Instrumentação Biomédica (Aula 3)

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Instrumentação Biomédica
equipamentos gerais de laboratório
Prof. Msc. Samuel Arruda
Roteiro
1. Configuração e organização do espaço físico;
2. Função e manuseio de equipamentos;
3. Centrifuga e Ultracentrifugação;
Configuração do espaço
A Bancada:
Área de maior atividade manual (Risco de acidente);
Necessita de organização espacial;
Equipamentos mais comuns/fácil manuseio;
Configuração do espaço
Configuração do espaço
A bancada é espaço para:
Configuração do espaço
ORGANIZAÇÃO
MANUTENÇÃO
FUNCIONALIDADE
Configuração do espaço
Laboratório Principal:
Área designada às atividades rotineiras mais complexas;
Local para execução de reações e testes;
Realização de ensaios e obtenção de resultados que são realizados na bancada;
Configuração do espaço
Laboratório Principal:
Armários;
Áreas das pias;
Capela;
Freezer (-20°C);
Purificadores de água;
pHmetro;
Utrafreezer (-70°C);
Descartes;
Incubadora;
Contador de células;
Microscópio;
Banhos;
Configuração do espaço
Outros espaços e salas “Cozinha”;
Limpeza de materiais;
Esterilização;
Configuração do espaço
Outros espaços e salas “Cozinha”;
Autoclave;
Caixa de gelo seco;
Lavadora de vidrarias;
Máquina de gelo;
Lavadoras de pipetas;
Configuração do espaço
Outros espaços e salas “Sala escura”;
Gavetas;
Câmeras;
Lâmpada de segurança;
Transluminador UV;
Configuração do espaço
Outros espaços e salas “Câmara Fria (4°C)”;
Colunas (imunocromatográfico);
HPCL (Cromatografia líquida de alta eficiência);
FPLC (Cromatografia líquida de proteína rápida);
Meios preparados;
Reagentes termossensíveis;
Amostras, bolsa de sangue..... 
Outros equipamentos
Misturar e agitar
Estufa com agitador;
Oscilador;
Rotatória;
Incubadora com agitador;
Agitador com banho;
Misturador;
Quantificar
Computador;
Contadores;
Leitor de placas;
Outros equipamentos
Manter ou alterar temperatura:
Banho seco;
Incubadoras;
Micro-ondas;
Termociclador;
Secador a vácuo;
Outros equipamentos
Provocar alterações:
Sintetizador de DNA;
Eletroporador;
Sonicador;
Câmara UV;
Outros equipamentos
Qualidade da água:
“A água é um reagente utilizado na maioria dos testes laboratoriais e por isso deve seguir um padrão de controle de qualidade rigoroso”
Qualidade da água
Água de fornecimento urbano:
Moléculas orgânicas;
Íons inorgânicos; 
Partículas; 
Coloides;
Gases;
Bactérias e seus produtos;
Água com grau de laboratório:
Depende do grau de aplicação;
Os padrões estabelecidos pelo CLSI (C3-A4);
Previamente tratada;
Qualidade da água
Qualidade da água
Osmose reversa
Destilação
Qualidade da água
Destilador
Qualidade da água
Osmose reversa
Qualidade superior à da destilação
Qualidade da água
Água ultrapura:
Apenas H2O;
Livre de endotoxinas;
PCR;
Cultura celular;
“Millipore”
Centrifugação
Histórico
 1895 1905-06 1910
Histórico
 1912 1934
Histórico
Atualmente
Histórico
Centrifugação
Definição:
“ A centrifugação é um processo de separação em que a força centrífuga relativa gerada pela rotação da amostra é usada para sedimentar sólidos em líquidos, ou líquidos imiscíveis de diferentes densidades.”
É utilizado nos ambientes:
Laboratoriais 
Domésticos 
Industriais 
Principio
Força centrifuga relativa:
É gerada quando uma partícula ou conjunto de partículas é sujeito a um movimento circular;
Relembrando a Segunda Lei de Newton:
“Uma partícula em movimento uniforme linear não perturbada por forças exteriores continuará com este tipo de movimento.”
Principio
Velocidade constante e uma trajetória retilínea;
 Desenvolve uma trajetória circular, formado a velocidade angular;
Uma força é exercida na partícula de modo que ele tenta continuar na trajetória retilínea;
FCR (Força Centrifuga Relativa);
Principio
FCR (Força Centrifuga Relativa):
Intensidade aumento com o quadrado da velocidade angular;
Diretamente proporcional ao raio da circunferência e a massa da partícula;
Resumidamente:
Principio
Aplicação Laboratorial
Separação de amostras:
Balanceamento dos tubos;
Introdução dos tubos:
Os tubos devem ser dispostos diametralmente no rotor de centrífuga (200 µL – 2mL até 1L)
Aplicação Laboratorial
Separação de diferentes fases:
Fase sólida da aquosa:
As partículas insolúveis em uma amostra sedimenta nos fundo;
O sobrenadante é aspirado ou descartado e o sedimento é retirado do tubo;
Aplicação Laboratorial
Aplicação Laboratorial
Centrifugação Diferencial:
Desenvolvida por John Champerline e Juan Burdettee;
Amostra homogeneizada (homogenato) de um tecido ou orgão;
Repetidas centrifugações com aumento da força centrífuga; 
Aplicação Laboratorial
Centrifugação Diferencial:
Permite a separação de diferentes organelas celulares de eucariotos;
Sedimentação de partículas de diferentes pesos em cada fase;
Aplicação Laboratorial
Aplicação Laboratorial
Centrifugação Isopícnica:
Chamada também de centrifugação de equilíbrio;
É usada para a separação de macromoléculas;
Gradientes de concentração da solução base.
Aplicação Laboratorial
Centrifugação Isopícnica:
Separação DNA (CsCl);
Separação de organelas (Gradiente Sacarose);
Separação Tipos celulares do sangue periférico (Percoll/Ficoll);
Aplicação Laboratorial
Ultracentrifugação:
Centrifugação necessita de um tipo especial de centrifuga (Ultracentrifuga); 
Velocidade alcançada é muito elevada (20.000 rpm)
Aplicação Laboratorial
Ultracentrifugação:
Neste tipo de centrifuga, a câmara do rotor é refrigerada e sob vácuo, para evitar o aquecimento em contato com o ar. 
OBRIGADO