Observação de células de cebola ao microscópio

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INTRODUÇÃO
Uma das hortaliças mais cultivadas e antigas do mundo, a cebola é alimento, tempero e remédio. Planta de textura herbácea, ela apresenta folhas cilíndricas, ocas, verdes, macias e aromáticas. Apresenta um bulbo tunicado de tamanho variável, formado por camadas sobrepostas e concêntricas das bainhas das folhas, carnosas e suculentas, que acumulam material de reserva.
Na superfície côncava de cada uma dessas túnicas existe uma epiderme, ou seja, uma película, facilmente destacável e constituída por uma só camada de células (FREITAS, 2003).
O bulbo é recoberto exteriormente por membranas delgadas e secas, que podem ser amarelas, brancas, marrons ou roxas. O caule verdadeiro está localizado na extremidade inferior do bulbo, e emite raízes fasciculadas e pouco profundas.
A invenção do microscópio, cerca de 400 anos atrás, começou a revelar à humanidade o mundo minúsculo das células e dos microorganismos. Os estudos continuaram e os microscópios foram sendo gradativamente aperfeiçoados. Com isso, obtiveram-se imagens cada vez mais nítidas do mundo microscópico, que permitiam observações e descrições mais rigorosas.
O azul de metileno é usado como um corante para um grande número de diferentes procedimentos de coloração, tais como as colorações de Gram, Wright, e Jenner. Desde que ele é uma técnica de coloração temporária, azul de metileno pode também ser usado para examinar RNA ou DNA sob o microscópio ou em um gel.
O soluto de Lugol, por sua vez, evidencia os elementos celulares em preparações extemporâneas e cora amiloplastos, já que possui afinidade com a estrutura dos grãos de amido, armazenados em grande quantidade nesse compartimento (FREITAS, 2003).
 OBJETIVO
Observar a célula vegetal 
Observar a parede celular, citoplasma, núcleo,células normais,células plasmolisadas
MATERIAL
Todos os materiais utilizados no experimento estão descritos na tabela 1.
	 Materiais
	 Reagentes
	Cebola (Allium cepa)
	 Solução de Lugol a 2%
	 Pipeta paster
	 Azul de metileno a 1%
	 Lamínula
	 Solução Fisiológica 
	 Estilete
	 Água
	 Papel toalha
	
	 Pinça
	
	 Lâmina
	
Tabela1.Materiais e reagentes utilizados na prática
PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 
Para realização do procedimento experimental para analise, retirou-se um fragmento de um catafilo de cebola para obter a epiderme interna , em seguida colocou-se a epiderme da cebola em uma gota de água na lamina, cobriu-se o material de analise com a lamínula e observaram-se no microscópio os componentes celular do material
Para a segunda analise, colou-se um fragmento de catafilo de cebola em vidro relógio contento a solução de lugol, aguardou alguns minutos, e em seguida lavou-se com água destilada o catafilo e montou-se o corte para observação ao microscópio.
Repetiu-se o mesmo procedimento anterior e acrescentou-se uma gota de azul de metileno, pressionou-se levemente a lamínula para retirar as bolhas e secar o excesso com papel toalha em seguida realizou-se a observação.
Por fim, colocou-se um novo fragmento de catafilo de cebola por alguns segundo em solução fisiológica e observou-se em microscópio.
RESULTADOS
Ao observar os fragmentos em microscópio obtivemos os seguintes resultados 
Figura 1. Observação da epiderme da cebola em aumento de 10x sem adição de nenhuma solução
1
2
3
Figura 2. Observação da epiderme da cebola em aumento de 40x sem adição de nenhuma solução
1-Núcleo 			
2-Parede Celular	
3-Citoplasma
CONCLUSÃO
Figura 3. Observação da epiderme da cebola em aumento de 10x com adição de solução de lugoul
1
2
3
4
Figura 4. Observação da epiderme da cebola em aumento de 40x com adição de solução de lugoul
1-Núcleo	
2- Parede Celular 
3-Amiloplastos
4-Citoplasma
1
Figura5. Observação da epiderme da cebola em amento de 10x com adição solução de Azul de Metileno
3
2
Figura 6. Observação epiderme da cebola em aumento de 40x com adição solução de Azul de Metileno
1- Citoplasma
2-Núcleo 
3- Parede Celular 
Figura 7. Observação da epiderme da cebola em aumento de 10x com adição de soro fisiológico 
1
Figura 8. Observação da célula em aumento 40x com adição de soro fisiológico
1-Citoplasma
QUESTIONARIO 
Faça um Fluxograma com os passos da preparação do material para observação ao Microscópio.
Cebola 
(Allium cepa)
Fragmento de catafilo de cebola
Catafilo de Cebola em um vidro de relógio com lugoul
Catafilo de cebola em vidro relógio com 1gota de azul de metileno
1 gota de água na lamina
Catafilo de cebola vidro relógio com soro fisiológico 
Lavar com água destilada 
Colocar na lamina e pressionar levemente a lamínula para retirar as bolhas de ar e secar com papel
Colocar na lamina e pressionar levemente a lamínula para retirar as bolhas de ar e secar com papel
Epiderme sobre gota de água 
Cobrir o material com lamínula na lamina
Cobrir o material lamínula
Observar a amostra ao Microscópio
Quais as estruturas que foram visualizadas sem o uso de corantes em cada uma das amostras? Desenhe.
Qual a finalidade de utilizar corantes?
	Resposta: Os corantes ajudam á identificar melhor, as partes das amostras á serem analisadas. Podem intensificar e mostrar mais claramente o que deseja visualizar de acordo com cada amostra.
Quais as estruturas celulares que foram evidenciadas com o uso de solução de Lugol?
	Resposta: Alguns filamentos da parede celular, núcleo, e também algumas bolhas de ar e água na estrutura.
Quais as estruturas celulares que foram evidenciadas com o uso de Azul de Metileno?
	Resposta: Basicamente as mesmas estruturas com Lugol, parede celular, núcleo, bolhas de agua e ar, e também fracamente a membrana celular.
O que é um corante seletivo?
	Resposta: São corantes que evidenciam melhor as estruturas analisadas, cada um da sua maneira, já que o que prevalece é a carga elétrica e o PH de cada sustância analisada, a forma de como essa amostra irá reagir com o corante.
Quais são as características da parede celular?
	Resposta: AS paredes celulares são formadas por celulose, pectose, ácidos pécticos, ácidos metapícticos e a calose.Determinam o tamanho e forma da célula, é semirrígida, totalmente impermeável , possui grande resistência e tensão. É resistente á lise e sustentação, e age como defesa da célula contra patógenos , produzindo lignina que age como uma barreira e sinais ao protoplasma para produção de defesa.
O que é plasmólise?
	Resposta:Trata-se de um processo que ocorre a osmose, ou seja, quando a célula vegetal é submetida á um hipertônico , que por sua vez libera agua do vacúolo. Desta forma, causa uma alta contração do volume da célula e citoplasma , que se desprenderão parcialmente da membrana.
Explique o processo de plasmólise na célula Vegetal de acordo com as observações das aulas praticas.
	Resposta: Primeiramente observamos o catafilo, após ser emergido em agua destilada, sem corante.
Em seguida, colocamos novamente outro catafilo na solução de Lugol, onde conseguimos identificar melhor, alguns filamentos da parede celular, núcleo, e devido a presença de bolhas de ar e agua, ficou um pouco complicado para uma visualização mais a fundo.
Após este procedimento, colocamos outro corante, o Azul de Metlieno,onde as observações ficaram mais visíveis com a lente de aumento maior.
 O terceiro e ultimo procedimento, fio analisar a catafilo no Soro, onde conseguimos identificar melhor,a membrana celular retraída, e a presença de 4 células mais visíveis, juntamente com sua parede celular, citoplasma e núcleo.
DISCUSSÃO
Após a observação das laminas contendo o bulbo da cebola, foi possui observar que todos os seres vivos são formados por uma ou várias células e que estas têm formadores básicos iguais, como membrana celular, parede celular, epiderme, citoplasma e núcleo.
 
As técnicas de coloração foram essenciais na observação das células pois facilitam a  visualização das mesmas, evidenciando determinadas estruturas pelo uso de corantes. Assim, podendo verificar que cada corante atua de modo diferente na célula. 
 
Com o uso do soluto de Lugol foi  possível evidenciar os amiloplastos, que são vesículas de armazenamento de amido, uma substância de reserva das células vegetais. O corante azul de metileno permitiu a observação dos núcleos.
CONCLUSÃO
Através da Microscopia e técnicas de coloração , a qual foi evidenciada pela utilização da água destilada, Lugol , Azul de Metileno e Soro, podemos visualizar melhor as células e seus componentes, como a membrana, citoplasma e núcleo, da cebola, especificamente , Allium cepa.
Levando em consideração, as lentes de aumento do Microscópio, que com seu alto grau de visualização, apesar de bolhas de ar e água, nos conceituou as diversas formas e tamanhos existentes das células analisadas.
Sendo assim, podemos identificar melhor as diferenças que as células vegetais possuem , em vista das células animais.
Desta forma, concluímos, que alcançamos todos os objetivos abordados, e também aprendemos a manusear melhor o Microscópio e materiais utilizados, e claro, conseguimos observar melhor a maneira que cada corante age, nos mostrando partes das células, como membrana, citoplasma, parede celular e núcleo. Por fim, foi muito satisfatório e enriquecedor estre trabalho.
REFERENCIAS 
NABORS, M. W. Introdução à Botânica. Editora ROCA Ltda. São Paulo. 2012. Acesso: 11 de setembro de2018, 07:20. Disponível na Internet:
http://portal.virtual.ufpb.br/biologia/novo_site/Biblioteca/Livro_4/7-Anatomia_Vegetal.pdf
Versão On-line ISBN 978-85-8015-075-9-Cadernos PDE Autor Daniel Donato de Souza 2013.Estudos Avançados Print version ISSN 0103-4014On-line version ISSN 1806-acesso: 11 de setembro de 2018,07:25. Disponível na Internet: 
http://www.diaadiaeducacao.pr.gov.br/portals/cadernospde/pdebusca/producoes_pde/2013/2013_uepg_bio_pdp_daniel_donato_de_souza.pdf
Estud. av. vol.30 no.87 São Paulo- May./Aug.2016 –acesso: 11 de setembro de 2018. 07:30.Disponível na Internet: 
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-40142016000200177
FREITAS, Eduardo. Observação de células a epiderme do bulbo da cebola (Allium cepa). Funchal: Escola Secundária Francisco Franco. N. 5; out 2003
CEBOLA-Allium cepa. Jardineiro.net. Disponível em :
http://www.jardineiro.net/br/banco/allium_cepa.php Acesso em 10 de setembro de 2018