ágar XLD

Prévia do material em texto

PI 7166 Rev 05, Dezembro 2008 
ÁGAR XLD – XLD AGAR (7166) 
 
Uso Previsto 
O Ágar XLD é utilizado para o isolamento e diferenciação de patógenos entéricos. Harmonizado de acordo 
com os requerimentos USP/EP/JP.1,2,3 
 
Sumário e Explicação do Produto 
O Ágar Base XL (Xilose Lisina) foi desenvolvido por Taylor4 para o isolamento e diferenciação de bacilos 
entéricos Gram-negativos. O Ágar Base XL foi suplementado com tiossulfato de sódio, citrato férrico 
amoniacal e desoxicolato de sódio para o desenvolvimento de um meio mais seletivo, o Ágar XLD. 
 
O Ágar XLD foi desenvolvido principalmente para o isolamento de Shigella spp. e Providencia spp. e tem 
mostrado ser um meio efetivo para diferenciação.5-7 
 
Princípios do Procedimento 
O Extrato de Levedura fornece nitrogênio, carbono e vitaminas necessárias para o crescimento do 
organismo. A Xilose, Lactose e Sacarose são os carboidratos fermentáveis. A Xilose é fermentada pela 
maioria dos organismos entéricos, exceto pela Shigella spp. e Providencia spp. A Lisina é adicionada para a 
diferenciação da Salmonella. Com o esgotamento da Xilose, Salmonella spp. descarboxila a lisina causando 
uma reversão às condições alcalinas. A reversão à condição alcalina por outros organismos lisina-positivos é 
impedida pela produção excessiva de ácido proveniente da fermentação da lactose e sacarose. 
 
Tiossulfato de Sódio e Citrato Férrico Amoniacal agem como agentes seletivos, permitindo a visualização da 
produção de sulfeto de hidrogênio sob condições alcalinas. O Desoxicolato de Sódio também é um agente 
seletivo. O Vermelho de Fenol é um indicador. O Cloreto de Sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio. O 
ágar é o agente solidificante. 
 
Fórmula / Litro 
Extrato de Levedura .................................................................. 3 g 
Lactose .................................................................................. 7,5 g 
Sacarose ................................................................................ 7,5 g 
Xilose ..................................................................................... 3,5 g 
L-Lisina ..................................................................................... 5 g 
Citrato Férrico Amoniacal ...................................................... 0,8 g 
Vermelho de Fenol ............................................................... 0,08 g 
Cloreto de Sódio ....................................................................... 5 g 
Desoxicolato de Sódio ........................................................... 2,5 g 
Tiossulfato de Sódio .............................................................. 6,8 g 
Ágar ..................................................................................... 13,5 g 
pH Final: 7,4 ± 0,2 a 25°C 
A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada conforme necessário para atender as especificações de desempenho. 
 
Precauções 
1. Somente para o uso em laboratório. 
2. IRRITANTE. Irritante para os olhos, sistema respiratório e pele. 
 
Modo de Preparo 
1. Suspenda 55 g do meio em 1 L de água purificada. 
2. Aqueça, agitando frequentemente até que o meio atinja o ponto de ebulição. 
3. EVITE O SUPER AQUECIMENTO. NÃO AUTOCLAVE. 
 
Especificações de Controle de Qualidade 
Aparência Desidratado: O pó é homogêneo, fluxo livre e bege rosado claro. 
 
 
PI 7166 Rev 05, Dezembro 2008 
 
Aparência Preparado: O meio preparado é vermelho brilhante a vermelho alaranjado e ligeiramente turvo. 
 
Resposta Esperada de Cultivo: Resposta de cultivo no Ágar XLD incubado de acordo com as 
especificações para temperatura e tempo de incubação de acordo com os requerimentos USP/EP/JP.1,2,3 
 
Micro-organismo Inóculo 
Aproximado 
(UFC) 
Resultados Esperados 
Crescimento Reação 
Enterococcus faecalis ATCC® 29212 103 Inibição parcial a 
completa 
Colônias vermelhas (quando 
recuperadas) 
Escherichia coli ATCC® 8739 103 Inibição parcial a 
completa 
Colônias amarelas a 
vermelha amarelada 
Escherichia coli ATCC® 25922 103 Inibição parcial a 
completa 
Colônias amarelas a 
vermelho amarelada 
Salmonella typhimurium ATCC® 14028 10–100 Bom a excelente Colônias vermelhas com 
centros pretos 
Shigella flexneri ATCC® 12022 10–100 Fraco a bom Colônias vermelhas 
 Os organismos listados são os mínimos que devem ser avaliados para o teste de controle de qualidade. 
 
Procedimento do Teste 
Espécimes fecais ou swabs retais podem ser semeados diretamente. Caldos de enriquecimento seletivos, 
tais como o Caldo Selenito ou Tetrationato, podem ser utilizados antes da semeadura.8,9 Para procedimentos 
específicos, refira-se às referências apropriadas. 
 
Resultados 
A degradação da xilose, lactose e sacarose produz produtos ácidos, causando uma mudança na coloração 
das colônias e no meio de vermelho para amarelo. 
 
A produção de sulfeto de hidrogênio sob condições alcalinas resulta em colônias com centros pretos. Esta 
reação é inibida por condições ácidas provenientes da fermentação de carboidrato. 
 
 A descarboxilação da lisina, na ausência da fermentação de lactose e sacarose, resulta em uma reversão à 
condição alcalina. Esta condição alcalina causa a mudança de cor do meio de preto para vermelho. 
 
Armazenamento 
Armazene o frasco contendo o meio desidratado devidamente fechado entre 2–30°C. Uma vez aberto e 
fechado novamente, coloque o frasco em um ambiente de baixa umidade e na mesma temperatura de 
armazenamento. Proteja contra a umidade e luz mantendo o frasco firmemente fechado. 
 
Validade 
Refira-se à data de validade no frasco. O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente ou se 
houver mudança na coloração original. A validade se aplica ao meio em sua embalagem intacta quando 
armazenado como indicado. 
 
Limitações do Procedimento 
1. Algumas cepas apresentam um crescimento fraco neste meio ou a ausência de crescimento. 
2. Colônias vermelhas, falso-positivas, podem ocorrer com Proteus e Pseudomonas. 
3. Incubação acima de 48 horas pode resultar em um teste falso-positivo. 
 
Embalagem 
Ágar XLD N° Código 7166A 500 g 
 7166B 2 kg 
 7166C 10 kg 
 
 
 
 
 
 
 
 
PI 7166 Rev 05, Dezembro 2008 
 
 
Referências 
1. United States Pharmacopeial Convention. 2007. The United States pharmacopeia, 31st ed., Amended Chapters 61, 62, 111. 
The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD. 
2. Directorate for the Quality of Medicines of the Council of Europe (EDQM). 2007. The European Pharmacopoeia, Amended 
Chapters 2.6.12, 2.6.13, 5.1.4, Council of Europe, 67075 Strasbourg Cedex, France. 
3. Japanese Pharmacopoeia. 2007. Society of Japanese Pharmacopoeia. Amended Chapters 35.1, 35.2, 7. The Minister of Health, 
Labor, and Welfare. 
4. Taylor, W. I. 1965. Isolation of shigellae. I. Xylose lysine agars: new media for isolation of enteric pathogens. Am. J. Clin. Pathol. 
44(4):471-475. 
5. Rollender, W., O. Beckford, R. D. Belsky, and B. Kostroff. 1969. Comparision of xylose lysine deoxycholate agar and 
MacConkey agar for the isolation of Salmonella and Shigella from clinical specimens. Tech. Bull. Reg. Med. Tech. 39(1):8-10. 
6. Pollock, H. M., and B. J. Dahlgren. 1974. Clinical evaluation of enteric media in the primary isolation of Salmonella and Shigella. 
Appl Microbiol. 27(1):197-201. 
7. Bhat, P., and D. Rajan. 1975. Comparative evaluation of desoxycholate citrate medium and xylose lysine desoxycholate medium 
in the isolation of shigellae. Am. J. Clin. Pathol. 64:399-404. 
8. P. R. Murray, E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). Manual of clinical microbiology, 6th ed. 
American Society for Microbiology, Washington, D. C. 
9. Isenberg, H. D. (ed.). 1992. Interpretation of aerobic bacterial growth on primary culture media, Clinical microbiology procedures 
handbook, vol. 1 p. 1.61-1.67.American Society for Microbiology, Washington, D.C. 
 
Informação Técnica 
Contate a Neogen do Brasil para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura 
desidratado no telefone 19.3935-3727. 
Contate a Acumedia Manufacturers, Inc. para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de 
cultura desidratado no telefone +1 (517)372-9200 ou fax +1 (517)372-2006. 
 
	Princípios do Procedimento
	Especificações de Controle de Qualidade
	Embalagem
	Ágar XLD N Código 7166A 500 g
	Referências