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Resumo – Biologia Molecular Dogma central: ❖ Etapas do dogma central: 1. Replicação: é a duplicação do DNA 2. Transcrição: é a “fabricação” de RNA mensageiro (RNAm) 3. Tradução: é a produção de aminoácidos e proteínas O DNA ❖ É uma molécula em DUPLA-HÉLICE que carrega a informação genética ❖ Possui as bases nitrogenadas: ADENINA, TIMINA, GUANINA e CITOSINA ❖ A ligação entre as bases nitrogenadas é a ligação por pontes de hidrogênio 1. Replicação ❖ A replicação é a primeira etapa do DOGMA CENTRAL ❖ Nela ocorre a duplicação do DNA a partir de uma fita já existente ENZIMAS que atuam na Replicação: ❖ Topoisomerase ❖ DNA helicase ❖ Proteínas SSB ❖ Primase ❖ DNA polimerase ❖ DNA ligase Como ocorre a REPLICAÇÃO? ❖ 1. A enzima TOPOISOMERASE é a primeira a agir = ela vai diminuir a torção da dupla-hélice. Lembrando que a torção (enrolamento) da dupla-hélice é feita pelas HISTONAS que são proteínas ❖ 2. A segunda enzima na replicação é a DNA helicase ✓ A DNA helicase abre uma região no DNA chamada de bolha de replicação ✓ Também, a DNA helicase faz a QUEBRA DAS PONTES DE HIDROGÊNIO entre as BASES NITROGENADAS ➔ As fitas de DNA poderiam se juntar de novo, mas elas NÃO SE LIGAM NOVAMENTE, por causa das Proteínas SSB que estabilizam as fitas. ❖ 3. Depois da abertura da bolha de replicação, a enzima Primase vai incluir o primer ✓ O que é um primer? ❖ 4. Após isso, a enzima DNA polimerase vai se ligar ao primer iniciador para começar a adicionar novos nucleotídeos na fita que está sendo replicada. Bolha de replicação é um segmento INICIADOR da replicação ❖ A cadeia líder (CADEIA CONTÍNUA) tem uma replicação direta, ou seja, não tem fragmentos (Fragmentos de Okasaki) ✓ A replicação na cadeia líder acontece no sentido 3’ --- 5’ ✓ A cadeia líder terá apenas um primer de iniciação ❖ A cadeia atrasada (CADEIA DESCONTÍNUA) é aquela que vai ter os primers iniciadores. ✓ A replicação na cadeia líder acontece no sentido 5’ --- 3’ ✓ A cadeia atrasada terá vários primers ❖ 5. Os primers são tirados da fita pela própria DNA polimerase. ❖ 6. No final da replicação, a DNA ligase vai (LIGAR TUDO) “fechar os buracos” deixados pelos fragmentos de Okasaki, deixando a fita atrasada contínua. ÉXONS ÉXONS 2. Transcrição ❖ Transcrição é a primeira etapa da expressão do gene ❖ Na transcrição acontece a produção de RNA tendo como molde o DNA • A transcrição acontece de forma diferente em procariotos e eucariotos por 2 motivos: ✓ A localização ✓ A estrutura do DNA Diferenças da TRANSCRIÇÃO PROCARIONTES EUCARIONTES Local: no Citoplasma Local: no Núcleo Estrutura: o DNA não possui ÍNTRONS, apenas ÉXONS Estrutura: o DNA possui ÍNTRONS + ÉXONS Como ocorre a Transcrição? ❖ 1. O DNA precisa ser levemente desenrolada para o PROMOTOR poder se ligar na fita que vai ser transcrita. ❖ 2. O PROMOTOR vai indicar (SINALIZAR) onde a RNA polimerase precisa se ligar ❖ 3. A RNA polimerase é uma enzima que vai construir uma fita de RNA mensageiro adicionando novos nucleotídeos na direção de 5' para 3' ❖ ÍNTRONS DNA de Eucariontes DNA de Procariontes Os íntrons são regiões NÃO codificadas As bases adicionadas são ADENINA, URACILA (no lugar da TIMINA), CITOSINA E GUANINA. ❖ O RNA imaturo formado ainda possui os íntrons. ✓ Os íntrons precisam ser retirados!!! ✓ A retirada dos íntrons é feita pelos SPLICESSOMOS, na etapa chamada de encadeamento ❖ Após isso, se formará um RNA mensageiro. Mas esse RNAm é imaturo e não está pronto para sair do núcleo ❖ O RNA vai se tornar pronto para sair do núcleo (MADURO) quando as pontas (EXTREMIDADES) dele forem modificadas. ➔ Modificação química ❖ Essa modificação das pontas do RNA é feita pelo CAPEAMENTO 5 e pelas CAUDAS POLI-A. ❖ Depois dessa modificação o RNA mensageiro está pronto para sair do núcleo ❖ Após sua saída, o RNA mensageiro, vai para o Citoplasma, para o Retículo Endoplasmático Rugoso, onde vai acontecer a TRADUÇÃO O capeamento 5 acontece no INÍCIO A cauda poli-A acontece no FINAL 3. Tradução ❖ É a etapa que vai gerar aminoácidos, e posteriormente PROTEÍNAS Como ocorre a tradução? ❖ Os RNAt (TRANSPORTADOR) se ligam ao RNAm (MENSAGEIRO) dentro de uma estrutura de RNA e proteína chamada ribossomo. ❖ Há 2 subunidades de ribossomos (uma MAIOR e outra MENOR) ❖ O RNA mensageiro tem as informações genéticas que vão ser lidas pelo RNA transportador para construir as PROTEÍNAS ❖ Essa leitura é feita pelas trincas de bases nitrogenadas, que são os CÓDONS • Cada combinação de códon gera um aminoácido EXEMPLO: Códon ➔ G A C ----- gera o aminoácido ASPARAGINA ▪ O códon de iniciação é A U G ▪ O aminoácido de iniciação é a Metionina (MET)