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* Sistema endomembranas (Via secretória) RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO * Figure 12-1 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Compartimentos intracelulares e direcionamento de proteínas para estes compartimentos * Núcleo- DNA e RNA ER-50%de membranas do constituem o ER Golgi- empacota e distribui Mit e cloroplastos- produção de ATP Lisossomos- digestão Posicionamento definido na células citoesqueleto * Table 12-1 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Table 12-2 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Tipos de membranas em dois tipos de células eucarióticas Células secretoras grande parte é ER * Figure 12-2 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Microscopia eletrônica * Figure 12-4a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Teoria para surgimento dos compartimentos intracelulares Relação superfície volume em célula eucariótica é ruim Eucarioto tamanho 10-30X>procarioto Eucarioto-volume 1000-10.0000X >procarioto Compensado pelas membranas internas Núcleo e ER * Figure 12-4b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Dupla membrana Próprio material genético Síntese de proteínas Mitocondrias e Cloroplastos * Figure 12-5 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Apesar de interligadas apresentam diferente constituição Posicionamento relativamente definido dentro da célula Equivalentes topológicos: lúmem x meio extracelular Sistema endomembranas * Proteínas citoplasmaticas Como são produzidas proteínas inseridas em membranas??? * Figure 12-6 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Fluxo específico de proteínas Biderecional Ativo Seletivo Poros \nucleo com dupla membrana Transporte transmemebranas Translocadores unidirecional Transporte vesicular Bidirecional Feito em vesículas transpostadpas * Figure 12-6 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Direcionamento é específico Biderecional Ativo Seletivo Poros \nucleo com dupla membrana Transporte transmemebranas Translocadores unidirecional Transporte vesicular Bidirecional Feito em vesículas Transpostadoras Compartimento doador Compartimento receptor * Table 12-3 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) SINALIAZAÇÃO ENDEREÇAMEMTO + - HIDROFÓBICOS ENDERÇAMENTO PARA RE: PEPTÍDEO SINAL Geralmente clivados após síntese (peptidases de sinal) Sequência de AA concentrados em um trecho da proteína Sinais reconhecidos por receptores especificos nas organelas * Table 12-3 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) SINALIAZAÇÃO ENDEREÇAMEMTO + - HIDROFÓBICOS ENDERÇAMENTO PARA RE: PEPTÍDEO SINAL Geralmente clivados após síntese (peptidases de sinal) Sequência de AA concentrados em um trecho da proteína Sinais reconhecidos por receptores especificos nas organelas * Page 723 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-36c Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Conjunto de vesiculas e tubulos que ocupam toda a célula * Figure 12-34a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Proteína de retículo marcada * Figure 12-36a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Sintese de proteinas Sintese de lipideos MP Mit, peroxissoma * Figure 12-41b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-36c Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) DOIS “TIPOS” DE RETÍCULOS * Figure 12-37b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Isolamento RE liso e rugoso * * Descoberta dos peptídeos sinal Anos 70 mRNApara uma proteína a ser secretada Traduzida em por ribossomos “in vitro” MAIOR Traduzido em microsomos MENOR Sequencia no N-term ausente * Figure 12-35 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) TRANSLOCAÇÃO PROTEÍNAS ATRAVÉS MEMBRANAS Translocação simultânea à tradução Translocação pós-tradução * Figure 12-40 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Reconhecimento do peptídeo sinal SRP-Partícula de reconhecimento de sinal 1-SRP solúvel se liga ao peptídeo sinal: parada na tradução 2-Receptor na membrana do ER reconhece SRP+Ribossoma 3-Posicionamento do ribossoma sobre a proteína translocadora * Proteína translocadora (complexo SEC61) Interage com a sub-unidade maior do ribossomo Permite a entrada da proteína no lúmen do ER SRP: Complexo de 6 diferentes proteínas + RNA Localização citoplasmática Bastante conservadas entre espécies Receptor SRP- também conservada ptn integral ER exposta somente à porção citosólica da membrana de ER COMPONENTES DO SISTEMA DE TRANSLOCAÇÃO * * Proteína translocadora (complexo SEC61) Interage com a sub-unidade maior do ribossomo Permite a entrada da proteína no lúmen do ER SRP: Complexo de 6 diferentes proteínas + RNA Localização citoplasmática Bastante conservadas entre espécies Recptor SRP- também conservada ptn integral ER exposta somente à porção citosólica da membrana de ER COMPONENTES DO SISTEMA DE TRANSLOCAÇÃO * Figure 12-39b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-41a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-42b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Translocador SEC 61 Peptídeo sinal-reconhecimento de SRP E abertura do translocador Translocador se abre pra baixo E tb lateralmente * Figure 12-43 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Encaixe perfeito Proteína só pode passar pelo poro * Figure 12-43c Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-44a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-38 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-45 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Ribossomos não representados Translocação de Proteínas solúveis * Figure 12-46 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Mais de um sinal (peptídeo sinal + domínio hidrofóbico transmembrana) Translocador se abre lateralmente liberando a proteína Translocação de Proteínas Transmembranas * Figure 12-47 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Sequencia mais interna na proteína é reconhecida pelo SRP Orientando a ptn na membrana Carga de aa nesta sequencia determina A orientação + citosol Translocação de Proteínas peptídeo sinal interno * Figure 12-47 (part 1 of 2) Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-47 (part 2 of 2) Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) * Figure 12-48 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Várias sequências sinal Não é clivado Translocação de Proteínas transmembrana multipasso * Figure 12-49 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) açúcar * Figure 12-50 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Proteínas citoplasmáticas (geralmente não glicosiladas) Glicosilação N-ligada: ER Bloco de 14 açúcares adicionado a asparagina (N) Depois estes açúcares são modificador e clivados no Golgi Geralemnte durante a tradução OLIGOSACARIL TRANSFERASE Parte interna do ER Modificações pós-traducionais: Glicosilação * Ligação à âncoras de glicofosfatidilinositol (GPI) * Figure 12-51 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Dolicol- lipídeo que carrega o bloco de açúcar no ER * Sem ribossomas Abundante em células: Produtoras de hormonios lipidicos Hepatócitos reticulo com enzimas detoxificantes (citocromo 450) Na presença de droga toxica pode dobrar de volume Músculo- reservatório de Ca+2 intracelular (Bomba de Ca+2,tirado citoplasma) Retículo Endoplasmático Liso * Figure 12-57 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Enzimas envolvidas voltadas para o citoplasma Sintetiza todas as classes de lipídeos Biossíntese fosfolipídeos: ER Liso * Translocação dos fosfolipídeos Extracelular/organelle lumen cytoplasm * Translocação dos fosfolipídeos para outras organelas Proteínas translocadoras de lípídeos (LTP) * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
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