Método de Kjedahl

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Título: Determinação de proteínas – Método de Kjeldahl
Introdução:
Proteína Bruta envolve um grupo de substâncias que tem como estrutura fundamental o aminoácido. As proteínas possuem diferentes propriedades físicas e químicas, dessa forma não tem solubilidade, reatividade, ponto de fusão e ebulição iguais. Devido a isso essas características não podem ser tomadas como base para a análise quantitativa, mas todas as proteínas têm em comum a presença de aminoácidos que tem grupo amina (-NH). (COLLI et al., 2011)	
O método de Kjeldahl (proteína bruta) determina a matéria nitrogenada total de uma amostra. A base do processo consiste no deslocamento do nitrogênio presente na amostra, transformando-o em um sal, sulfato de amônio (NH3 SO4), por digestão à quente com H2SO4. ( Apostila )
Segundo Purgatto (2013), a utilização desse método tem vantagens e desvantagens:
Vantagens: 
Aplicável a todos os tipos de alimentos ;
Relativamente simples;
Não é caro;
Preciso, pois trata-se de um método oficial para a determinação de proteínas;
Vem sendo modificado para análise de microgramas de proteína ( Micro Kjeldahl )
Desvantagens:
Mede nitrogênio orgânico total, não apenas nitrôgenio de proteínas;
Demorado;
Utiliza reagentes corrosivos.
Objetivo:
Determinar o teor de proteína bruta de amostra de aveia obtida pela multiplicação do teor de Nitrogênio total pelo fator de conversão do método de Kjeldhal.
Material utilizado:
Balança analítica;
Tubos de digestão
Digestor de proteína
Bureta
Suporte para bureta
Erlenmeyers de 125ml
Pipeta de 5ml
Regentes e soluções
Sulfato de cobre – CuSO4 (catalizador)
Sulfato de potássio – K2SO4 (catalizador)
Ácido sulfúrico concentrado ( H2SO4)
Solução saturada de ácido bórico – H3CO3 
Solução de hidróxido de sódio 40% (NaOH)
Solução de HCI 0,02N
Solução indicadora de fenolftaleína
Fundamentos da técnica
Digestão em meio ácido ( Acontece fora do equipamento )
Alimento (0,1g de aveia) + H2SO4 concentrado (2ml) = (NH4)2 SO4
Alcalinização: ( Acontece dentro do equipamento )
 (NH4)2 SO4 + NaOH (hidróxido de sódio 17ml) = NH4 OH + Na2 SO4
Destilação ( Acontece dentro do equipamento )
NH4 OH + H3BO3 (Ácido bórico) = NH4 H2 BO3
Titulação ( Acontece fora do equipamento )
Pega o resultado da destilação (borato ácido de amônio), e pinga o ácido sulfúrico até o borato mudar de cor.
Procedimento
Transferir para o tubo de digestão: 2g de sulfato de potássio, 40mg de sulfato de cobre e 1g de amostra. Adicionar 3ml de ácido sulfúrico concentrado.
Colocar o tubo para digerir no aparelho digestor entre 350 a 450°C.
O tempo gasto na digestão depende da amostra. O final da digestão é indicado quando o material no fundo do tubo está transparente.
Esperar esfriar um pouco e acrescentar aproximadamente 10 ml de água ao tubo e agitar até dissolver.
Transferir para o erlenmeyer 5 ml de solução de ácido bórico saturada e 2 a 3 gotas de solução indicadora.
No equipamento de destilação encaixe o tubo e o erlenmeyer nos locais apropriados. Acrescente ao tubo 25 ml de solução de hidróxido de sódio.
Execute a destilação da amostra. 
Recolha no erlenmeyer aproximadamente 50ml de destilado e titule com a solução de HCI.
Determine o branco da análise.
A diferença entre o volume de HCI utilizado na titulação da amostra e o volume de HCL utilizado na titulação do branco, será utilizada para determinar a quantidade de nitrogênio na amostra.
Cálculo utilizado
NEq H2SO4 = Neq borato
NEq H2SO4 = N * V (L)
NEq 0,1 * 1,3 / 1000
NEq = 0,00013
----------------------
NEq = Massa / 79
Massa = 0,00013 * 79
Massa = 0,01027g
----------------------
 79g --------------- 14gN
0,01027g --------------- X
79X = 0,01027 * 14
79X = 0,14378
 X = 0,14378 / 79
 X = 0,00182gN
-------------------------
100g PTN ------------------------ 16gN (Nitrogênio)
 X ------------------------ 0,00182gN 
16X = 0,00182 * 100
16X = 0,182
 X = 0,182 / 16 
 X = 0,011375 g PTN
--------------------------------------
0,011375 ------------------ 0,1g
 X -------------------100g
0,1X = 0,011375 * 100
0,1X = 1,1375
 X = 1,1375 / 0,1
 X = 11,37 % de PTN
Resultado final do cálculo: 11,37%
Conclusão
Depois de utilizado o método de Kjedahl na amostra de Aveia (1g), chegamos a conclusão que essa amostra contém 11,37% de proteína. 
 
Referências bibliográficas
PURGATTO, Eduardo. Análise de proteínas. ---: Fcf - Usp, 2013. 24 p.
COLLI, Daiane et al. DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNA BRUTA PELO MÉTODO DE MICRO-KJELDAHL. 2011. Disponível em: <http://www.ebah.com.br/content/ABAAAe1_0AJ/determinacao-proteina-bruta-pelo-metodo-micro-kjeldahl>. Acesso em: 27 set. 2014.
Apostila