AULA 12 - Transgênicos

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Animais transgênicos, 
e clonagem
RNA interferente
QBQ 126
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Modified from Figure 8-64 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Um gene normal pode ser alterado de diferentes 
maneiras para produzir um organismo transgênico
adição de genes
modificação genética dirigida
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Molecular Cell Biology. 4th edition.
Lodish H, Berk A, Zipursky SL, et al. New York: W. H. Freeman; 2000. 
1- Animais transgênicos:
adição de genes
 O exemplo dos camundongos gigantes
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Injeção do DNA contendo o transgene no ovócito fecundado de camundongo
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camundongos 
transgênicos
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Camundongo transgênico que 
apresenta múltiplas cópias do 
hormônio de crescimento de ratos.
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Nature Biotechnology 27, 302 - 304 (2009) 
Animais transgênicos como biorreatores para produção de proteínas para uso terapêutico ou industrial
Ex: Anti-trombina humana recombinante,
produzida no leite de cabra transgênica
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Green Fluorescent Protein (GFP)
O gene GFP da Aequoria victoria
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GFP pode ser expressa funcionalmente em animais transgênicos
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Promotor do gene Pax 6 - GFP 
GFP pode ser utilizado como indicador de expressão de genes (gene repórter)
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2- Animais transgênicos:
modificação genética dirigida
gerando camundongos knock-out
Recombinação homóloga ocorre com baixa frequência
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Figure 8-5 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Células tronco embrionárias
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Camundongo knock out para o 
gene da leptina
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Clonagem
Utiliza-se a técnica de transferência nuclear
Dolly
 e
Bonnie
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Figure 8-6 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Clonagem reprodutiva: produção de uma 
duplicata a partir de um indivíduo já existente.
Clonagem terapêutica: produção de células 
tronco embrionárias para a restauração de
órgãos ou tecidos que foram danificados. 
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Interferência de RNA é o mecanismo através do qual a presença de pequenos fragmentos de RNA dupla fita cuja sequência é complementar a um determinado gene interfere com a expressão deste gene. 
The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2006 was awarded jointly to Andrew Z. Fire and Craig C. Mello "for their discovery of RNA interference - gene silencing by double-stranded RNA"
RNA de interferência (RNAi)
e silenciamento de genes
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Micro RNAs (miRNAs)
-São RNAs não codificadores transcritos a partir do genoma.
-Regulam a expressão de genes, por exemplo durante o 
desenvolvimento.
Dicer
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siRNAs: RNAs interferentes pequenos
(small interfering RNAs)
Dicer
Provenientes de 
vírus ou transposons
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RNAi pode ser utilizado para estudar 
função de genes
Knock down