (a-b+)
S+s-, S-s+
Fy (a+b-), Fy (a-b+)
Sintomas da DHRN:
Anemias: devido a destruição de hemácias pelos
anticorpos
Icterícia: maior destruição de hemácias leva a
uma maior produção de Bilirrubina Indireta
(que é convertida em Bilirrubina Direta, no
fígado e eliminada no rim)
Depósito de Bilirrubina: nos núcleos da base
cerebrais pode acarretar retardo mental
Como evitar a DHRN:
- todas as mulheres Rh negativo devem fazer,
no pós parto, o profilático
→ o profilático são vacinas de anticorpos
neutralizantes que impedem que a mãe
produza anticorpos contra o antígeno D
Anticorpos Neutralizantes: IgG Anti-D