Aula 09 - Bacilos Gram Negativos não fermentadores

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Bacilos Gram Negativos não fermentadores 
Departamento de Análises Clínicas
Universidade Federal do Ceará
Prof. Everardo Albuquerque Menezes
Prof. Titular de Microbiologia
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Bacilos Gram-negativos não fermentadores 
1. Características gerais 
 São aeróbios estritos, não esporulados.
 São Bacilos ou cocos bacilos Gram (-)
 São pleomórficos
 Não utilizam carboidratos como fonte de energia ou os degradam através de vias que não a fermentação.
 Apresentam reação positiva de citocromo oxidase.
 Crescem bem em ágar-MacConkey ou em meios simples. 	
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Bacilos Gram-negativos não fermentadores 
 Possui a bactéria mais evoluída
 São oportunistas por excelência
 São ubíquos
 São patógenos hospitalares
 São Hfr (transferem e recebem muitos plasmídeos e 
 transposons) - cepas muito resistentes
 Podem ser móveis ou imóveis
 Podem ter ou não cápsula 
 
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Bacilos Gram-negativos não fermentadores 
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BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF)
Móveis, flagelos polares, oxidase positivos
Pseudomonas, Burkolderia,
Stenotrophomonas,
Ralstonia
Móveis, flagelos peritríquios, oxidase positivos
Alcaligenes, Achromobacter,
Oligella
Imóveis, oxidase positivos
Flavobacterium,
Cryseobacterium
Imóveis, podem ser oxidase lentamente positivos
Acinetobacter
MOBILIDADE/OXIDASE
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Bacilos Gram-negativos não fermentadores 
2. Família Pseudomonadaceae
2.1. Pseudomonas aeruginosa:
 Morfologia e Identificação
 Apresentam-se como bactérias isoladas, em pares ou em cadeias curtas.
Forma colônias redondas e lisas de coloração esverdeadas e fluorescentes. 
 São bactérias piogênicas 
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Pseudomonas 
- Espécies de maior importância clínica entre os BGNNF:
Pertence ao grupo fluorescente as espécies: P. aeruginosa, P. fluorescens e P. putida
Produz toxinas com pigmentos hidrossolúveis como a:
Pioverdina - P. aeruginosa, 
Piocianina - P. aeruginosa
 Piorrubina e piomelanina - P. putida, P. fluorescens
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Patogenia 
 P. aeruginosa só é patogênica quando introduzida em áreas desprovidas de defesas normais
 Resistente a vários antibióticos (-lactâmicos, aminoglicosídeos, cloranfenicol e carbapenens), ESL e desinfetantes.
A bactéria adere às mucosas ou a pele  colonização  invasão local (infecção)  disseminação (doença sistêmica) 
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Síndromes Clínicas 
 Infecções pulmonares (podem variar a traqueobronquite benigna a broncopneumonia necrosante grave)
Infecções Primárias da pele (princ. em queimadura)
Infecções do trato urinário 
 Infecções dos ouvidos
 Infecções oculares (após traumatismo inicial da córnea)
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 Infecções Adquiridas na Comunidade (raras)
 
 Pneumonia comunitária (fibrose cística)
 Foliculite e otite externa dos nadadores 
 Infecções oculares
 Endocardite aguda em usuários de drogas ilícitas
 Infecções Hospitalares:
 Pneumonia hospitalar
 Infecções do trato urinário
 Infecções de feridas
 Bacteremia 
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Diagnóstico
 Amostras: dependente do local da infecção 
 Esfregaços corados pelo Gram: bastonetes ou cocos bacilos Gram negativos, não existe nenhuma característica morfológica capaz de diferenciá-la das enterobactérias 
 Cultura: cresce facilmente nos meios utilizados para o crescimento de enterobactérias (MacConkey); porém, não fermenta a lactose.
 Testes bioquimicos: testes de assimilação de aminoácidos
 TSA
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Pseudomonas aeruginosa
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Princípio: baseia-se na capacidade de produção de enzimas oxidativas que na presença de oxigênio e de aminas aromáticas reagem produzindo um composto colorido. A oxidase oxida o oxigênio da glicose.
Prova de Oxidase
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Diagnóstico Laboratorial – P. aeruginosa
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Diagnóstico imunológico
Diagnóstico Molecular
PCR em tempo real
Hibridização
“Finger print”
RNA ribossômico
- Elucidação de surtos hospitalares
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Surto de bacteremia por Pseudomonas aeruginosa 
em uma unidade de hemodiálise 
Hemocultura de 11 pacientes ......... P. aeruginosa (4) 
Água – P. aeruginosa e B. cepacia
Sorotipos 
Piocinotipos
Ribotipos
Amostras dos pacientes e da água de hemodiálise:
As Pseudomonas isoladas tem o mesmo perfil do isolado na
Água de hemodiálise
As amostras de Pseudomonas: O4 O7 O10 O11
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Surto Infecção Hospitalar
Pseudomonas aeruginosa
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Kb
6.3
3.2
1.5
4,5,6,7, Pseudomonas eruginosa
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Surto de Acinetobacter baumannii ESBL 
Hemocultura de 13 RN em um berçário
7 hemoculturas positivas
Foi encontrado na toalha de papel o mesmo patógeno com o mesmo perfil de DNA
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Ab
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 Epidemiologia e Controle
 P. aeruginosa é um patógeno hospitalar
 As pseudomonas crescem em ambientes úmidos (pias, banheiras, chuveiros, banhos quentes e outras áreas úmidas)
 A vacina de tipos apropriados em pacientes de alto risco, confere alguma proteção contra a sepse por Pseudomonas 
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O sítio mais freqüente da colonização é o trato gastrintestinal, podendo colonizar outros sítios úmidos do corpo como a orofaringe, mucosa oral e superfícies da pele, como as axilas e períneo.
Os pacientes hospitalizados constituem importantes reservatórios, especialmente aqueles internados em unidades de tratamento intensivo.
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Acinetobacter spp
Bacilos ou Cocobacilo Gram-negativo.*
 Aeróbio estrito, imóvel.
Colônias convexas.
Cresce bem em MacConkey (lactose -).
 Resistência à penicilina.
 A. baumannii catalase positivo.
 * Características morfo-tintoriais semelhantes às dos gêneros
 Moraxella e Neisseria.
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Distribuição ampla no solo e na água; em certas ocasiões, na pele, mucosa e secreções
 Em geral, apresentam-se na forma de cocobacilos ou cocos (semelhante a Neisseria) e bastonetes
 pode ser oxidase lentamente positivo
 São freqüentemente comensais, porém podem provocar infecção hospitalar
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O A . baumannii e A. lwof são as espécies mais importante na clínica
 Infecção associada a dispositivos (cateteres intravenosos, tubo orotraqueal e etc)
 As cepas de Acinetobacter são freqüentemente resistentes a agentes antimicrobianos 
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Diagnóstico Laboratorial:
Isolamento
Identificação – provas bioquímicas:
► Oxidase
► Morfologia
► Crescimento à 42 °C
► Gelatina
TSA
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Diagnóstico imunológico
Diagnóstico molecular:
PCR em tempo real
Hibridização
“Finger print”
RNA ribossômico
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PATÓGENOS OPORTUNISTAS QUE APRESENTAM
 RESISTÊNCIA INTRÍNSECA &
ADQUIRIDA 
A VÁRIOS ANTIMICROBIANOS 
Pseudomonas spp & Acinetobacter spp. 
 CLSI: padronização de TSA para Pseudomonas aeruginosa (16-18h), Acinetobacter spp., Burkolderia cepacia e S. maltophilia (20-24h).
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