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FACULDADES INTEGRADAS VALE DO IGUAÇU INSTRUÇÃO DE TRABALHO ANALÍTICA Código: ITA – 01 Versão: 1.0 IMUNOLOGIA CLÍNICA Página: 1 de 1 1 – Princípio do Método: Aglutinação em látex. 2 – Principais Aplicações Clínicas: A PCR é encontrada em vários processos inflamatórios, inclusive não infecciosos, em alguns processos neoplásicos e também nos com destruição de tecidos, como por exemplo o infarto agudo do miocárdio. O teste da PCR é geralmente mais aplicado no monitoramento de doenças como a artrite reumatóide e febre reumática aguda entre outras doenças autoimunes. [1] 3 – Material / Amostra: Soro. 4 – Padrões, Calibradores, Reagentes e Insumos utilizados: Reagente do Látex Controle PCR Positivo Controle PCR Negativo Salina para titulação, se necessário. 5 – Equipamentos utilizados: Pipeta, ponteiras, placas de contraste, placas escavadas, pazinhas descartáveis, microscópio. 6 – Procedimento Detalhado: Reações de controle: Colocar em uma placa de contraste ou escavada 25ul do controle positivo + 25ul do reagente da PCR por látex. Misturar com pazinha descartável. Colocar em uma placa de contraste ou escavada 25ul do controle negativo + 25ul do reagente da PCR por látex. Misturar com pazinha descartável. Reação com o reagente da PCR por Látex: Pipetar 25ul de amostra e colocar em uma placa de contrate ou escavada + 25ul do reagente da PCR por látex, Misturar com pazinha descartável. Esperar no mínimo 2 minutos. Observar a olho nu se houve floculação e fazer uma verificação microscópica usando a placa escavada. Titulação (caso haja resultado positivo): Pipetar 25ul de amostra + 25ul de salina e colocar em uma placa escavada, pipetar 25ul dessa solução e colocar em outro poço da placa escavada. No primeiro poço colocar 25 ul de reagente. No segundo colocar mais 25ul de salina, e retirar dessa solução 25ul e colocar em outro poço da placa escavada. Colocar no segundo 25ul do reagente. Observar se há aglutinação nos poços com o reagente e fazer a titulação. Se no primeiro houver aglutinação a titulação é 1:2. No segundo, 1:4. Se houver no segundo, deve ser repetido o procedimento igual nos dois primeiros poços até que a aglutinação acabe. 7 – Cálculos: Não aplicável. 8 – Controle de Qualidade: A utilização dos controles negativo e positivo para a realização do teste é fundamental para verificação da qualidade do procedimento. 9 – Valores de Referência: Negativo. 10 – Interpretação: Os resultados foram: Amostra nº 180001915800: negativo Amostra nº 180001919100: positivo Na segunda amostra que o resultado é positivo é preciso fazer a prova quantitativa, ou seja, a titulação. A PCR (Proteína C Reativa) é uma proteína de fase aguda que tem origem no fígado e tecido adiposo sob o estímulo de mediadores pró-inflamatórios, dentre eles citam-se fator de necrose tumoral (TNF-á) e interleucinas (IL) 1 e 6, suas elevações séricas podem estar relacionadas a quaisquer eventos que levem a injúria tecidual, com a função de opsonização e ativação do complemento. [2] Nas doenças autoimunes é uma das provas mais utilizadas, por ser um excelente parâmetro de monitorização terapêutica, pois eleva-se precocemente no decorrer da doença e sua concentração é capaz de mudar junto com a evolução da doença, se está melhorando ou piorando. [3] 11 – Referências: [1] INTERLAB. PCR Proteína C-Reativa. Rev 08. Disponível em: <www.interlabdist.com.br/modules/produto_bula.php?cmpProduto=1635>. Acesso em: 15 mar. 2018. [2] VEIGA, Ângela Patrícia Medeiros, et al. Utilização de técnica rápida de aglutinação em látex para determinação semquantitativa dos níveis séricos de proteína C reativa em cães. Rev. Acta Scientiae Veterinariae. v. 37, p.151-155, 2009. [3] BELIZÁRIO, Ana Carolina. Marcadores de inflamação e doenças autoimunes. Disponível em: <https://www.passeidireto.com/.../marcadores-de-inflamacao-e-doencas-autoimunes>. Acesso em: 15 mar. 2018. Elaboração Professor: Rafael Fiamoncini Ferreira. Matéria: Imunologia Clínica Execução Acadêmico: Turma/Período: Da I.T Data: 07/02/2018 Da I.T Data: Assinatura: Assinatura:
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