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ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLÉICO (DNA)O DNA é o material genéticoA informação genética está disposta em Genes Material genético compactado na região nucleóideCromossomo único, circular fechado (na maioria dasbactérias, ex: Escherichia coli)Célula procariótica (bactérias)Célula eucarióticaMaterial genético compactado no núcleoVários cromossomos, linearesMaterial genético encontrado, também, em cloroplastos e mitocôndriasVírusCromossomo único Dogma Central da Biologia MolecularTranscriçãoTradução ESTRUTURA DO DNAConstituintes do DNAFosfatoAçúcar (desoxirribose)Base nitrogenada: Purinas (Adenina e Guanina) Pirimidinas (Citosina e Timina)Arranjados em nucleotídeosA polimerização dos nucleotídeos forma o DNA Níveis de organização do ácido desoxirrubonucléico (DNA)Estrutura primáriaSequência de nucleotídeosEstrutura secundáriaDupla-héliceEstrutura terciária Arranjo espacial do DNA cromossomal em cromatina (eucariotos) e nucleóide(procariotos) As bases nitrogenadas do DNA são constituídas por anéis contendo nitrogênio e carbono Adenina Guanina Citosina Timina PURINASAdenina e GuaninaContêm um par de anéis fundidosPIRIMIDINASCitosina e Timina Contêm um único anel Ligação fosfodiéster As bases são ligadas ao carbono 1´ da desoxirriboseO grupo fosfato está ligado ao carbono 5´ da desoxirribose O DNA é composto de dois filamentos de nucleotídeosOligonucleotídeos: até 50 unidadesPolinucleotídeos: acima de 50 unidades James Watson e Francis Crick (1953)demonstraram como os nucleotídeos estão ordenados no DNA Parte da ligação fosfodiésterlocaliza-se entre o fosfato e o carbono 5´, e parte entre o fosfato e o carbono 3´ da desoxirribose Polaridade 5´ 3´ Na molécula, os dois filamentos têm orientações opostas DNA é negativamente carregadoUm filamento está orientado 5´ 3´, e o outro filamento orientado 3´ 5´ Os dois filamentos estão unidos entre si por meio de pontes de hidrogênio entre suas bases complementares (duas entre A-T, e três pontes entre C-G) Os dois filamentos da molécula de DNA estão mantidos lado a lado e retorcidos sob a forma de dupla héliceO açúcar-fosfato está do lado de fora da dupla hélice e as bases se projetam para o interiorO DNA natural tem uma hélice orientada para a direita A dupla-hélice contém sulcos com dois tamanhos distintos * Suas superfícies são usadas por diferentes classes de proteínas que se ligam ao DNA Propriedades do DNACom a orientação em sentido inverso dos filamentos do DNA e a regra de pareamento de bases, o DNA pode ser corretamente duplicadoO DNA possui conteúdo de informação, dado por sua sequência de nucleotídeos Fornecimento de variação genética por meio das mutações, que resultam em mudança da informação codificada Natureza dos genesPode-se definir um gene como uma região do DNA capaz de ser transcrita a fim de produzir uma molécula de RNA funcional, no momento e no lugar corretos durante o desenvolvimento de um organismoOs genes possuem em uma extremidade uma região reguladora, e na outra extremidade, uma região contém sinais para finalizar o transcritoMuitos genes de eucariontes contêm regiões de íntrons(não codificam para a proteína em questão) e regiões codificadoras denominadas éxonsEntre os genes existe DNA intergênico e em muitos eucariontes, parte do DNA entre os genes é repetitiva Natureza dos genomas A organização dos genes no DNA difere nos procariotos e nos eucariotos O Genoma é o conjunto completo do DNA de um organismoOs genomas são medidos em unidades de pares de basesEm genomas de plasmídeos, organelas e vírus há pouco espaço intergênico, esses genomas não possuem grandes quantidades de proteínas associadas a eles Genomas de procariontesO genoma da maioria dos procariontes está contido em um único cromossomo, uma dupla hélice de DNA única, fechada e circular* Algumas bactérias contêm plasmídeos, pequenos elementos de DNA, não essenciais à operação básica da célula, mas podem ser úteis à célula* Pouco espaço intergênico e os íntrons são rarosEm algumas regiões do genoma, alguns genes funcionalmente relacionados se encontram juntos como um grupo, e uma molécula de mRNA é produzida a partir da unidade inteira operonGenoma de bactéria Genomas nucleares de eucariontesEm eucariontes, a grande maioria de genes encontra-se organizada em cromossomos no núcleoCromossomos diferentes no genoma contêm diferentes grupos de genes O material que compõe o cromossomo denomina-se cromatina, constituída de DNA e proteínaDNA de eucariontes é compactado de forma eficienteCada cromossomo é uma molécula de DNA densamente pregueada Os nucleossomos contêm um octâmero de duas unidades cada um de histonas H2A, H2B, H3 e H4 O nucleossomoassume uma forma helicoidizadachamada solenóide, estabilizado por outra histona, H1, que fica no centro da estrutura A cromatina está organizada em nucleossomosO DNA é enrolado duas vezes ao redor do octâmero Um nível de compactação adicional converte o solenóide na estrutura tridimensional chamada cromossomo Os cromossomos apresentam uma região central de proteína não-histona, oarcabouço centralAs alças de DNA projetam-se lateralmente a partir do arcabouço central, cuja matriz tem forma de espiral Os cromossomos estão super-helicoidizados no núcleo durante multiplicação celular O arcabouço central organiza o DNA durante a replicação A dupla-hélice de DNA pode ser desnaturadae renaturadaAgentes desnaturantesAquecimentoExtremos de pH Perfil de desnaturaçãocaracterístico de moléculas de DNA Temperatura (oC)D e s n a t u r a ç ã o ( % ) Fatores que afetam a termperatura de desnaturação(Tm) do DNATamanho da molécula: diretamenterelacionadoConteúdo de bases G+C: diretamenterelacionadoForça Iônica: diretamenterelacionadopH: inversamente relacionadoPresença de solventes orgânicos: inversamente relacionado Relação entre a temperatura de desnaturação (Tm) e a composição de bases do DNA tm (oC) G + C (% do total de nucleotídeos) Nucleotídeos absorvem luz Ultra-Violeta (UV) Comprimento de onda (nm) Comprimento de onda (nm)C o e f i c i e n t e m o l a r d e a b s o r ç ã o C o e f i c i e n t e m o l a r d e a b s o r ç ã o