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CURSO: FARMÁCIA COMPONENTE CURRICULAR: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coloração do esfregaço sanguíneo NATHÁLIA CARTAXO FURTADO • Análise da morfologia é essencial para o diagnóstico EXTENSÃO SANGUÍNEA EXTENSÃO SANGUÍNEA EXTENSÃO SANGUÍNEA • Corantes do Tipo Romanovsky • São misturas que contem eosina e azul de metileno dissolvidos em metanol; • Na solução envelhecida (após dias do preparo do corante), o azul de metileno se oxida em gradações diferentes, originando os azures de metileno; • O corante de Romanowsky (neutros) é uma solução alcoólica de um complexo de eosinato de azul e azures de metileno • •A diferença entre os vários corantes derivados do corante primitivo de Romanowsky acha-se na proporção que se emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no método de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua combinação com a eosina Coloração sanguínea • Princípio da coloração • Os componentes Azures em sua forma de dímeros ligam-se a moléculas aniônicas, exemplo os grupos fosfato do DNA • •Os grupamentos ácidos dos ácidos nucleicos e proteínas do núcleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo corante básico Azul- de -Metileno Coloração sanguínea • Princípio da coloração • A eosina na forma de monômero se liga aos sítios catiônicos das proteínas • A presença de grupamentos básicos na molécula de Hb resulta na afinidade por corantes ácidos, corando-se pela eosina Coloração sanguínea • Coloração Ortocromática: a célula cora-se com a mesma cor do corante • Coloração Metacromática: a célula toma uma cor diferente daquela do corante • Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de Metileno são chamadas de basófilas (corando-se de azul) • Estruturas celulares que se coram pela Eosina são chamadas de acidófilas (corando-se em rosa) Nomenclatura usual • May-Grunwald ou Jenner, • •Giemsa • •Leishman • •Wright • (Podem ser encontrados, no comércio, na forma de reagentes ou em soluções já preparadas pelo fornecedor) Tipos de corantes de Romanovsky Como analisar o esfregaço? Campos de leitura na extensão sanguínea Corpo da extensão sanguínea Campos de leitura na extensão sanguínea Não deve ser feito contagem das células nesta região da extensão sanguínea (cabeça) Campos de leitura na extensão sanguínea Não deve ser feito contagem das células nesta região da extensão sanguínea (cauda) Contagem relativa dos leucócitos • É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula; A – Cerca de 25 células B- Cerca de 50 células Contagem relativa dos leucócitos Problemas na coloração •Presença de precipitados do corante na extensão sanguínea corada •Uso de lâminas sujas com gordura •Secagem durante o período de coloração •Lavagem inadequada ao término da coloração •Filtração inadequada dos corantes (vai aparecer os precipitados de corante) Precipitados de corantes Coloração inapropiada (COSEAC – HUAP – UFF – 2009). As opções abaixo apresentam os métodos mais frequentes de coloração usados em hematologia, EXCETO: • A) Método de May-Grünwald. • B) Método de Giemsa. • C) Método de Gram. • D) Método de Wright. • E) Método de Leishman.
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