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Genética Bacteriana Prof. Ma. Francine Maery Dias Ferreira-Romanichen Conceitos • Genoma informação genética de uma célula, inclui cromossomos e plasmídeos; • Cromossomos estruturas contendo DNA que transportam fisicamente a informação hereditária e contêm os genes; • Genes segmentos de DNA que codificam produtos funcionais. Conceitos • DNA: – Macromolécula composta por unidades repetidas (nucleotídeos), e cada nucleotídeo consiste em uma base nitrogenada (adenina, timina, citosina ou guanina), uma desoxirribose (um açúcar pentose) e um grupo fosfato; – Existe como longos filamentos de nucleotídeos, retorcidos em pares, para formar uma hélice dupla; – Duas fitas são complementares. DNA Bacteriano • Possuem um único cromossomo circular consistindo de uma única molécula circular de DNA com proteínas associadas; • Está recurvado e dobrado e aderido à membrana plasmática. Replicação do DNA • Possibilita o fluxo de informação genética de uma geração para a seguinte cada célula-filha receba um cromossomo idêntico ao da original; • As bases ao longo das duas fitas do DNA de hélice dupla são complementares uma fita serve de molde para a produção da outra. Replicação do DNA Replicação de DNA Replicação Replicação do DNA Síntese de Proteínas • A informação genética é copiada no DNA, ou transcrita, em uma sequência de bases de RNA a informação codificada neste RNA é usada para sintetizar proteínas específicas pelo processo de tradução. Transcrição do DNA • Síntese de uma fita complementar de RNA a partir de um molde de DNA; • Existem 3 RNAs: – RNA mensageiro tranporta a informação codificada para produzir proteínas específicas do DNA aos ribossomos, onde as proteínas são sintetizadas; – RNA ribossômico forma a maquinaria celular para a síntese de proteínas; – RNA de transferência. Transcrição do DNA Transcrição do DNA • Permite que a célula produza cópias de curta duração dos genes, que podem ser usadas como fonte direta de informação para a síntese proteica; • mRNA atua como um intermediário entre a forma de armazenamento permanente, o DNA, e o processo que usa a informação, a tradução. Tradução • Informação genética no DNA é transferida ao mRNA durante a transcrição síntese proteica é denominada tradução, pois converte a informação dos ácidos nucléicos em proteínas; • Linguagem do mRNA está em forma de códons (grupos de três nucleotídeos) sequência de códons em uma molécula de mRNA determina a sequência de aminoácidos que estarão na proteínas a ser sintetizada; • Cada códon codifica um aminoácido específico. Tradução do DNA Tradução do DNA Tradução do DNA Tradução do DNA Resumo • Os genes unidades de informação biológica condificada pela sequência de bases nucleotídicas; • Um gene expresso transformado em um produto pelos processos de transcrição e tradução; • A informação genética transportada no DNA é transferida para um molécula temporária de mRNA pela transcrição; • Tradução mRNA dirige a montagem dos aminoácidos em uma cadeia polipeptídica: um ribossomo se fixa ao mRNA, tRNAs enviam os aminoácidos ao ribossomo, conforme orientado pela sequência de códons do mRNA, e o ribossomo monta os aminoácidos proteína. Mutações • Alterações na estrutura química ou física do DNA; • Podem ser ocasionadas por agentes físicos ou químicos chamados de mutagênicos ou agentes genotóxicos; • São fontes de uma grande variedade genética processo de adaptação; • Mutações espontâneas ocorrem na ausência da intervenção de agentes causadores de mutações; • Mutações induzidas produto de uma ação deliberada na qual o organismo é exposto à ação de um agente genotóxico. Tipos de Mutações • Mutações Silenciosas: – alteração na sequência de bases do DNA não causa alterações na atividade do produto codificado pelo gene; – nucleotídeo é substituído por outro terceira posição do códon do mRNA, codificando o mesmo aminoácido; – Aminoácido alterado função da proteína não se modifica se o aminoácido não estiver em uma porção vital da proteína, ou for muito semelhante quimicamente ao aminoácido original. Tipos de Mutações • Substituição de bases (ou mutação de ponto): – Tipo mais comum de mutação; – Envolve um único par de bases; – Uma única base em um ponto na sequência do DNA é substituída por uma base diferente; – DNA se replica substituição de um único par de base, AT substituído por GC, ou CG por GC. Tipos de Mutações • Mutação missense: – Troca de bases ocorre dentro de um gene que codifica uma proteína, o mRNA transcrito a partir do gene transportará uma base incorreta naquela posição; – Se a substituição de base resultar em uma substituição de aminoácidos na proteína sintetizada. Tipos de Mutações • Mutação nonsense: – Substituição de base que resulta em um códon sem sentido; – Criação de um códon de parada no meio de uma molécula de mRNA impendem efetivamente a síntese de uma proteína funcional completa, somente um fragmento é sintetizado. Tipos de Mutações • Mutações de fase de Leitura: – Alguns pares de nucleotídeos são removidos ou inseridos no DNA; – Alteram os agrupamentos de 3 nucleotídeos reconhecidos como códons pelo tRNA durante a tradução; – Resultam em uma longa sequência de aminoácidos alterados e na produção de uma proteína inativa do gene que sofreu mutação. Recombinação Genética • Troca de genes entre duas moléculas de DNA, para formar novas combinações de genes em um cromossomo; • Crossing over em eucariotos; • Contribui para diversidade genética de uma população variação evolutiva; • Mais benéfica que a mutação tem menos chance de destruir a função de um gene e pode unir combinações de genes que permitem ao organismo realizar uma função nova importante; • Salmonella spp. proteínas flagelares diferentes. Transferência Genética • Transferência gênica vertical: – Genes são passados de um organismo para seus descendentes. • Transferência gênica horizontal: – Genes são passados de um organismo para mesma geração. • Célula doadora doa parte de seu DNA total para uma célula receptora incorporada ao DNA do receptor restante é degradado por enzimas celulares; • Célula recombinante célula receptora que incorporta o DNA doador em seu próprio DNA. Transformação • Genes são transferidos de uma bactéria para outra como DNA “nu” em solução; • Algumas bactérias após a morte ou lise celular, liberam seu DNA no ambiente outras bactérias podem encontrar o DNA e, dependendo da espécie e das condições de crescimento, captar os fragmentos de DNA e os integrar em seus próprios cromossomos por recombinação; Transformação • Ocorre naturalmente entre poucos gêneros de bactérias: – Bacillus, Haemophilus, Neisseria, Acinetobacter e certas linhagens dos gêneros Streptococcus e Staphylococcus. • Células doadora e receptora intimamente relacionadas; • Uma pequena porção do DNA deve passar através da parede e da membrana celular do receptor; • Competente quando a célula receptora está em um estado fisiológico em que pode captar o DNA doador em que resulta em alterações na parede celular, tornando-a permeável a moléculas grandes de DNA. Conjugação • Mediada por um tipo de plasmídeo; • Transformação X Conjugação: – A conjugação requer contato direto célula a célula; – As célula em conjugação geralmente devem ser de tipos opostos de acasalamento, as células doadoras devem transportar o plasmídeo, e as células receptoras normalmente não. Conjugação Conjugação • Replicação de plasmídios: – Quandoa célula bacteriana se divide DNA plasmidial também se divide, assegurando que cada célula-filha receba uma cópia. Conjugação • Replicação de plasmídios: – Durante o processo de conjugação, em que a molécula de DNA replicada pode entrar na célula receptora; – DNA se liga à membrana citoplasmática e utiliza as enzimas e maquinaria para replicação do DNA cromossomal. Conjugação • Tipos de Plasmídeos: – Conjugativo habilidade de conferir a propriedade de fertilidade; – Não conjugativos não conseguem efetuar sua própria transferência; – Plasmídeos de tipo sexual capazes de se integrar ao cromossomo ou podem permanecer independente do cromossomo do hospedeiro ocorre transferência durante a conjugação. Conjugação • Tipos de Plasmídeos: – Plasmídeos R resistência a antibióticos, possui 2 componentes, o determinante de resistência R e o fator de transferência de resistência RTF. O RTF é necessário para a transferência dos determinantes, que contêm informação para formação do pilus para transferência de DNA por conjugação. Quando a bactéria não tem o RTF, são incapazes de transferir estes determinantes a outras durante a conjugação; – Plasmídeos virulentos favorece virulência; – Plasmídeos resistentes a mercúrio e outros íons de metais pesados; – Plasmídeos que geram hiperplasias em plantas. Transdução • DNA bacteriano é transferido de uma célula doadora para uma célula receptora dentro de um vírus em que infecta bactérias, denominado de bacteriófago. Transdução • Existem 2 tipos: – Generalizada em que um fago penetra uma bactéria, e durante a reprodução dos fagos, o DNA e a proteína são sintetizadas pela bactérias hospedeira. O DNA do fago deve ser empacotado dentro do capsídeo proteico que o recobre, mas o DNA bacteriano, o DNA plasmidial ou até mesmo o DNA de outro vírus podem ser empacotados dentro do capsídeo proteico; – Especializada ocorre a transferência de genes bacterianos específicos, que estão localizados próximos do sítio de integração viral. Transposons • Pequenos segmentos de DNA que podem se mover de uma região de uma molécula de DNA para outra; • Se movem de um local para outro no mesmo cromossomo, ou para outro cromossomo ou plasmídeo; • Transposons simples: – Denominado sequências de inserção (SI); – Um gene que codifica uma enzima (transposase, que catalisa a clivagem e a remontagem do DNA que ocorrem na transposição); – Sítios de reconhecimento sequências curtas de DNA repetidas e invertidas, que a enzima reconhece como sítios de recombinação entre o transposon o cromossomo. Transposons • Transposons complexos: – Transportam outros genes não conectados ao processo de transposição (para endotoxinas ou resistência a antibióticos) plasmídeos R são compostos por um conjunto de transposons. • Fornecem um mecanismo natural para o movimento de genes de um cromossomo para outro Podem ser transportados entre células em plasmídeos ou vírus, eles também podem se disseminar de um organismo para outro ou até mesmo de uma espécie para outra. Referências • TRABULSI, L. R.; ALTERTHUM, F. Microbiologia, 5ª ed. 2008. • TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 10ed. 2012.
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