portfolio de microbiologia clinica

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Universidade Paulista
Beatriz de Camargo
Maraya Desiree da Silva Campanha
Portfolio de Microbiologia Clínica
Orientadora: Prof Cláudia de Moura
Jundiaí
2018
	O objetivo é registrar os resultados e discussões obtidos dos casos clínicos estudados em laboratório, além de como se aplicam ao conteúdo teórico da disciplina de Microbiologia Clínica.
Identificação Cocos Gram-positivos
	Após a apresentação do caso clínico (portadora de diabetes) e apresentação de sintomas, foram feitos os devidos exames e identificação da bactéria causadora, que é aeróbia, gram positiva, podendo ser Staphylococcus, Streptococcus ou Micrococcus. São feitos alguns testes nos meios de cultura, com o Ágar Nutriente, onde houve crescimento bacteriano na placa inteira, exceto nas bordas. O teste de catalase, para diferenciar entre Staphylococcus e Streptococcus também foi feito, sendo positivo para Staphylococcus e negativo para Streptococcus (catalase-negativo). Ágar Manitol foi realizado para verificar a presença de Staphylococcus aureus, que deu positivo, tendo uma mudança de cor rósea para um amarelo meio dourado. 
Staphylococcus aureus: bactéria gram positiva, aeróbia, encontrada na pele e nas fossas nasais. Causa infecções simples como furúnculo e acnes, além de causar também infecções graves como pneumonia, meningite, sepse, etc. 
Staphylococcus aureus
Identificação Enterobacteriaceae
	São bacilos gram-negativos, não esporulados, flagelados e com cápsulas. São anaeróbios facultativos, isto é, fazem a fermentação da glicose e são oxidase-negativas. Produzem catalase e utilizam glicose como fonte de carbono e amônia como fonte de nitrogênio. O principal fator de virulência é a presença do LPS (lipopolissacarídeo). O local das infecções é por meio de feridas subcutâneas, rins, sistema nervoso central, pulmões e vias urinárias. O diagnóstico foi realizado pelos meios de cultura: Ágar Uréia, MacConkey, TSI, Mole e Citrato de Simmons.
	Escherichia coli: Infecções intestinais. Transmissão feita principalmente por fezes contaminadas. Sua presença na urina causa infecção urinária. Os patótipos são: diarreia, sepse, miocardite, encefalite, meningite, mastite, HVS, ITU, CH (eles se diferem por meio dos fatores de virulência da E. coli, como as fímbrias e toxinas). Crescimento ocorre pela não fermentação, tendo resultados negativos tanto para citrato como para urease. A colônia é seca e rosa se a lactose for positiva, feita em Ágar MacConkey por esgotamento (meio seletivo e diferencial).
 
 E. coli em Ágar MacConkey E. coli microscopia
Resultado Ágar MacConkey: 
Cristal violeta + sais biliares inibem Gram-positivos.
Lactose: indicador de pH: rosa para positivo e amarelado para negativo.
	Salmonela: Alimentos de origem animal são principais meios de contaminação, estes contaminados com fezes dos animais. Causam intoxicação alimentar e gastroenterite aguda. Sua infecção primária passa para colonização (MO sobrevive dentro dos macrófagos), causa invasão tecidual e vai para a corrente sanguínea, causando a sepse. Identificação feita pelo Ágar TSI, por meio de uma picada única e estrias na rampa, é um meio não seletivo. São semeados em tubos de ensaio, separados para incubação. A base do tubo é positiva se for amarelada, devido a fermentação da glicose, e vermelha para negativo. Pode ocorrer a produção de gás (bolhas no meio de cultura), devido a degradação de moléculas do ácido fórmico, ou produção de H2S, ocorre quando há formação de um precipitado de cor negra, positivo para sulfeto de ferro, e se negativo, sem alteração.
Na figura C nota-se a base amarelada e presença de H2S do Ágar TSI para Salmonella.
Ágar Citrato de Simmons: Ocorre utilização do Citrato como única fonte de carbono. Usa o sal de amônia como única fonte de Ni, liberando o Na, que se junta com H2O e forma NaOH, alcalizando o meio e resultando em um indicador azul de bromotimol. O resultado positivo muda a cor verde para azul e o resultado negativo não tem alteração. É feito por meio de estrias na rampa. Um exemplo positivo é a Klebsiella pneumoniae: bactéria encapsulada, anaeróbia facultativa, gram-negativa. Causa pneumonia e também infecções urinárias.
Resultado positivo do Citrato na cor azulada e esverdeado para negativo.
Ágar Uréia: São feitas estrias na rampa. Detecta a produção da enzima urease. Se resultado for positivo tem coloração amarela e negativo tem coloração rósea. Seu resultado é positivo para Klebsiella pneumoniae.
Ágar Uréia positivo (amarelo) e negativo (rosa)
Ágar Mole: É feita uma picada no centro do ágar. Assim, a bactéria móvel irá crescer além do local da picada, enquanto que a bactéria imóvel irá crescer apenas no local onde foi semeada. Há a produção de flagelo, sendo positivo para meio turvo e negativo para a picada. 
Identificação Bacilos Gram Negativos Não Fermentadores (BGNNF)
Pseudomonas aeruginosa
	Bactéria gram-negativa, aeróbia, não esporulada, possui catalase positiva, seus principais fatores de virulência envolvem a presença de flagelo, fímbrias, endotoxina (LPS) e cápsula polissacarídica, importantes para sua patogenicidade. É encontrada em diferentes ambientes, como solo e água, causando infecções em pessoas imunocomprometidas, portadoras de doenças como AIDS e câncer, ou seja, é um patógeno oportunista. Esta bactéria coloniza os pulmões, produz exopolissacarídeo e cresce em forma de biofilme. Seus fatores de virulência e a forte resistência à antibióticos causa difícil controle de suas infecções. São bactérias que não resistem ao ressecamento e baixas temperaturas. Foi cultivada em Ágar TSA, Mueller Hinton, Cetremide, Citrato de Simmons e Mole. A Pseudomona aeruginosa produz um pigmento difusível (hidrossolúvel) chamado piocianina, de cor verde, observada nos resultados dos meios de cultura.
Pseudomonas microscopia
Ágar TSA e Mueller Hinton: Meios ricos e não seletivos (qualquer espécie se multiplica). Não houve crescimento da Pseudomonas.
Ágar Cetremide: Seletivo e diferencial para Pseudomonas. A coloração é âmbar claro e com crescimento da bactéria fica azul/esverdeado.
Crescimento de Pseudomonas aeruginosa em ágar cetremide.
Ágar Citrato de Simmons possui crescimento bacteriano. As bactérias que usam o citrato como fonte de carbono se multiplicam no meio de cultura, ficando de cor azulada. No Ágar Mole se a bactéria for móvel é positivo para Stenotrophomonas. Se for imóvel, positivo para Acinetobacter.
Identificação Bacilos Gram Positivos Aeróbios e Anaeróbios
	Bacillus: Bactérias com forma de bastonetes, gram positivas, aeróbias, esporuladas, de catalase positiva. Produzem cápsulas (resistindo à fagocitose) e exotoxinas. Principais representantes: Bacillus cereus (intoxicações alimentares) e anthracis (carbúnculo). O bacillus cereus é uma bactéria geralmente móvel e produz esporos. Produz duas toxinas: a diarreica (vômito) e a emética (diarreia aquosa). Seus esporos resistem ao calor, sobrevivendo ao cozimento dos alimentos. Um exemplo de grande quantidade de bacillus cereus é em bolos de aniversário, onde há grande presença de amido e ocorre alto índice de contaminação pela bactéria.
Bacillus cereus microscopia
Resultado microscópico: apenas presença de fungos.
Fluxograma diferenciando as bactérias Acinetobacter, Pseudomonas e Stenotrophomonas
	
Conclusões
	Ao realizar as aulas práticas foi possível concluir como é importante a identificação, pesquisa, e estudo das mais diversas bactérias. Sua importância no nosso cotidiano é vista pelo seu papel em nosso corpo, seja sua presença na microbiota, as infecções que causam, ou para estudos clínicos.
	É importante relatar como é importante estudar as mesmas para que assim possamos evitar nos contaminarmos, seguindo sempre a linha de estudo delas e assim entendendo como atuam e como podemos fazer sua prevenção, além do papel na identificação de doenças, já que muitos MOssão patogênicos.
	Achamos imprescindível que tenhamos estas aulas e o estudo da microbiologia clínica, pois ao fazer o controle microbiológico, percebemos como este faz parte da produção farmacêutica, ao consumo de produtos, etc. Na área farmacêutica o crescimento da indústria é notável, e ao incluir a microbiologia é possível desenvolver novos medicamentos e produtos, tudo com base nos indivíduos patogênicos e as pesquisas realizadas.