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Célula Microbiana Profa. Renata O. da R. Calixto Disciplina: Microbiologia IFRJ- Campus Realengo Citologia Microbiana Célula Procariótica Célula Eucariótica http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/5/5a/Average_prokaryote_cell-_en.svg http://www.vestibulandoweb.com.br/biologia/teoria/celula-eucarionte.asp A célula bacteriana e suas principais estruturas Parede Celular Composição química e funções • Composição - Peptideoglicano . Principal componente da parede celular: 90% . Estrutura básica: N-acetilglicosamina ligado por ligação do tipo β (1-4) ao N-acetilmurâmico; Tetrapeptídeo - Ponte de dialanina - Ligação direta • Funções: - Envolve a membrana citoplasmática (rigidez e manutenção da forma) - Presente em todos procariotos (Exceção: Micoplasmas e algumas arqueas) - Propiciar um rígido exoesqueleto: Proteção contra a lise osmótica e mecânica - Atua como sítio receptor para proteínas e outras moléculas Membrana Citoplasmática Peptidoglicano Membrana Externa Parede Celular de uma bactéria Gram-negativa • Bactérias Gram-positivas x Bactérias Gram-negativas • Bactérias Gram-positivas • Composição - Ácido teicóico . Polímero aniônico que contêm carboidratos; . Covalentemente ligados por meio de ligações fosfodiéster ao ácido murâmico da peptideoglicana; . Se liga a prótons: pH baixo evitando a degradação por autolisinas; . Negativamente carregados: ligação a cátions divalentes (Ca+2 e Mg+2), regulando o fluxo e formando uma barreira que previne a difusão de substâncias. Ácido teicóico • Composição - Ácido Lipoteicóico . Estrutura geral idêntica à do ácido teicóico; . Componente lipídico que o ancora na membrana: glicolipídio ou um fosfatidil glicolipídeo; . Regula enzimas autolíticas da parede durante o crescimento: muramidases; . Interação com o hospedeiro: - Prevenção da fagocitose, - Adesão, - Ligação ao CD14 e ativação de citocinas, - Interação com anticorpos - Ativação do complemento • Composição - Ácido Teicurônico . Sintetizado quando a concentração de fosfato está baixa; . Polissacarídeo: cadeias de ácido urônico e N-acetilglicosamina. - Proteínas ligadas à parede celular . Proteína A de S. aureus: adesão e escape do sistema imune; . Proteína M6 de estreptococos do grupo A: propriedades antifagocíticas. • Bactérias Gram-negativas • Composição - Membrana Externa . Possui permeabilidade seletiva; . Bicamada lipídica: fosfolipídeos, proteínas, lipoproteínas e lipopolissacarídeos; . Separa o ambiente externo do espaço periplasmático; . Lado externo: LPS; . Lado interno: fosfolipídeos e a porção lipídica das lipoproteínas; . Resistentes às defesas do hospedeiro e a antibióticos. • Composição: Membrana Externa - Lipopolissacarídeos (LPS) . Principal glicolipídeo presente na membrana externa; . Ativação de citocinas, agregação de plaquetas, atividade de adjuvante e mitogenicidade. . Lipídeo A (endotoxina): âncora o LPS na região hidrofóbica da membrana externa; . Core Interno: porção carboidrato e lipídeo; . Antígeno O: porção carboidrato. • Composição: Membrana Externa - Lipooligossacarídeo (LO) . Análogo do LPS: não possui o antígeno O; . Confere hidrofobicidade a membrana; . Expresso predominantemente pelas bactérias da mucosa respiratória e genital; . Possui um lipídeo A similar em estrutura e função ao LPS; . Aumenta a resistência a lise pelo soro humano normal: Neisseria; . LO de Neisseria gonorrhoeae: ligante para o receptor presente nas células hepáticas (HepG2). Invasão. • Composição: Membrana Externa - Proteínas de Membrana Externa (OMP) . Constituem cerca de 50% da massa da membrana externa; . Proteínas integrais e lipoproteínas; . Proteínas integrais: essenciais para a manutenção da integridade e permeabilidade seletiva; . Importante papel na patogenicidade (produção regulada por fatores ambientais); . Proteção contra peptídeos antimicrobianos (peptidase de membrana externa), resistência à lise por fatores do complemento, captação de ferro do hospedeiro; . Transporte de moléculas (porinas): captação de nutrientes e bombas de resistência multidroga. • Composição: Membrana Externa - Lipoproteínas . Ligação da peptideoglicana à membrana externa; . Possui ácidos graxos que ficam embebidos na região hidrofóbica; . Parte protéica da lipoproteína: ligação a peptideoglicana através do grupo amino da lisina terminal ao ácido diaminopimélico; . Confere estabilidade à membrana externa. • Composição - Espaço Periplasmático . Entre a membrana citoplasmática e a membrana externa; . Possui uma variedade de macromoléculas com várias funções que refletem o metabolismo e o ambiente bacteriano; . Importante sítio de reação químicas, transporte de soluto, regulação osmótica, secreção de proteínas e atividade hidrolítica. • Coloração de Gram: Gram-positivas x Gram-negativas A) Gram-positivas B) Gram-negativas Membrana plasmática Composição química e funções • Composição - Lipídeos de Bactérias 1. Glicerolipídeos -Fosfolipídeos: classe principal; -Outros tipos: fosfatidil glicerol (acilado) e cardiolipina ; Fosfolipídeos: . Grupo fosfato ligado a uma etalonamina (serina ou colina) : porção hidrofílica; . Dois ácidos graxos ligados por ligação do tipo éster às hidroxilas do glicerol: porção hidrofóbica. • Composição - Lipídeos de Bactérias 2. Glicolipídeos -Glicoglicerolipídeos: predominantes em bactérias; . Ácidos graxos conectados ao glicerol por ligações do tipo éster; . Uma das hidroxilas do glicerol é glicosilada por uma ou mais unidades de açúcar; . Glicoglicerofosfolipídeo: grupamento fosfato; . Outros grupamentos: sulfato -Glicoesfingolipídeos . Em lugar do glicerol: bases nitrogenadas de cadeia longa (18 ou mais carbonos), tipo esfingosina; . Ácido graxo se ligam ao NH2 por uma ligação amida formando a ceramida • Composição - Lipídeos de Bactérias 3. Hopanóides (triterpenóides pentacíclicos) - Similares ao esterol; - Encontradas em bactérias gram-positivas e gram negativas; - Mesmas funções: fluidez e permeabilidade; - Mycoplasma spp e Serpulina hyodysenteriae (incorporação de esterol) * Esterol compensa falta de parede celular * Síntese por procariotos: contaminação (Methylococcus capsulatus e Gemmata obscuriglobus) • Funções - Compartimentalização - Permeabilidade Seletiva - Síntese de elementos celulares - Produção de Energia - Transporte de substâncias • Transporte de substâncias - Transportes que não requerem energia Difusão Passiva Difusão Facilitada Osmose Difusão Passiva Osmose Normal Desidratada Lise Difusão Facilitada • Transporte de substância - Transportes que requerem energia Transporte ativo Translocação de Grupo Proteínas Carreadoras ou ligadoras de substrato Cápsula bacteriana – Glicocálice - Biofilmes Composição química e funções Evidenciação da cápsulabacteriana Coloração com tinta Nanquim Reação com anticorpo anti-polissacarídio capsular ( Reação de “quellung”) Bactéria capsulada Reconhecimento de uma bactéria acapsulada pela célula do hospedeiro 1 2 3 4 Cápsula e o escape da resposta imune do hospedeiro Bactéria acapsulada Bactéria capsulada Como é constituído um biofilme? - Empilhamento de micro-organismos imersos em uma matriz polissacarídica (glicocálice). - Canais para levar nutrientes vitais para todas as camadas e também excretar produtos provenientes das camadas mais inferiores. - O esforço cooperativo fornece proteção contra mudanças ambientais, neutraliza a ação de agentes tóxicos e dificulta a ação de antibióticos Modelos para formação de biofilmes em Pseudomonas aeruginosa Formação de placa dental por microrganismos da flora oral Fímbria ou pili – adesinas bacterianas Composição química e funções Fímbria ou pili – estruturas de aderência bacteriana Adesão bacteriana Pili ou Fímbria Adesina não fimbrial Adesinas bacterianas ( ligantes) se ligam especificamente a receptores presentes nas células do hospedeiro Ligação de E.coli a células animais Adesão bacteriana à pele humana Pili F ou Pili Sexual – envolvido no processo de conjugação bacteriana Flagelo bacteriano Composição química e função Principais tipos de flagelos encontrados nas bactérias Estrutura do flagelo de bactérias Gram positivas e Gram negativas Gram positiva Gram negativa Movimento de uma bactéria com flagelos em gradiente nutricional Quimiotaxia e Sinalização celular • Estímulo químico NUTRIENTES – Atraente – Repelente • Magnetotaxia – Bactérias aquáticas – Partículas eletrondensas – Fe - magnetos • Fototaxia – Bactérias fotossintéticas – Vacúolos de gás H - flutuação • Aerotaxia – Bactérias que requerem O2 • Outros tipos de movimentação – Pili do tipo IV: mobilidade independente de flagelo – “twitching”: movimento contração Pseudomonas aeruginosa – “gliding”: deslizamento Myxococcus xanthus Ribosomas bacterianos Composição química e função Esquema da estrutura do ribosoma de células procarióticas Inclusões citoplasmáticas Composição química e função Inclusões citoplasmáticas: Glicogênio Estrutura Localização no citoplasma da célula (ME) Inclusões citoplasmáticas: lipídios Estrutura geral de um polihidroxialcano (PHA) Polihidroxibutírico (PHB) Magnetosomas : representação esquemática das partículas magnéticas dentro da bactéria Aquaphilum magnetotaticum Endosporos bacterianos Composição química e função Endósporos • Estruturas formadas por algumas bactérias Gram +: gêneros Clostridium e Bacillus • Formadas pela privação de nutrientes • Células latentes A) Não identificado B) B. cereus C) B. megaterium Endósporos • DNA • Córtex:camada mais espessa; peptidoglicana incomum (menor nº de ligações cruzadas), sensível a lisozima; papel na germinação • Parede do cerne: camada mais interna; peptidoglicana normal • Capa: resistência a agentes químicos • Exósporo: composto por proteínas, lipídios e carboidratos Evidenciação dos endósporos bacterianos Coloração com verde malaquita + mercúrio cromo Processo de esporulação Esquema resumido Esquema mais detalhado Organelas membranosas de células eucarióticas Mitocôndria:local da respiração celular em seres eucariotos Cloroplastos: local da fotossíntese em seres eucariotos Cromossoma bacteriano • Nucleóide: – Ausência de membrana nuclear e de aparelho mitótico – Região nuclear: DNA dupla hélice • DNA + proteínas histona-like • Plasmídeos: – DNA circulares, menores que o cromossomo – Capazes de auto-duplicação Cromossoma bacteriano Plasmídio cromosoma bacteriano Nucleoide – Cromosoma bacteriano Tamanho: 4-5 milhões de base ( 1 mm de comprimento) Como esta molécula cabe dentro da bactéria ( 1m) ? E. coli lisada e DNA liberado DNA cromosomial, apresentando domínios superenovelados e proteínas tipo histonas
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