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26/08/13 1 Inclusões celulares Disciplina: Farmacobotânica Obrigatória no Brasil desde 1920 Dr. Ionaldo J. L. Diniz Basílio ionaldobasilio@gmail.com Universidade Federal da Paraíba Centro de Ciências da Saúde Departamento de Ciências Farmacêuticas OBJETIVOS • Fornecer subsídios à caracterização e identificação de diferentes tipos de inclusões, principalmente amidos e féculas utilizados na industria de alimentos e medicamentos INCLUSÕES CELULARES Produtos do metabolismo Atividades do protoplasma citoplasma + núcleo Definição 26/08/13 2 INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Cristalóide Globóide Semente – Ricinus communis “ mamona” (Fucsina básica 0,5% → lugol) INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Folhas – Cunila microcephala Benth. (desidratação - Luz polarizada) Toledo et al., Rev. Bras. Cienc. Farm. 40(4): 487-493. 2004 INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Folhas – Lippia filifolia Mart. (Reagente de Nadi) 26/08/13 3 INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Folhas – Mitchella repens L. (Luz polarizada) INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Folhas – Ginkgo biloba L. (Luz polarizada) INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Casca – Cinchona officinalis L. (Luz polarizada) 26/08/13 4 INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Bulbo – Allium sativum L. (Luz não polarizada) INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Bulbo – Quillaja saponaria Molina (Luz polarizada) INCLUSÕES CELULARES Classificação - quanto a natureza química Orgânica Amidos e féculas Aleuronas Inulinas Óleos Inorgânica Ráfides Drusas Areia cristalina Cristais prismáticos Cristais estiloides Cistólitos Folhas – Ficus elastica Roxb. (Luz não polarizada) 26/08/13 5 AMILOS Trilicum aestivum L. (Frutos) “Trigo” Solanum tuberosum L. (Tubérculos) “Batata” Substâncias amilíferas Partes aéreas AMIDO Orgãos subterrâneas FÉCULAS AMILOS Histórico Chinesa / Egípcia Grega – trigo “Amylum” Egípcios (Ebers papyrus, 1550 aC) 20 m compr. AMILOS - Composição química Amilopectina (80%) • 1400 resíduos • Ramificada Polissacarídeo: reserva energética Polímero de glicose (fotossíntese) α (1-4) α (1-6) Amilose (20%) • 250-300 resíduos • Linear helicoidal 26/08/13 6 AMILOS - Composição química Amido Amilose % Amilopectina % Trigo 25-26% ~75% Arroz 22% 78% Milho 24-28% ~75 Batata ~20% ~80% Mandioca 17% 83% AMILOS – Produção mundial Amilos (2008-2010) Amido de milho 52 % Fécula de mandioca 34 % Amido de Trigo 5 % Fécula de Batata 7 % Outros amidos 2 % AMILOS - Importância Farmacêutica Agente aglutinante e lubrificante Amido de milho (5-10 %) Comprimido Amido de milho 8% de umidade 26/08/13 7 GELIFICAR AMILOS - Importância Farmacêutica Pomada Amilo + Glicerina Polietilenoglicol Sorbitol ∆ AMILOS - Importância Farmacêutica Microcapsulas com amidos modificados Secagem por aspersão (Spray Dryer) AMILOS – Aspectos gerais Pó branco Fino Inodoro Insípido 26/08/13 8 AMILOS – Caracterização Luz polarizada ↓ Cruz de Malta Solanum tuberosum L. “Batata” © Karen A. McMahon AMILOS – Caracterização Hilo Estrias H2O/∆ PERDE AS ESTRIAS Cloral hidratado (60%) SOLÚVEL H2O frio Acetona Éter Etanol INSOLÚVEL AMILOS – Caracterização Hilo Estrias Hidrólise HCl / ∆ SUSPENSÃO TURVA ESBRANQUIÇADA 26/08/13 9 AMILOS – Caracterização INATACÁVEL Féculas de Araruta Maranta arundinacea L. Féculas de Batata Solanum tuberosum L. KOH 0,9% GELEIFICA AMILOS – Caracterização Cloreto de zinco iodado 1 Paredes celulósicas e hemicelulósica → AZUL Paredes lignificadas → AMARELO Lugol 2 1. STRASBURGER, E. Handbook of practical botany. 7.ed. London: George Allen, 1913. 527p. 2. JENSEN, W.A. Botanical histochemistry. WH Freeman and Co, San Francisco, 1962. AMILOS - Características Estrutura Forma Tipo de hilo Estado de agregação Esféricas Ovóides Poliédricas Homogêneas Estratificadas Puntiforme Linear Cruciforme Estrelado Circular Poliedrico Isolados Compostos Posição do hilo Céntrico Excéntricos Hilo Estrias 26/08/13 10 AMILOS – hilo Cêntrico Circular Cêntrico Estrelado Excêntrico Estrelado Hilo não evidente Excêntrico duplo Circular AMILOS – Farmacopeia Farmacêutica Amido de trigo Frutos - Triticum vulgare L. Poaceae Amido de milho Sementes -Zea mays L. Poaceae Amido de arroz Frutos - Oryza sativa L. Poaceae Fécula de mandioca Tubérculos - Manihot esculenta Crantz. Euphorbiaceae Fécula de batata Tubérculos - Solanum tuberosum L. Solanaceae AMILOS Amido de trigo Frutos - Triticum vulgare L. (Poaceae) Grãos: > esféricos a ovóides < globulares Estrias: concêntricas pouco visível Hilo: pontuação raro Tam.: 20-40 µm Luz polarizada: cruz de malta pouco visível 26/08/13 11 AMILOS Amido de milho Sementes -Zea mays L. (Poaceae) Grãos: poliédricos (vértices evidentes) Estrias: raramente visíveis Hilo: pontuado (estrelado) Tam.: 30 µm Luz polarizada: cruz de malta visível AMILOS Amido de arroz Frutos - Oryza sativa L. (Poaceae) Grãos: poliédricos (ângulos agudos e arestas retas) - Agregados irregularmente Estrias: ausente Hilo: pontuado e central Tam.: 2-10 µm Luz polarizada: cruz de malta visível AMILOS Fécula de batata Tubérculos - Solanum tuberosum L. (Solanaceae) Grãos: elipsoides, ovais, piriformes - Agregados (2 ou mais elementos) Estrias: excêntricas Hilo: pontuado e excêntrico Tam.: 40-70 µm Luz polarizada:cruz de malta visível 26/08/13 12 AMILOS Fécula de mandioca Tubérculos - Manihot esculenta Crantz. (Euphorbiaceae) Grãos: esféricos ou arredondados - Agregados (2-3 elementos) Estrias: ausente Hilo: pontuado (linear ou estrelado) Tam.: 25-35 µm Luz polarizada: cruz de malta visível AMILOS EM PÓ – Identificação Método A 1. Amostra (1g) + H2O fria (2 ml) 2. + H2O fervente (15ml) 3. Ferver brandamente (2 min.) 4. Resfriar Resultado positivo: produto gelatinoso, claro e translúcido AMILOS EM PÓ – Identificação Método B Mistura gelatinosa (teste A) + iodo (1 gota) COLORAÇÃO AZUL COLORAÇÃO DESAPARECE ∆ Resfriamento 26/08/13 13 Aleurona Considerações gerais Aleuron = farinha Reserva protéica (sementes maduras) Homogêneas – substância homogênea (fundamental) Heterogêneas – membrana limitante + globóide + cristalóide Aleurona Cristalóide Globóide Semente – Ricinus communis “ mamona” (Fucsina básica 0,5% → lugol) Aleurona Sementes – Ricinus communis (Azul de bromofenol) Cristalóide Globóide 26/08/13 14 Aleurona Importância Farmacêutica Cristalóide Globóide Globóides Inositol-hexafosfato de cálcio e magnésio (fitina) Cristalóides Natureza protéica Cereais Hipercalciúria – reposição de cálcio Aleurona Substância protéica 1 - Pêlos (barba) 2 - Epiderme 3 - Hipoderme 4 - Células Cruzadas 5 - Células Tubulares 6 - Testa 7 - Hialina 8 - Aleurona 9 - Casca 10 - Endosperma 11 – Germe Fonte: EMBRAPA - CTAA - (Manual EMBRAPA - pp. 16) Inulina Considerações gerais Gênero Inula (Asteraceae ) Polissacarídeo = Frutose + Glicose (3:1) Peso molecular = 5.000 u.m.a Solúvel em H2O / ∆ Dissolvida no suco vacuolar 26/08/13 15 Inulina Folhas – Cunila microcephala Benth. (Lamiaceae) Desidratação EtOH → Glicerina → esferocristais Toledo et al. 2004. Rev. Bras. Cienc. Farm. 40 (4): 487-493. Inulina Importância Previne a constipação Tratamento de hipercolesterolêmicos Inibi a reabsorção de sódio (diurético) Schneeman BO. Fiber, inulin and oligofructose: similarities and differences. J. Nutr. 1999;129(7 Suppl):1424S-7S. Niness KR. Inulin and oligofructose: what are they? J. Nutr. 1999;129(7 Suppl):1402S-6S. Óleos 1. Reagente de NADI 2. Temp. ambiente (escuro) 3. Tampão fosfato 0,1M, pH 2 (2 min.) AZUL Oleos essenciais VERMELHO Resina 26/08/13 16 Cristais agrupados Drusas Drusas 26/08/13 17 Drusas Ráfides 1. Folha de Mitchella repens leaf (luz polarizada; secção longitudinal) 2. Raiz de Cephaelis ipecacuanha (não polarizada) 1 2 Ráfides 26/08/13 18 Cristais prismáticos Bulbo de Allium sativum bulb Cristais estilóides Cistólito Folhas – Urtica dioica Folhas – Ficus elastica Roxb. (Luz não polarizada) 26/08/13 19 Cistólito Resumo Inclusões celulares •Definição •Classificação Amilos (amidos e féculas) •Histórico •Composição química •Produção mundial •Importância farmacêutica •Aspectos gerais •Caracterização •Características estruturais Farmacopeia Brasileira •Métodos de identificação Outras inclusões Referência básica 26/08/13 20 Referências adicionais
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