E book l PRF e Stick bone

Prévia do material em texto

Volume 10
por Leonel Alves de Oliveira, Marco Antônio Brandão Pontual,
Eduardo Rêgo Barros e Moira Pedroso Leão
Do L-PRF ao Stick Bone™ – opções terapêuticas na 
Implantodontia usando concentrados plaquetários
Apresenta
10
10
APRESENTAÇÃO
Esta é uma história de evolução: muitas vezes, a ideia é boa, mas o seu desenvolvimento não fornece os resultados esperados. 
Então, parece que estamos navegando em águas misteriosas, embora com farol perto para conduzir o barco em segurança. 
Nós sabemos que durante o processo de reparo, o organismo humano se vale dos fatores de crescimento. Então, por 
que não colocar toda a pólvora no mesmo canhão e fazer a bala voar mais longe? Por que não concentrar esses fatores 
e propiciar um “boost”? Ah, sim, o segredo estava em manter os efeitos da bala pelo maior tempo possível, mas poucos 
se deram conta ou não sabiam como fazer. Muitos quase chegaram lá, mas os protocolos de obtenção eram demorados. 
Até agora.
Começamos com o PRP, e, depois de 20 anos, evoluímos para o PRF. Um concentrado rico em plaquetas e leucócitos, 
no qual a malha de fibrina funciona como arcabouço para liberação lenta dos fatores de crescimento e inflamatórios 
contidos nesses elementos.
Os primeiros resultados já são visíveis: a qualidade do tecido mole realmente pode mudar, quer seja no reparo das 
feridas periodontais ou da pele!
E nessas águas, nossos autores não são marinheiros de primeira viagem: o convés do barco PRF conta com a experiência 
dos Professores Leonel de Oliveira, Marco Pontual e Eduardo Rego Barros, amantes da natureza marinha e exímios 
cartógrafos da navegação cirúrgica, sempre supervisionados pela experiente capitã, Professora Moira Leão, uma grande 
cientista das células-tronco e participante da companhia marítima odontológica nacional.
Brincadeiras à parte, neste e-book, o leitor terá uma ideia do que se pode fazer com o PRF de A a Z, chegando ao seu 
desenvolvimento mais recente: a combinação com osso particulado.
Enfim, o sonho do material injetável 100% autólogo toma vida para beneficiar nossos pacientes. 
Portanto, vamos içar nossas suas velas para alcançar mares nunca antes navegados!
Boa leitura!
Paulo Rossetti
Editor científico de Implantodontia
da ImplantNewsPerio
Antonio W. Sallum
Editor científico de Periodontia
da ImplantNewsPerio
3
10
Autores
Marco Antônio Brandão Pontual
Graduado em Odontologia – Universidade 
Federal do Espírito Santo (Ufes); Mestre em 
Reabilitação Oral – Faculdade de Odontologia 
de Bauru da Universidade de São Paulo (USP); 
Doutor em Implantodontia – Universidade Federal 
de Santa Catarina (UFSC); Pós-doutorando em 
Odontologia – Universidade Federal Fluminense 
(UFF); Master in Esthetic Implant Dentistry, 
University of Bern, Switzerland; International 
Member of the American Academy of 
Periodontology, Chicago, IL, EUA; Membro da 
Academia Brasileira de Odontologia; Professor 
associado IV e coordenador de Implantodontia 
– Universidade Federal do Espírito Santo.
Leonel Alves de Oliveira
Graduado em Biologia – Centro Universitário de 
Brasília (UniCEUB); Graduado em Odontologia 
– Faculdades Integradas do Planalto Central 
(Faciplac); Especialista em Implantodontia – 
Universidade do Norte de Minas (Funorte); Mestre 
em Bioquímica – Universidade de Brasília (UnB); 
Doutorando em Ciências Médicas – UnB; Professor 
colaborador e pesquisador associado da Área 
de Morfologia – Faculdade de Medicina – UnB; 
Assessor técnico suplente do Conselho Federal 
de Odontologia para assuntos relativos a sangue, 
células-tronco, tecidos e derivados; Representante 
do CFO junto à Agência Nacional de Vigilância 
Sanitária (Anvisa) na comissão de Biovigilância.
Moira Pedroso Leão
Graduada em Odontologia – Universidade 
Estadual de Ponta Grossa (UEPG); Especialista 
em Prótese Dentária – Associação Brasileira de 
Odontologia (ABO/R); Especialista em Saúde 
Coletiva – Universidade Positivo (UP/PR); Mestre 
e doutora em Implantodontia – Universidade 
Federal de Santa Catarina (UFSC); Professora titular 
e pesquisadora – Universidade Positivo; Diretora 
administrativa do Centro de Tecnologia Celular 
Curityba Biotech; Assessora técnica do Conselho 
Federal de Odontologia para assuntos relativos 
a sangue, células-tronco, tecidos e derivados; 
Membro da Câmara de Assessoramento Técnico 
em Terapia Celular junto à Agência Nacional de 
Vigilância Sanitária (Anvisa); Representante do 
CFO junto à Anvisa na comissão de Biovigilância.
Eduardo Rego Barros
Graduado em Odontologia – Universidade 
Gama Filho (UGF); Especialista em Periodontia – 
Universidade de Nova Iguaçú (Unig); Especialista 
em Implantodontia – Fundação Técnico-
Educacional Souza Marques; Especialista em 
Radiologia – Universidade Grande Rio (Unigranrio).
4
10
capítulo1
Do L-PRF ao Stick Bone™ – opções terapêuticas na 
Implantodontia usando concentrados plaquetários
5
10
Introdução
Sticky Bone™ é uma marca registrada e refere-se a um compósito 
obtido pela mistura de osso particulado com uma matriz polimerizável 
de fibrina autóloga ainda em fase líquida. O termo em inglês significa 
“osso pegajoso”, ou em melhor adaptação à nossa vernácula, “osso 
em matriz pegajosa”1.
Esta matriz de fibrina em fase líquida pode ser obtida sem inter-
venção química na cascata de coagulação, apenas promovendo seu 
retardamento por não ativação2-3, o que torna sua metodologia muito 
distinta do plasma rico em plaquetas (PRP)4. Sua obtenção deriva do 
método de preparo da fibrina rica em plaquetas (FRP)5, que é uma 
matriz leucoplaquetária por também adicionar alta concentração de 
leucócitos mononucleares em sua composição6.
Este agregado sanguíneo – baseado na fisiologia da hemostasia 
e seu emprego como adjuvante nos mecanismos de reparo tecidual7 
– tem conquistado adeptos no campo da Implantodontia e da Reabili-
tação oral, cujos resultados clínicos são fortalecidos por uma grande 
casuística de sucesso e crescente produção científica6,8-9.
Como o coágulo sanguíneo natural é o adjuvante da neoformação 
óssea, existem evidências de uma resposta angiogênica e reparadora 
otimizada10 com o uso de um coágulo potencializado por concentrar 
uma rede de fibrina mais densa, enriquecida por glicoproteínas 
adesivas, alta concentração de plaquetas, micropartículas circulantes 
e leucócitos mononucleares11-12 (Figura 1). 
Os processos reconstrutivos por meio de enxertias ósseas torna-
ram-se procedimentos muito comuns na prática odontológica por 
proverem um arcabouço rígido, mineralizado e de lenta reabsorção13 
que em sinergismo com os elementos sanguíneos criam um microam-
biente ideal para a neovasculogênese e a acomodação de células 
indiferenciadas14 orquestrantes da neoformação óssea15.
É comum utilizar-se na prática cirúrgica a técnica da descorticali-
zação para aumentar a irrigação sanguínea do enxerto e a exposição, 
por contato, com o endósteo e o sítio base de células-tronco, a medula 
óssea14.
Considerando que as reconstruções ósseas são importantes 
artifícios reabilitadores estéticos e funcionais do complexo bucomaxi-
lofacial16, conhecer a ultraestrutura da relação dos substitutos ósseos 
com o sangue humano pode auxiliar a compreensão das relações 
celulares e biomoleculares da neoformação tecidual17-18.
Este capítulo apresenta, à luz da microscopia eletrônica de 
varredura (MEV), a caracterização da malha de fibrina19 leucoplaque-
tária autóloga em sua associação com substituto ósseo particulado 
configurando uma potencial aplicação terapêutica em reconstruções 
ósseas1.
Fundamentos biológicos
A fibrina é uma proteína que se forma pela clivagem do fibrinogênio, 
convertendo-o em monômeros de fibrina e posterior rearranjo molecular 
em polímeros por ligações peptídicas específicas e funcionais dando 
origem a fibrilas de fibrina17-19.
Figura 1 – Micrografiaobtida 
por microscopia eletrônica de 
varredura (MEV) da fração do 
pelet leucoplaquetário (faixa de 
transição entre o sobrenadante 
e o hemossedimento). Aumento 
de 3.000 vezes. Evidência da 
alta concentração leucocitária e 
plaquetária, bem como de sua 
preservação estrutural. A imagem 
ilustra ainda a íntima associação 
das plaquetas com a superfície 
dos leucócitos por forte adesão.
6
10
Várias outras proteínas plasmáticas como glicoproteínas, albumina e 
imunoglobulinas se ligam especificamente à rede de fibrina conferindo-lhe 
maior resistência mecânica, elasticidade e intensa atividade adesiva17,20.
Ela atua no leito dos tecidos lesados como um arcabouço tridi-
mensional constituinte do coágulo sanguíneo, cuja ação é prover a 
hemostasia21, bem como a migração e a adesão celular18-19. Deste modo, 
forma um microambiente favorável e funcional à acomodação celular 
para reorganização tissular22-24 (Figuras 2).
Há uma grande importância na estrutura da malha de fibrina e sua 
interação com glicoproteínas adesivas do plasma, como fibronectina 
e vitronectina, que dando suporte estrutural à rede confere-lhe uma 
arquitetura mimética a uma autêntica matriz extracelular de tecido 
conectivo25. Nesta, células migratórias como fibroblastos, células-tronco 
mesenquimais e outras mononucleares migram e modulam favoravel-
mente os eventos reconstrutivos e angiogênicos nos leitos lesados pela 
ação conjunta dos fatores de crescimento (FsC) presentes na malha24,26-27. 
A angiogênese, fundamental nos processos reparadores, é 
especialmente dependente dos FsC oriundos da degranulação 
dos α-grânulos plaquetários28-30. Os FsC dependem da matriz 
de fibrina, como arcabouço de suporte e proteção proteolítica24. 
Eles se desprendem da malha de fibrina de forma lenta e gradual, 
acompanhando a fibrinólise6,18,24. 
O contato da matriz de fibrina com a superfície das células 
endoteliais representa o principal sítio iniciador da fibrinólise. Por 
isto, a neoformação vascular em área lesada tem seu início no leito 
da própria matriz de fibrina10. Também está associada à migração de 
fibroblastos, síntese de colágeno e reconstrução de nova matriz por 
substituição. Ou seja, a fibrinólise gera o espaço para a ocupação 
da nova matriz de colágeno e a angiogênese31.
Além dos FsC, oriundos dos grânulos alfa, as plaquetas possuem 
também os grânulos densos cujo conteúdo exocitado corrobora com 
sua diversidade biológica funcional32-33 (Tabela 1).
Figura 2a – Coágulo de fibrina 
em dimensão macroscópica. 
Figura 2b – Membrana de fibrina leucoplaquetária autóloga com ampliação por 
microscopia eletrônica de varredura (MEV) em distintas porções. Fração superior 
(densa rede de fibrina). Meio do coágulo (leucócitos e plaquetas capturados) e 
pelet leucoplaquetário (alta concentração de plaquetas ativadas e mononucleares).
A B
7
10
Os principais fatores de crescimento angiogênicos são: fator 
de crescimento do endotélio vascular (VEGF), fator de crescimento 
derivado de plaquetas (PDGF) e fator de crescimento fibroblástico 
básico (FGFb)29,34.
Cada tipo de fator de crescimento, na verdade, representa um 
grupo com vários peptídeos que atuam de modo sinérgico sobre 
determinada resposta celular33,35-36. Deste modo, a sinalização celular 
não ocorre em única via estimuladora proliferativa, mas em vias 
moduladoras, onde há controle estimulador e inibidor na neoformação 
vascular e tecidual36-37. 
Como as plaquetas são as responsáveis diretas pela liberação 
das famílias VEGF, PDGF e FGFb, existem evidências de precocidade 
angiogênica nos leitos cirúrgicos enxertados e de sua viabilidade pela 
aplicação concomitante de agregados plaquetários não transfusionais, 
cujas concentrações superam a concentração natural de um coágulo 
de sangue total32,37-38.
Agregados plaquetários e leucoplaquetários
Os principais tipos de agregados plaquetários não transfusionais 
que apresentam índices significativos de sucesso terapêutico são 
o PRP39 e a FRP40. São produtos sanguíneos autólogos obtidos por 
sedimentação sanguínea com fracionamento seletivo5,41.
Plasma rico em plaquetas (PRP)
O PRP tornou-se bastante popular no Brasil nos anos 2000, especial-
mente devido às publicações de Robert Marx42 e Eduardo Anitua4. Entre-
tanto, os primeiros trabalhos sobre o uso não transfusional do sangue em 
agregados de plaquetas e adesivos de fibrina datam da década de 1970 
pelos estudos de Matras e colaboradores43. Antes mesmo das considerações 
sobre seu potencial terapêutico, era utilizado em experimentação laboratorial 
para estudos de coagulação e função plaquetária. Os estudos de Chao 
et al., 1976, descreveram a composição microtubular plaquetária e sua 
influência na retração do coágulo44. Deste modo, sua evolução alcançou 
seu ápice terapêutico com os trabalhos de Marx42.
O PRP é obtido por bloqueio à coagulação, em geral pelo sequestro 
do cálcio, por meio da ação quelante do citrato de sódio, ou mesmo 
por uma ação de inibição enzimática, como é o caso da heparina. 
Quando do uso de substâncias quelantes, uma vez devolvido o cálcio, 
adicionando-se substâncias como o cloreto de cálcio ou gluconato de 
cálcio, pode-se viabilizar a polimerização da fibrina que resultará em 
um produto na forma de gel. Substâncias como a trombina humana ou 
bovina também são comumente adicionadas para promover a ativação 
do coágulo de forma mais rápida e previsível6,39,45-46. 
Entretanto, a interrupção/aceleração no processo de coagulação/
polimerização da fibrina favorece as ligações poliméricas do tipo laterais 
e bilaterais que são mais fracas do que as ligações equilaterais obtidas 
quando o processo ocorre de forma mais lenta e fisiológica11,18,47. As 
junções equilaterais ligam três fibrilas de cadeia dupla e conferem 
mais resistência mecânica à rede de fibrina18,48.
TABELA 1 – CONTEÚDO DOS α-GRÂNULOS PLAQUETÁRIOS
CLASSIFICAÇÃO Metabólitos
Agentes fibrinolíticos α2-macroglobulina e plasminogênio
Fatores da coagulação Fator V, Fator VIII e multimerina
Fatores de crescimento e angiogênicos FGFa, FGFb, EGF, HGF, IGF1, TGFß1, VEGF-A, VEGF-C, PDGF
Imunomoduladores ß1H Globulina, Fator D, IgG e C1 inibidor
Moléculas de adesão P-Selectina - CD62, Fator de von Willebrand, Trombospondina, Fibrinogênio, Integrina allbß3, integrina avß3 e Fibronectina
Outras proteínas Albumina, α1-antitripsina, Gas6, Glicoproteína rica em histidina, Quininogênio de alto peso molecular, osteonectina, protease nexina-ll
Quimiocinas Proteínas plaquetárias básicas, Fator4 e ß-tromboglobulina , IL-8, EVA-78, CCL-3, CCL-5, CCL-7, CCL-17, CXCL1, CXCL5.
Adaptado de Platelets 2nd Edition 2007. Academic Press. Alan D Michelson.
8
10
O PRP apresenta-se como um gel de fibrina impregnado de fatores 
de crescimento49. Estes são intensamente liberados após sua aplicação 
em leito cirúrgico50. Este agregado é isento da presença de leucócitos, 
devido à metodologia empregada para sua obtenção. 
Algumas características marcam este produto: a) a intervenção 
de um anticoagulante, interrompendo o processo natural da coagu-
lação sanguínea; b) o duplo processo de centrifugação, submetendo 
o sangue a uma dupla agressão; c) a extração plasmática seletiva faz 
do PRP um processo de sensível metodologia51-52. 
As muitas variáveis dos protocolos de obtenção do PRP, princi-
palmente em relação à força centrífuga relativa aplicada sobre as 
amostras, levaram à obtenção de resultados também muito variados. 
Muito embora ainda existam possibilidades clínicas de utilização 
do PRP, estas ficaram bastante reduzidas em função do domínio de 
técnicas mais seguras, além do fato da técnica necessitar da adição 
de anticoagulantes e pró-coagulantes que atuam como interferentes 
químicos na coagulação39,53. 
Do ponto de vista sanitário, há uma preocupação quanto à metodo-
logia de obtenção do PRP.O protocolo clássico de obtenção deste 
agregado plaquetário recomenda a realização de duas centrifugações, 
porém, quando da separação entre a porção do sobrenadante (plasma 
+ plaquetas) e a porção eritrocitária é importante ater-se à forma como 
a coleta está sendo realizada, pois a escolha do recipiente determinará 
se o processamento poderá ser feito integralmente em consultório ou 
deverá ser realizado em um Centro de Tecnologia Celular (CTC). Se o 
sangue total for coletado em bolsas ou kits especiais para esta função, 
esta separação se dará em “ambiente” fechado, pois as bolsas ou partes 
do kit se comunicam internamente, portanto, não há contato com o 
ar. Já quando a coleta é feita em tubos de coleta sanguínea, haverá 
a necessidade de transferência da porção sobrenadante para outro 
tubo seco antes de se fazer a segunda centrifugação. No momento da 
transferência de um tubo para outro poderá haver a contaminação do 
agregado plaquetário, constituindo-se um risco biológico/sanitário. 
Por esta razão, a orientação da Anvisa nesta situação, ratificada pela 
resolução CFO-158/2015, recomenda que o processamento do sangue 
para obtenção do PRP, quando da adoção de metodologias em que a 
manipulação seja feita pela técnica aberta (coleta em tubos e realização de 
dupla centrifugação), o processamento deve ser realizado exclusivamente 
em Centros de Tecnologia Celular. Entretanto, se o processamento do 
sangue não utilizar a técnica aberta (coleta em bolsas + centrifugação 
única ou dupla ou coleta em tubos + centrifugação única) poderá ser 
realizado em consultório ou em centro cirúrgico54. É importante não 
confundir processamento do sangue com a ativação da coagulação. 
Mesmo o processamento sendo realizado em um Centro de Tecnologia 
Celular, onde há cabines de segurança biológica que garantem um ar 
ultrafiltrado durante o processo de transferência das porções sanguíneas 
de um tubo para outro, a ativação da coagulação (devolução do cálcio 
ou utilização de trombina) pode ser feita no momento do ato cirúrgico, 
em consultório ou em centro cirúrgico55. 
Fibrina rica em plaquetas (FRP)
A FRP tornou-se, conceitualmente, um substituto natural ao PRP, 
aumentando sua utilização em cirurgias do complexo bucomaxilo-
facial nos últimos anos6,56. Os principais aspectos que lhe confere tal 
superioridade biológica são a organização estrutural mais densa da 
rede de fibrina, a liberação lenta dos FsC7,11,57, a presença de leucócitos 
mononucleares41, o maior aproveitamento do volume sobrenadante e a 
incorporação de micropartículas circulantes e glicoproteínas adesivas11. 
A fração de mononucleares agrega um vasto arsenal biológico à 
FRP. Conta com células-tronco circulantes em baixa concentração (< 
0,01%)58-60, bem como FsC leucocitários como o fator de crescimento 
transformante beta (TGFß)35,61 em sua composição.
O termo fibrina rica em plaquetas (FRP) é a tradução literal do 
inglês platelet-rich fibrin (PRF). Neste agregado, após a formação 
do coágulo, o resíduo líquido residual é o soro sanguíneo. No PRP, 
o líquido sobrenadante contém as frações de plasma rico e plasma 
pobre em plaquetas (PPP)62.
O plasma sanguíneo é a fração líquida do sangue em seu estado 
funcional. Ou seja, líquido, anticoagulado e circulante. Para obter 
plasma em fração sanguínea extravascular é imperativo o uso de 
anticoagulantes2,63. 
O sangue total uma vez coagulado, sua fração líquida residual 
chama-se soro, pois é desprovida dos fatores da coagulação em 
quiescência64. Deste modo, ao obtermos FRP (agregado plaquetário 
coletado em recipiente sem anticoagulantes), o líquido residual obtido 
após a retração do coágulo não deve ser denominado de plasma pobre 
em plaquetas (PPP)5-6,65, mas de soro sanguíneo. 
9
10
A FRP é concebida como uma matriz de fibrina leucoplaquetária, e não 
meramente plaquetária66. Trata-se de um coágulo natural e potencializado 
formado por sedimentação sob força centrífuga relativa (FCR), ou força g, de 
baixa magnitude, em sistema fechado e única etapa de centrifugação5,56,67. 
Sua obtenção por venopunção a vácuo5, sem adição química e 
em meio estéril serviu para caracterizar o método como exequível, 
reprodutível, com baixo custo e mínima complexidade técnica68. 
Choukroun et al, 2001, propuseram o método PRF Choukroun 
Process™5,69 para obtenção de FRP baseado no uso de tubos à vácuo 
secos estéreis destinados para diagnóstico in vitro e em centrífuga 
de bancada com rotor de ângulo fixo. Neste método, inicialmente, os 
autores utilizaram tubo de vidro que posteriormente foi substituído 
por tubo plástico com óxido de silício (SiO2) pulverizado no interior 
com ativador de coágulo70-71.
Dohan et al, 200948, propuseram uma classificação nominal dos 
agregados sanguíneos definindo-os de acordo com sua composição 
e organização molecular da rede de fibrina. Isto gerou a popularização 
de acrônimos denominativos. Especialmente PRF e L-PRF (Tabela 2).
Na evolução dos métodos de obtenção de agregados plaquetários, 
novos conceitos metodológicos autorais foram sendo consolidados a 
partir do PRF Choukroun Process™. O método Intraspin L-PRF™ “Leukocyte – 
platelet rich fibrin” pela composição leucoplaquetária, o A-PRF™ “Advanced 
– platelet rich fibrin” pelo conceito da aplicação de força centrífuga 
reduzida gerada pela baixa rotação50, o i-PRF™ “Injectable – platelet rich 
fibrin” pela obtenção de uma forma injetável do agregado sanguíneo3, 
o CGF™ “Concentrated growth factors”48,72 pela variação de velocidades 
durante a centrifugação e conteúdo de células indiferenciadas CD34+ e 
o método Fibrin System® pela obtenção conjunta de coágulos de fibrina 
e fibrina em fase líquida73. Todos estes métodos apresentam variações e 
especificidades metodológicas. Entretanto, todos apresentam aspectos 
clínicos favoráveis ao reparo tecidual.
Os principais pontos de distinção entre estes métodos são os 
intervalos de tempo, a FRC, os tipos de tubos utilizados e até mesmo o 
equipamento para centrifugação69,72. Apesar de suas particularidades 
técnicas, todos os métodos se destinam à obtenção de uma matriz 
de fibrina isenta de hemácias, com concentração aumentada de 
leucócitos e plaquetas por volume de coágulo e para aplicação em 
caráter exclusivamente autólogo e não transfusional40,48. 
TABELA 2 – PROPOSIÇÃO NOMINATIVA DOS AGREGADOS PLAQUETÁRIOS E LEUCOPLAQUETÁRIOS
AGREGADO 
PLAQUETÁRIO NOMENCLATURA PROTOCOLOS MÉTODO
CONCENTRAÇÃO 
PLAQUETÁRIA
DENSIDADE DA 
FIBRINA
PRESERVAÇÃO 
PLAQUETÁRIA
P-PRP Plasma rico em plaquetas puro Cell Separator Automatizado Excelente Baixa Danificada
Vivostat-PRF Automatizado Baixa Baixa Danificada
Anitua´s-PRGF Manual Baixa Baixa -
Nahita PRP Manual Baixa Baixa -
L-PRP Plasma rico em plaquetas e leucócitos PCCS PRP Automatizado Boa Baixa -
SmartPreP PRP Automatizado Boa Baixa -
Margellan PRP Automatizado Boa Baixa -
GPS PRP Automatizado Boa Baixa -
Friadent Manual Boa Baixa -
Curasan Manual Boa Baixa -
Regen Manual Boa Baixa -
Plateltex Manual Boa Baixa -
ACE PRP Manual Boa Baixa -
P-PRF Fibrina rica em plaquetas pura Fibrinet PRFM Manual Boa Alta
Íntegra e 
ativada
L-PRF* Fibrina rica em plaquetas e leucócitos
Fibrin System
PRF Choukroun Process
Intraspin L-PRF
Manual Excelente Alta Íntegra e ativada
Adaptado de Dohan Ehrenfest et al, 2006. (*) Único produto sem intervenção anticoagulante.
10
10
As siglas representam o produto biológico que é de domínio 
público6,48. Entretanto, o método de obtenção e sua respectiva marca 
comercial são de propriedade privada30,51. 
Por tal razão, a fim de respeitar a coerência biológica na nomen-
clatura dos agregados sanguíneos e primar por sua autodefinição, 
sugerimos o termo fibrina leucoplaquetária autóloga74-75. Esta nomen-
clatura visa enobrecer o domínio público, não se limita a metodologias 
autoraisespecíficas, se aplica a possíveis evoluções, insere uma 
classificação generalista e traz em sua essência o princípio de uma 
denominação autoexplicativa já muito comum nas ciências biológicas. 
Deste modo, a fibrina leucoplaquetária autóloga não representa outro 
tipo de produto e nem exclui nenhum dos métodos supracitados74-75. 
Outros termos muito comuns associados a esta matriz de fibrina são: 
agregados plaquetários, agregados leucoplaquetários, agregados 
sanguíneos e biomateriais de fibrina.
A fibrina em fase líquida
A exequibilidade do método é completamente dependente dos 
insumos utilizados, tais como tubos, agulhas e centrífuga75. A fibrina 
em fase líquida pode assim ser denominada por tratar-se de um 
sobrenadante sanguíneo pós-centrifugação que mantém-se em estado 
líquido sem que tenha havido intervenção química anticoagulante42. 
Trata-se, portanto, de um mero retardamento na formação do coágulo3. 
Neste método, a coagulação depende essencialmente dos próprios 
elementos intrínsecos do sangue53. 
Tubos e ativação do coágulo
Na dinâmica do laboratório de análises clínicas, a precocidade na 
formação do coágulo é fundamental para garantir a eficiência opera-
cional da demanda clínica. Por esta razão, os tubos utilizados para 
obtenção de espécimes para sorologia devem promover aceleração 
na formação do coágulo2,76. 
Os tubos para coleta sanguínea à vácuo para sorologia foram 
idealizados por Joseph Kleiner e Becton Dickinson em 1949. Inicial-
mente, eram apenas os tubos de vidro. A superfície do vidro acelera 
a coagulação pela ativação do fator XII da coagulação77.
O arranjo molecular do vidro proporciona um material altamente 
denso, o que favorece a eficiência e a durabilidade do vácuo2,53. Entre-
tanto, seu uso aumenta os riscos ocupacionais do laboratorista pela 
fragilidade e vulnerabilidade à quebra76. Recentemente, nos Estados 
Unidos da América, os tubos plásticos (polietileno, polipropileno e 
poliestireno) substituíram os tubos de vidro por normatização da 
Occupational Safety and Health Administration (OSHA). Entretanto, os 
tubos plásticos não oferecem a superfície hidrofílica oxidante capaz de 
ativar o fator XII da coagulação. Deste modo, foram inseridos silicatos 
como ativadores de coágulo impregnados em sua superfície interna70,78, 
gerando os conhecidos tubos com ativador de coágulo (Figuras 3).
Alguns tubos plásticos isentos de sílica destinam-se a aplicações 
diagnósticas especiais, por exemplo, a triagem de elementos traço e 
metais pesados. São tubos plásticos à vácuo, estéreis, secos e isentos 
de anticoagulante ou pró-coagulante53. A isenção de SiO2 não bloqueia 
a coagulação, mas a retarda sobremaneira, fornecendo ao final do 
ciclo de centrifugação um agregado sanguíneo sobrenadante rico 
em fibrinogênio ativado, mas ainda em fase líquida3,79. 
Figuras 3 – Tubos com e sem ativador 
de coágulo. A. Tubo plástico sem 
aditivo. B. Tubo com ativador de coágulo 
pulverizado na parede interna do tubo.
Foto: Prof. Marcelo Gaspar.
A B
11
10
Como a fibrina é uma proteína insolúvel formada por polimerização 
de monômeros, é inconcebível a existência e a denominação de fibrina 
líquida. Por tal razão, é tecnicamente coerente denominá-la fibrina em 
fase líquida, por tratar-se de um estágio precedente à forma polimerizada, 
mas com lenta e irreversível ativação polimérica do fibrinogênio75,80.
Este princípio de retardamento na formação do coágulo provê 
uma importante estratégia de manipulação deste agregado sanguíneo 
para aplicações clínicas, tanto na aglutinação de biomateriais1, como 
a forma injetável3,80. 
Coleta sanguínea
A coleção sanguínea para obtenção de agregados leucoplaque-
tários autólogos para uso não transfusional no âmbito da Odontologia 
pode ser realizada pelo cirurgião-dentista em território brasileiro. Tal 
prática está regulamentada pela resolução 158/2015 do Conselho 
Federal de Odontologia54,66. 
A coleta sanguínea para a obtenção de fibrina leucoplaquetária 
possui algumas particularidades que a difere da coleção sanguínea 
comumente realizada para fins diagnósticos em laboratórios de 
análises clínicas e hospitais81. 
O tempo demandado para realização da coleta é um ponto crítico 
no método. Este deve ser minimizado por adequada eficiência e 
manejo dos insumos69. 
No laboratório de análises clínicas, a precocidade da formação do 
coágulo é um ponto favorável para as análises sorológicas81. Para o uso 
na Odontologia, a minimização do tempo que precede a centrifugação 
é fundamental para que a malha de fibrina se forme apenas durante 
a centrifugação e na ausência das hemácias75. Coágulos diminutos e 
impregnados de hemácias denunciam este detalhe metodológico69.
Uma vez que o sangue entra em contato com a parede do tubo, o 
fator XII já é ativado por oxidação. O fator XII, também conhecido como 
fator de Hageman, é uma proteína plasmática que se torna ativada 
pelo contato com estruturas aniônicas, carregadas negativamente, 
como por exemplo o SiO2 dos tubos de coleção sanguínea76.
O impacto do fluxo sanguíneo gerado pela sucção à vácuo pode 
provocar ruptura plaquetária e, consequentemente, maior concentração 
de cálcio, ativando precocemente o fator II da coagulação82. Deste modo, 
a coagulação inicia com a entrada do sangue no tubo. Quanto mais 
intensa a FCR aplicada, maior o nível de ruptura plaquetária. Por tal 
razão, os métodos de obtenção de PRP que primam pela integridade 
plaquetária, utilizam, com exclusividade, centrífugas com rotor bascu-
lante para evitar o impacto plaquetário com a parede dos tubos55,83. 
Outro aspecto que pode causar precocidade na formação do 
coágulo e consequente comprometimento da técnica é a lesão endotelial 
durante a coleta53. A pressão negativa do vácuo, na ponta da agulha, 
pode agredir o endotélio expondo o colágeno subendotelial e demais 
fatores extrínsecos como o colágeno, o fator de von Willebrand e o 
fator tecidual (tromboplastina tecidual)53. Neste caso, a formação do 
coágulo se torna muito precoce21,76. A execução da coleta deve ser 
minimamente traumática por eleição de veia volumosa e superficial, 
preferencialmente da fossa antecubital64 (Figura 4).
Centrífugas e centrifugação
A centrifugação é uma metodologia utilizada para acelerar a 
sedimentação do sangue84-85. A própria ação gravitacional terrestre 
é suficiente para sedimentar os elementos sanguíneos mais densos. 
Entretanto, a formação do coágulo no interior dos tubos ocorre mais 
precocemente do que a sedimentação espontânea21. Deste modo, a 
formação da rede de fibrina ocorre na presença das hemáceas, formando 
um coágulo de sangue total e não um coágulo de fibrina (Tabela 3).
Na obtenção dos coágulos de fibrina leucoplaquetária é imperioso 
que a sedimentação das hemácias ocorra antes da formação do coágulo82. 
Figura 4 – Veias antecubitais. 1. Cefálica. 
2. Intermédia cubital. 3. Basílica. 
12
10
O movimento angular em uma centrífuga amplifica a força gravi-
tacional, gerando uma FCR, que é uma unidade de aceleração definida 
como 9,806 m/s², o que é aproximadamente igual à aceleração devida 
à gravidade na superfície da Terra. Uma FCR de 300 significa dizer que 
esta força é 300 vezes mais forte que a força gravitacional85. 
A velocidade da força angular, medida em rotações por minutos 
(RPM), é diretamente proporcional à força g, da mesma forma, o raio (r) 
do rotor da centrífuga (distância do eixo de rotação até o ponto central 
do tubo) também é diretamente proporcional à força g. Deste modo, 
quanto maiores a velocidade e o raio, maior será a força empregada 
sobre o espécime. A correlação entre RPM, raio e força g pode ser 
obtida pela equação: FCR ou Força g = 1,12 x r x (RPM/1000)².
Para ser reprodutível, qualquer metodologia de obtenção dos 
agregados plaquetários deve ser descrita em função de FCR por intervalode tempo. Pois quando em função de RPM limita-se a uma identidade 
de raio e angulação do rotor, ou seja, cria-se uma especificidade quanto 
ao modelo da centrífuga, gerando a equivocada conclusão de que o 
equipamento é ponto fundamental do processo24,69.
A mesma FCR pode ser obtida em máquinas distintas com o devido 
ajuste de cálculo85. Deste modo, apesar de não ser exclusivista, carac-
terísticas como nível de vibração e aquecimento são pontos críticos na 
escolha do equipamento quando se visa a preservação das propriedades 
biológicas dos agregados sanguíneos para aplicações clínicas69. 
Angulações distintas do rotor da centrífuga influenciam nas 
dimensões do coágulo de fibrina, e são determinantes na distribuição 
celular do pelet leucoplaquetário69 (Figuras 5 e 6; Tabela 4).
TABELA 3 – DENSIDADE DOS COMPONENTES SANGUÍNEOS
COMPOSTO SANGUÍNEO DENSIDADE (g/cm³)
Plasma 1,020
Plaquetas 1,040
Mononucleares 1,060
Polimorfonucleares 1,085
Eritrócitos 1,095
Adaptado de Platelets 2nd Edition 2007. Academic Press. Alan D Michelson.
Figura 5 – Centrífugas de 
bancada. Fibrinfuge25® Montserrat. 
Centrífuga com rotor de 25º 
desenvolvida para obtenção de 
fbrina leucoplaquetária autóloga.
EBA200 Hettich. Novo modelo da 
EBA20 Hettich indicada originalmente 
para obtenção da fibrina rica em 
plaquetas pelos métodos PRF 
Choukroun Process™ e Intraspin LPRF™.
Figura 6 – Membranas de fibrina 
obtidas por centrifugação em 
rotores com diferentes angulações. 
A. 25°. B. 33°. C. 45°.
A
B C
13
10
Obtenção do compósito mineralizado em matriz de fibrina
A nomenclatura empregada neste manuscrito pretende valorizar 
o seu aspecto morfofuncional e não meramente metodológico ou 
autoral. Chamamos este aglutinado de compósito mineralizado em 
matriz de fibrina. Entretanto, outras nomenclaturas autorais associadas 
aos métodos de obtenção como Sticky Bone™, i-Bone, Steak Bone e 
PRF-Block™ apresentam o mesmo objetivo. 
Obtenção da fibrina em fase líquida
A centrifugação deve ser feita, preferencialmente, a 150 g/5min. 
Tão logo complete a centrifugação, o sobrenadante líquido deve ser 
aspirado e utilizado, pois o tempo de trabalho para emprego clínico 
é de aproximadamente 20 minutos. Para viabilizar a aglutinação do 
biomaterial utilizando-se a fibrina em fase líquida, é necessário retardar 
a coagulação com o uso imperativo de tubo plástico isento de sílica. 
Deste modo, obtém-se no final da centrifugação um sobrenadante 
líquido e polimerizável com tempo de trabalho suficiente para ser 
manipulado.
Variações metodológicas
Algumas variantes metodológicas podem afetar o tempo 
de trabalho reduzindo-o consideravelmente, como a adição de 
fragmentos de coágulo de fibrina. Esta estratégia além de aumentar 
o volume do material de enxerto, enriquece-o com conteúdo de 
fibrina mais densa.
A seguir seguem três possíveis variações e suas implicações:
1. Remove-se o sobrenadante imediatamente após a centrifugação 
com auxílio de pipeta plástica estéril e aplica-se sobre o biomaterial 
particulado para enxertia. Neste caso, como a polimerização se faz 
lentamente, o tempo demandado pode ser superior a 15 minutos.
2. Aplica-se o sobrenadante sobre o biomaterial em um recipiente porta 
enxerto de vidro. O contato com o vidro acelera a polimerização e o 
tempo é reduzido significativamente para cerca de cinco minutos.
3. Obtém-se um coágulo de fibrina, produzido prévia ou concomi-
tantemente, fragmentando-o em diminutas porções misturadas 
ao biomaterial. O soro drenado deste coágulo serve para hidratar 
o material de enxerto e o condiciona para receber a fibrina em 
fase líquida. Aplicando-a diretamente sobre este conjugado, a 
polimerização se faz instantaneamente, podendo o compósito 
ser completamente aglutinado em menos de um minuto.
Após o ciclo de centrifugação, o sobrenadante (fibrina em fase 
líquida) deve ser removido do tubo até o nível inferior do pelet leucopla-
quetário com o auxílio de uma pipeta Pasteur estéril e aplicada sobre o 
xenoenxerto, preferencialmente hidratado em soro sanguíneo (Figura 7).
Os fragmentos de fibrina – pelo seu alto potencial hemostático 
em função das plaquetas ativadas, micropartículas circulantes e rede 
rica em glicoproteínas adesivas – intensificam a polimerização do 
conteúdo líquido aglutinando as partículas do biomaterial em uma 
densa rede de fibrina.
TABELA 4 – CARACTERÍSTICAS DAS CENTRÍFUGAS DE BANCADA UTILIZADAS NA OBTENÇÃO DE AGREGADOS PLAQUETÁRIOS
MARCA MODELO ORIGEM TIPO RAIO CENTRAL (mm) ÂNGULO MOTOR G A 2000 RPM
Centribio 80-2B China Analógica 60 45° Escovas 268.32
Daiki DT4000 China Digital 60 45° Indução 268.32
DragonLab Duo China Digital 105 45° Indução 469.56
DragonLab A-PRF12 China Digital 105 45° Indução 469.56
DigiLab DSC-200A-2 China Analógica 106 45° Escovas 474.03
Hettich EBA20 Alemanha Digital 50 33° Indução 223.60
Hettich EBA200 Alemanha Digital 50 33° Indução 223.60
Intra-Lock Intraspin Alemanha Digital 50 33° Indução 223.60
Kasvi K14-0815 China Digital 48 36° Indução 214.66
Montserrat 80-2B China Analógica 60 45° Escovas 268.32
Montserrat Fibrinfuge25 China Digital 65 25° Indução 290.68
Ortoalresa Microcen23 Espanha Digital 91 30° Indução 406.95
Silfradent Medifuge200 Itália Digital 85 35° Indução 380.12
Spinlab Spinplus China Digital 78 45° Indução 348.82
Cálculo de FRC obtido pela Calculadora da força G do Grupo de Estudos Avançados em Agregados Plaquetários (Geacop) – <www.fibrina.com.br>. Diferentes RCFs ou forças G 
sendo geradas quando submetidas à mesma rotação.
14
10
A proposta metodológica do emprego de 150 g durante cinco 
minutos além de prover o aproveitamento do volume sanguíneo, 
aumenta a difusão sanguínea, ou seja, proteínas plasmáticas e células 
mononucleares presentes no fundo do tubo permeiam-se por entre as 
hemácias e direcionam-se para a região de interface entre hemácias e 
plaquetas, enriquecendo-a com maior concentração proteica e celular. 
É certo que uma força menor diminui a sedimentação, aumentando 
a concentração celular em suspensão no sobrenadante. Contudo, 
diminui o volume obtido. 
Nota técnica
Metodologia para obtenção de fibrina em fase líquida
1. Previamente à coleta, identificar os tubos com o nome do paciente 
e preparar todo material de coleta. 
2. Importante observar que:
• Este procedimento dispõe de curto intervalo de tempo para 
a realização, uma vez que a fibrina apresenta polimerização 
rápida após a ativação plaquetária. 
• A coleta deverá, preferencialmente, ser realizada ao final do 
transoperatório. 
3. Garrotear o braço e identificar a veia mais calibrosa para a 
venopunção, preferencialmente a veia intermédia antecubital.
4. Realizar antissepsia no local com swab de álcool 70%, único 
movimento ascendente. Não tocar o local após a antissepsia!
5. Introduzir a agulha do cateter agulhado com bizel voltado para 
cima, em angulação de 15º a 30º.
6. Apoiando-se no adaptador de agulhas, introduzir os tubos de 
plástico sem ativador de coágulo e aguardar o total preenchimento. 
No último tubo, retirá-lo e só depois remover a agulha comprimindo 
a veia puncionada com um rolete de algodão. Orientar o paciente 
a não dobrar o braço!
7. Levar os tubos à centrífuga imediatamente e submetê-lo à centri-
fugação de 150 g/5 min.
• A obtenção da fibrina em fase líquida para preparação de 
compósito mineralizado também pode ser feita anteriormente 
à cirurgia e neste caso a força de 200 g/10 min pode ser 
empregada sem prejuízos à concentração leucoplaquetária 
e viabilidade biológica. Deste modo, em única centrifugação 
obtém-se fibrina em fase líquida e os coágulos de fibrina. Este 
é um importante princípio metodológico do protocolo Fibrin 
System®. Neste caso, o preparo do biomaterial deve ser feito 
previamente ao preparo cirúrgico do leito receptor.8. Voltar ao paciente e aplicar o curativo.
9. Ao final da centrifugação, recolher os tubos e remover o sobrenadante 
de imediato utilizando pipeta Pasteur ou seringa plástica ou de vidro.
• Indicações
 – Aplicar sobre o biomaterial.
 – Coletar o sobrenadante com pipeta Pasteur ou seringa com 
agulha calibrosa e bizel voltado para o pelet leucoplaquetário.
 – Picotar um coágulo de fibrina e misturá-lo ao biomaterial.
 – Aplicar sobre o biomaterial, aguardar a polimerização e 
levar ao leito cirúrgico receptor.
 – Levar o biomaterial hidratado ao leito receptor, e in loco, 
aplicar a fibrina em fase líquida e aguardar a polimerização.
10. Ao final da etapa cirúrgica, aplicar a fibrina em fase líquida 
recobrindo o sítio cirúrgico de acordo com a aplicação.
Obs.: descarte do conteúdo sanguíneo residual.
• Aplicar gotas de hipoclorito no interior do tubo para reduzir 
a carga biológica e desprezar o material no esgoto comum. 
Caracterização morfológica
As imagens seguintes ilustram os aspectos microscópicos por 
microscopia óptica (MO) e eletrônica de varredura (MEV) do compósito 
mineralizado em matriz de fibrina obtidos pelo proposto estudo.
As micrografias por MEV foram obtidas no Laboratório de Micros-
copia e Microanálise do Instituto de Biologia da Universidade de Brasília 
e fazem parte do estudo de caracterização morfológica e bioquímica 
da fibrina leucoplaquetária autóloga (Figuras 8 a 14).
As figuras, pelo alto nível de resolução da MEV, demonstram 
a estrutura da matriz de fibrina obtida neste método associada à 
superfície do biomaterial osteocondutor. As imagens evidenciam ainda 
a manutenção da integridade celular e plaquetária e a significativa 
caracterização da impregnação dos poros do biomaterial com fibrilas 
de fibrina e micropartículas plaquetárias. Foi utilizada a centrífuga 
80-2B Montserrat para obtenção destes espécimes.
Ilustrações clínicas
Neste tópico, segue uma sequência da obtenção e utilização da 
fibrina em fase líquida na obtenção do Sticky Bone™ e acomodação 
em leito cirúrgico em aplicação na elevação do seio maxilar e em 
reconstrução de maxila atrófica (Figuras 15 a 17).
15
10
Figura 7 – Fibrina em fase líquida. Pipeta e 
captação do pelet leucoplaquetário.
Pipeta Estéril
Fibrina em Fase Líquida
Pelet Leucoplaquetário
Figura 8 – Sticky Bone. Aspecto macroscópico do 
biomaterial mineralizado Lumina Porous (Critéria, Brasil) 
impregnado com a matriz de fibrina. O compósito 
apresenta-se bem compactado, onde suas partículas 
estão completamente envoltas pela matriz de fibrina.
Figura 9 – Microscopia óptica do fragmento ósseo 
não descalcificado envolto pela matriz de fibrina 
leucoplaquetária autóloga. Método de coloração 
HE com aumento de 100 vezes. 1. Rede de 
fibrina leucoplaquetária. 2. Fragmento ósseo.
16
10
Figura 10 – Micrografia obtida por microscopia 
eletrônica de varredura (MEV) com aumento de 
750 vezes. Densa malha de fibrina com presença 
de plaquetas, alguns leucócitos e hemácias 
entremeadas na malha. Evidência de preservação 
da estrutura celular. Ao centro, um pequeno 
fragmento ósseo envolto pelas fibrilas de fibrina. 
Rede de fibrina com evidentes junções equilaterais 
revestindo a estrutura mineralizada neste campo.
Figura 11 – Micrografia obtida por microscopia 
eletrônica de varredura (MEV) com aumento 
de 1.100 vezes. Densa malha de fibrina 
cobrindo parcialmente o fragmento ósseo. 
A porosidade do material evidencia a 
penetração de fibrina em sua estrutura.
Figura 12 – Micrografia obtida por microscopia 
eletrônica de varredura (MEV) com aumento 
de 1.700 vezes. Densa malha de fibrina nas 
margens da imagem e ao centro a penetração 
da fibrina nos poros do biomaterial. Plaquetas 
ativadas e uma hemácia ao fundo com 
integridade morfológica evidenciada.
Figura 13 – Micrografia obtida por microscopia 
eletrônica de varredura (MEV) com aumento 
de 3.500 vezes. Densa malha de fibrina ao 
fundo e um pequeno fragmento de biomaterial 
“capturado” pela rede de fibrina.
Figura 14 – Micrografia obtida 
por microscopia eletrônica de 
varredura (MEV) com aumento 
de 1.600 vezes. Fragmento do 
biomaterial com malha de fibrina 
repousada sobre sua superfície. 
Evidência da porosidade do 
biomaterial impregnada de 
micropartículas plaquetárias 
e densa rede aderida.
17
10
Figuras 15 – Obtenção do Sticky Bone. A. Coágulo de fibrina. B/C. Fragmentos do coágulo misturados 
ao biomaterial. D. Remoção da fibrina em fase líquida e do pelet leucoplaquetário. E. Aplicação 
da FFL sobre o biomaterial. F. Compósito pronto para ser aplicado no leito cirúrgico.
A B
C D
E F
18
10
Figuras 17 – A. Fixação de parafusos com cabeça de largo diâmetro para contenção da ação mecânica tecidual sobre o 
enxerto. B. Sticky Bone. C. Enxerto acomodado. D. Pós-operatório com oito meses e evidência do ganho ósseo horizontal .
Figuras 16 – A. Aplicação de biomaterial apenas 
com fragmentos de fibrina. B/C. Aplicação de 
biomaterial particulado com fragmentos de fibrina e 
aglutinado com fibrina em fase líquida, Sticky Bone.
A B
C
A B
C D
19
10
A associação da fibrina em fase líquida aos biomateriais particu-
lados para enxertia para a obtenção de um compósito mineralizado 
em matriz de fibrina trata-se de um método reprodutível, de mínima 
complexidade técnica, minimamente invasivo, que valoriza a biologia 
sanguínea e que acrescenta estratégias para manuseio cirúrgico. 
A produção científica internacional sobre estes agregados sanguíneos 
e seus efeitos está em plena evolução. O número de estudos clínicos 
prospectivos e revisões sistemáticas86-87 publicados tem sido crescente 
e fortalecido a evidência clínica. Entretanto, vários estudos de base, como 
estudos in vitro e in vivo88-90, têm enaltecido seu alto valor biológico e funda-
mentado seu emprego clínico com significativo nível de favorecimento na 
resposta reparadora e angiogênica sobre os leitos tissulares afetados. As 
formas mais simples e comuns de comunicação científica neste campo 
têm sido os relatos de caso e série de casos que demonstram de modo 
incisivo os efeitos benéficos do uso da FRP nas cirurgias odontológicas91.
No Brasil, vários grupos de pesquisadores, clínicos e educadores 
têm desempenhado um importante papel na divulgação da técnica e 
acessibilidade metodológica à classe odontológica. Vários trabalhos 
já publicados no cenário nacional configuram a técnica como segura, 
efetiva e funcional74-75,92.
Considerações finais
Os benefícios clínicos, comparativamente ao seu baixo 
custo de obtenção, poderão colocar os agregados plaquetários 
autólogos não transfusionais no rol de procedimentos de rotina 
na prática clínica odontológica, em especial na Implantodontia 
e na Cirurgia bucomaxilofacial. A segurança legal do cirur-
gião-dentista brasileiro e, portanto, a autonomia em relação à 
prática da venopunção amplia as possibilidades de resoluções 
terapêuticas e traz para a Odontologia um importante marco 
histórico em direção à ampliação de opções de tratamento 
para os pacientes54. Tal qual a descoberta da anestesia e as 
próprias reabilitações usando-se implantes osseointegráveis 
que se consolidaram primariamente na Odontologia, o uso do 
sangue com objetivos não transfusionais segue de forma firme, 
produzindo conhecimento científico que a Odontologia brasileira 
orgulhosamente tem a honra e o prazer em contribuir.
Agradecimentos
Às equipes do Laboratório de Microscopia e Microanálise do Instituto 
de Biologia e do Laboratório de Morfologia Médica da Faculdade de 
Medicina, ambos da Universidade de Brasília.
À Critéria Biomateriais pela doação do material para estudo 
morfológico por microscopia eletrônica.
20
10
Referências
1. Dong-Seok Sohn BH, Jin Kim W, Eric Park CCP. Utilization ofAutologous Concentrated Growth Factors (CGF) 
Enriched Bone Graft Matrix (Sticky Bone) and CGF-Enriched Fibrin Membrane in Implant Dentistry. J Implant 
Adv Clin Dent 2015;7:17-29..
2. Lippi G, et al. EFLM WG-Preanalytical phase opinion paper: local validation of blood collection tubes in clinical 
laboratories. Clin Chem Lab Med. 0, (2016).
3. Mourão CFAB, Valiense H, Melo ER, Mourão NBMF, Maia MDC. Obtention of injectable platelets rich-fibrin (i-PRF) and 
its polymerization with bone graft: technical note. Rev Col Bras Cir (2015). doi:10.1590/0100-69912015006013
4. Anitua E. Plasma rich in growth factors: preliminary results of use in the preparation of future sites for implants. 
Int J Oral Maxillofac Implants 1999;14:529-35.
5. Choukroun J, Adda F, Schoeffler CVA. Une opportunité en paro implantologie, le PRF. Implantodontie 2001 ; 
42 - 55-62. Implanto 42, 55–62 (2001).
6. Dohan Ehrenfest DM et al. Classification of platelet concentrates (Platelet-Rich Plasma-PRP, Platelet-Rich Fibrin-PRF) 
for topical and infiltrative use in orthopedic and sports medicine: current consensus, clinical implications and 
perspectives. Muscles. Ligaments Tendons J 2014;4:3-9.
7. Rodella LF, et al. Growth factors, CD34 positive cells, and fibrin network analysis in concentrated growth factors 
fraction. Microsc Res Tech (2011). doi:10.1002/jemt.20968
8. Simonpieri A, Choukroun J, Corso MD, Sammartino G, Dohan Ehrenfest DM. Simultaneous Sinus-Lift and 
Implantation Using Microthreaded Implants and Leukocyte-and Platelet-Rich Fibrin as Sole Grafting Material: 
A Six-Year Experience. doi:10.1097/ID.0b013e3181faa8af
9. Diss A, Dohan DM, Mouhyi J, Mahler P. Osteotome sinus floor elevation using Choukroun’s platelet-rich fibrin as 
grafting material: a 1-year prospective pilot study with microthreaded implants. Oral Surg Oral Med Oral Pathol 
Oral Radiol Endod 2008;105:572-9 (2008).
10. Yoon JS, Lee SH, Yoon HJ. The influence of platelet-rich fibrin on angiogenesis in guided bone regeneration 
using xenogenic bone substitutes: A study of rabbit cranial defects. J Craniomalacia Surg 2014;42:1071-7.
11. Zubairova LD et al. Circulating Microparticles Alter Formation, Structure, and Properties of Fibrin Clots. Nat. 
Publ. Gr. (2015). doi:10.1038/srep17611
12. Ahmad E, Fatima MT, Hoque M, Owais M, Saleemuddin M. Fibrin matrices: The versatile therapeutic delivery 
systems. Int J Biol. Macromol 2015;81:121-36.
13. Kim BJ et al. A comparative study of the effectiveness of sinus bone grafting with recombinant human bone 
morphogenetic protein 2-coated tricalcium phosphate and platelet-rich fibrin-mixed tricalcium phosphate in 
rabbits. Oral Surg Oral Med. Oral Pathol Oral Radiol (2012). doi:10.1016/j.tripleo.2011.04.029
14. Chatakun P et al. The effect of five proteins on stem cells used for osteoblast differentiation and proliferation: A 
current review of the literature. Cell Mol Life Sci (2014). doi:10.1007/s00018-013-1326-0
15. Yang S, En L, Yanwei G, Mingguo W. Platelet-rich fibrin promotes osteogenic differentiation of bone marrow 
mesenchymal stem cells through canonical Wnt/β-catenin signaling pathway. Int J Oral Maxillofac Surg 
2015;44(suppl):e310.
16. Smith SE, Roukis TS. Bone and Wound Healing Augmentation with Platelet-Rich Plasma. Clin Podiatr Med 
Surg 2009;26:559-88.
17. Bannish BE, Keener JP, Woodbury M, Weisel JW, Fogelson AL. Modelling fibrinolysis: 1D continuum models. Math 
Med Biol (2014). doi:10.1093/imammb/dqs030.
18. Mosesson MW. Fibrinogen and fibrin structure and functions. J Trombos Hemost 2005;3:1894-04.
19. Weisel JW. The mechanical properties of fibrin for basic scientists and clinicians. Biophys Chem (2004). 
doi:10.1016/j.bpc.2004.07.029
20. Kim OV et al. Foam-like compression behavior of fibrin networks. Biomech Model Mechanobiol doi:10.1007/
s10237-015-0683-z
21. Sacred Heart Health System. Clotted Samples in the Clinical Laboratory What causes clotted specimens ? The 
top three causes of clotted samples are : Common Anti-coagulated Tube Types Phlebotomy Order of Draw. 
note 3–4 (2014).
22. Donsimoni JM et al. Implantologie basale : concepts, techniques et applications cliniques. EMC - Odontol. 1, 
202–255 (2005).
23. Gassling V, Açil Y, Springer IN, Hubert N, Wiltfang J. Platelet-rich plasma (PRP) and platelet-rich fibrin (PRF) in 
human cell cultures: Response to letter of Dr. David Dohan Ehrenfest. Oral Surgery, Oral Med. Oral Pathol. Oral 
Radiol. Endodontology 2010;110:421-2.
24. Bai M et al. Three-dimensional structure and cytokine distribution of platelet-rich fibrin. 116–124 doi:10.6061/
clinics/2017(02)09
25. Grinnell F. Fibroblast biology in three-dimensional collagen matrices. Trends in Cell Biol 2003. doi:10.1016/
S0962-8924(03)00057-6
26. Choukroun J et al. Platelet Rich Fibrin (PRF) : un nouveau biomatériau de cicatrisation: Biotechnologies et 
fibrine, plaquettes et cytokines, aspects immunitaires, implications thérapeutiques 4e partie : implications 
thérapeutiques. Implantodontie 2004;13:229-35.
27. Zumstein MA, Bielecki T, Dohan Ehrenfest DM. The future of platelet concentrates in sports medicine: platelet-rich 
plasma, platelet-rich fibrin, and the impact of scaffolds and cells on the long-term delivery of growth factors. 
Oper Tech Sports Med 2011;19:190-7.
28. Anitua E et al. New insights into and novel applications for platelet-rich fibrin therapies. Trends in Biotechnol 
(2006). doi:10.1016/j.tibtech.2006.02.010
29. Anitua E et al. Autologous preparations rich in growth factors promote proliferation and induce VEGF and HGF 
production by human tendon cells in culture. J Orthop Res 2005;23:281-6.
30. Anitua E, Zalduendo MM, Prado R, Alkhraisat MH, Orive G. Morphogen and proinflammatory cytokine release 
kinetics from PRGF-Endoret fibrin scaffolds: Evaluation of the effect of leukocyte inclusion. J Biomed Mater 
Res - Part A (2015). doi:10.1002/jbm.a.35244
31. Dudani AK1, Ben-Tchavtchavadze M, Porter STE. Angiostatin and plasminogen share binding to endothelial cell 
surface actin. Biochem Cell Biol. 83, 28–35 (2005).
32. Bohatch Jr. MS, Trojan PJJ, Matkovski PD, Favero GM. Quantificação E Análise Dos Fatores De Crescimento Il-6, 
Tgf-B, Vegf E B-Fgf No Sobrenadante De Cultura De Mieloma Multiplo. Uma Correlação Com O Microambiente 
Tumoral. Publ. UEPG Ciencias Biol. e da Saude 2010;16:105-9.
33. Kushida S et al. Platelet and growth factor concentrations in activated platelet-rich plasma: A comparison of 
seven commercial separation systems. J Artif Organs (2014). doi:10.1007/s10047-014-0761-5
34. Zeng Q et al. Release of Growth Factors into Root Canal by Irrigations in Regenerative Endodontics. J. Endod 
2016;42:1760-6.
35. Grainger DJ et al. Genetic control of the circulating concentration of transforming growth factor type β1. Hum. 
Mol. Genet. 8, (1999).
36. Silva JRV, Leitão CCF, Brito IR. A superfamília dos fatores de crescimento transformante-β e o controle da 
foliculogênese em mamíferos Transforming growth factors -β superfamily members and control of folliculogenesis 
in mammals. Rev Bras Reprod Anim 2009;33:149-60.
37. Tohidnezhad M et al. Role of platelet-released growth factors in detoxification of reactive oxygen species in 
osteoblasts. Bone 2014. doi:10.1016/j.bone.2014.04.029.
38. Dohan DM et al. Platelet-rich fibrin (PRF): A second-generation platelet concentrate. Part III: Leucocyte 
activation: A new feature for platelet concentrates? Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 2006. 
doi:10.1016/j.tripleo.2005.07.010
39. Anitua E et al. Implementation of a more physiological plasma rich in growth factor (PRGF) protocol: Anticoagulant 
removal and reduction in activator concentration. Platelets 2016;7104:1-8.
40. Dohan Ehrenfest DM, Doglioli P, Peppo GM, Del Corso M, Charrier JB. Choukroun’s platelet-rich fibrin (PRF) stimulates 
in vitro proliferation and differentiation ofhuman oral bone mesenchymal stem cell in a dose-dependent way. 
Arch Oral Biol (2010). doi:10.1016/j.archoralbio.2010.01.004
41. Dohan S et al. Erratum à l’article : « Platelet Rich Fibrin (PRF) : un nouveau biomatériau de cicatrisation ». S. 
Dohan et al. Vol. 13, no 2 2004. Implantodontie 13, 203 (2004).
42. Re M. Platelet-rich plasma (PRP): what is PRP and what is not PRP? Implant Dent 2001;10:225-8.
43. Matras H, Jesch W, Watzek GDH. Use of fibrin adhesives in mouth, jaw, and face surgery. Osterr Z Stomatol 
1978;75:433-7.
44. Chao FC, Shepro D, Tullis JL, Belamarich FA, Curby WA. Similarities Between Platelt Contraction and celluar Motility 
during mitosis: Role of Plateler microtubules in Clot Retraction. J. Cell Sci 2 1976;569-88.
45. Dohan Ehrenfest DM, Del Corso M, Inchingolo F, Sammartino G, Charrier JB. Platelet-rich plasma (PRP) and 
platelet-rich fibrin (PRF) in human cell cultures: Growth factor release and contradictory results. Oral Surg Oral 
Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 2010. doi:10.1016/j.tripleo.2010.05.059
46. Leão MP, Magini R. in Plasma rico em plaquetas e fatores de crescimento 2004. p. 233-257.
47. Litvinov RI, Farrell DH, Weisel JW, Bennett JS. Distinct fibrin-αIIbβ3 and fibrinogen-αIIbβ3 interactions The 
Platelet Integrin αIIbβ3 Differentially Interacts with Fibrin Versus Fibrinogen*. doi:10.1074/jbc.M115.706861.
48. Dohan Ehrenfest DM, Rasmusson L, Albrektsson T. Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich 
plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends in Biotechnol 2009. doi:10.1016/j.
tibtech.2008.11.009.
49. Kim TH, Kim SH, Sdor GK, Kim YD. Comparison of platelet-rich plasma (PRP), platelet-rich fibrin (PRF), and concentrated 
growth factor (CGF) in rabbit-skull defect healing. Arch Oral Biol (2014). doi:10.1016/j.archoralbio.2014.02.004.
50. Kobayashi E et al. Comparative release of growth factors from PRP, PRF, and advanced-PRF. Clin Oral Invest 
(2016). doi:10.1007/s00784-016-1719-1
51. Dohan DM, Choukroun J. PRP, cPRP, PRF, PRG, PRGF, FC … How to find your way in the jungle of platelet concentrates? 
Oral Surg Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod 2007;103:305-6.
52. Magalon G, Magalon J. PRP (Plasma riche en plaquette) et cellules souches. Ann. Dermatol. Venereol 2014;141:S32.
53. Alma K et al. Influence of Blood Collection Systems on Coagulation Tests. 367–375 (2012). doi:10.5505/
tjh.2012.59254.
54. Conselho Federal de Odontologia. Agregados plaquetários autólogos não tranfusionai. Resolução 158/2015 
(2015). Available at: http://cfo.org.br/publicacoes-principal/prestacao-de-contas/servicos-e-consultas/
servicos-e-consultas/ato-normativo/?id=1927. 
55. Pontual MAB, Magini RS. Plasma rico em plaquetas e fatores de crescimento. Das pesquisas científicas à 
clinica odontológica, 2004.
56. Dohan DM et al. Platelet-rich fibrin (PRF): A second-generation platelet concentrate. Part I: Technological 
concepts and evolution. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 2006. doi:10.1016/j.tripleo.2005.07.008.
57. Gupta V, Bains VK, Singh GP, Mathur A, Bains R. Regenerative Potential of Platelet Rich Fibrin In Dentistry: 
Literature Review. Asian J. Oral Heal. Allied Sci. 1.
58. Fujioka-Kobayashi M et al. Optimized Platelet Rich Fibrin With the Low Speed Concept: Growth Factor Release, 
Biocompatibility and Cellular Response. J Periodontol (2016). doi:10.1902/jop.2016.160443.
59. Bonazza V et al. How the di ff erent material and shape of the blood collection tube in fl uences the Concentrated 
Growth Factors production. 1–6 (2016). doi:10.1002/jemt.22772.
60. Sakashita AM et al. Fatores que afetam a coleta de células-tronco hematopoiéticas do sangue periférico por 
leucaférese de grande volume : experiência de um único centro by large-volume leukapheresis : a single 
center experience 2011;9:196-200.
61. Dohan DM et al. Platelet-rich fibrin (PRF): A second-generation platelet concentrate. Part II: Platelet-related 
biologic features. doi:10.1016/j.tripleo.2005.07.009.
62. Chokroun J, Adda F, Schoeffloer C, Vervelle, A. Une opportunité en paro implantologie, le PRF. Implantodontie 
2001 ; 42 - 55-62. Imploantodontie (2001).
63. Dhingra N et al. Diretrizes da OMS para a colheita de sangue: boas práticas em flebotomia. Phlebotomy 
12-20-33-45 (2014).
64. Jobard E et al. A Systematic Evaluation of Blood Serum and Plasma Pre-Analytics for Metabolomics Cohort 
Studies. Int J Mol Sci 2016;17:2035.
65. Choukroun J et al. Platelet-rich fibrin (PRF): A second-generation platelet concentrate. Part V: Histologic 
evaluations of PRF effects on bone allograft maturation in sinus lift. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 
Endod. doi:10.1016/j.tripleo.2005.07.012.
66. Leão MP, Oliveira LA, Pontual MAB. Concentrados sanguíneos. INPerio 2016;1:2-7.
67. Borsani. Biology and Medicine. Biol Med 2015;7.
68. Dohan Ehrenfest DM, Corso MD, Diss A, Mouhyi J, Charrier JB. Three-Dimensional Architecture and Cell Composition 
of a Choukroun’s Platelet-Rich Fibrin Clot and Membrane. J Periodontol 2010;81:546-55.
69. Pinto NR, Pereda A, Jiménez P, Corso MD, Kang BS, Wang HL et al. The impact of the centrifuge characteristics and 
centrifugation protocols on the cells, growth factors and fibrin architecture of a Leukocyte- and Platelet-Rich Fibrin 
(L-PRF) clot and membrane. Part 2: macroscopic, photonic microscopy and Scanning Electr. Poseido 2014;2:141-54.
70. Nemmar A. et al. Amorphous silica nanoparticles impair vascular homeostasis and induce systemic inflammation. 
Int J Nanomed 2014. doi:10.2147/IJN.S52818.
71. Nattrass C et al. The global variability of diatomaceous earth toxicity: a physicochemical and in vitro investigation. 
J Occup Med. Toxicol 2015;10:23.
72. Borsani E et al. Biological Characterization and In Vitro Effects of Human Concentrated Growth Factor Preparation : 
An Innovative Approach to Tissue Regeneration 2015;7.
73. Vieira FLD et al. Utilização de fibrina leucoplaquetária autóloga para reinserção de implante com perda de 
estabilidade primária em cirurgia guiada – relato de caso. Full Dent Sci 2017;8.
74. Vieira FLD et al. Utilização de fibrina leucoplaquetária autóloga na recuperação de perfuração crítica da 
membrana sinusa. Implant Int J 2016;1:1293-9.
75. Santos MJ, Oliveira LA, Fernandes MO, Regina L. Uso da fibrina leucoplaquetária autóloga em fase líquida para 
harmonização estética e funcional da face. Rev. Catarinense Implantodont 2016;2:3-7.
76. Bowen RAR, Remaley AT. Interferences from blood collection tube components on clinical chemistry assays. 
Biochem Medica 2014;24:31–44.
77. Clotted Samples in the Clinical Laboratory What causes clotted specimens ? The top three causes of clotted 
samples are : Common Anti-coagulated Tube Types Phlebotomy Order of Draw.
78. Jose Corbalan J, Medina C, Jacoby A, Malinski T, Radomski MW. Amorphous silica nanoparticles aggregate human 
platelets: Potential implications for vascular homeostasis. Int J Nanomedicine (2012). doi:10.2147/IJN.S28293.
79. Kushida T, Saha K, Subramani C, Nandwana V, Rotello VM. Effect of nano-scale curvature on the intrinsic blood 
coagulation system. Nanoscale 2014;6.
80. Miron RJ et al. Injectable platelet rich fibrin (i-PRF): opportunities in regenerative dentistry? Clin Oral Investig 
(2017). doi:10.1007/s00784-017-2063-9.
81. Lippi G. et al. EFLM WG-Preanalytical phase opinion paper: local validation of blood collection tubes in clinical 
laboratories. Clin Chem Lab Med 0, (2016).
82. Cines DB et al. Clot contraction: compression of erythrocytes into tightly packed polyhedra and redistribution 
of platelets and fibrin. Blood 2014;123:1596-603.
83. Vahabi S et al. Effects of Plasma Rich in Growth Factors and Platelet-Rich Fibrin on Proliferation and Viability of 
Human Gingival Fibroblasts. www.jdt.tums.ac.ir July J. Dent 2015;12.
84. Yazigi Junior JA et al.Quantification of platelets obtained by different centrifugation protocols in SHR rats. Rev 
Bras Ortop (English Ed. 2015;50:729-38.
85. Frei M. Biofiles. Sigma-Aldrich 2014;6:17-21.
86. Pallua N, Wolter T, Markowicz M. Platelet-rich plasma in burns. Burns (2010). doi:10.1016/j.burns.2009.05.002.
87. Filardo G, Kon E, Roffi A, Di Martino A, Marcacci M. Scaffold-based repair for cartilage healing: a systematic 
review and technical note. Arthrosc. J Arthrosc Relat Surg 2013;29:174-86.
88. Moraschini V, Barboza ESP. Effect of autologous platelet concentrates for alveolar socket preservation: a systematic 
review. Int J Oral Maxillofac Surg 2015;44:632-641.
89. Baksh N, Hannon CP, Murawski CD, Smyth NA, Kennedy JG. Platelet-Rich Plasma in Tendon Models: A Systematic 
Review of Basic Science Literature. Arthrosc J Arthrosc Relat Surg 2013;29:596-607.
90. Lopez-Jornet P, Sanchez Perez A, Mendes RA, Tobias A. Medication-related osteonecrosis of the jaw: Is autologous 
platelet concentrate application effective for prevention and treatment? A systematic review. J Craniomaxillofac 
Surg 2016;44:1067-72.
91. Sachdeva S, Phadnaik MB, Saluja H. Platelet-rich fibrin, a physiological concentrate in the management of buccal 
dehiscence of implant – A case report. J Pierre Fauchard Acad India Sect 2015;29:103-6.
92. Vieira FLD et al. Tratamento da osteonecrose mandibular medicamentosa usando a fibrina leucoplaquetária 
autóloga – Dez meses de acompanhamento sem recidiva. Implant Int J 2017;2:48-5.
21