Teste da solubilidade em bile

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Teste da solubilidade em bile 
 
Detergentes fracos, como os sais biliares desoxicolato de sódio ou taurocolato de sódio têm a 
capacidade de lisar seletivamente o S. pneumoniae. Estes sais ativam as enzimas autolíticas 
(autolisinas) produzidas pelo pneumococo, acelerando a reação lítica natural da bactéria. 
A turvação produzida por uma suspensão de pneumococo ficará completa ou parcialmente 
límpida ao se adicionar os sais biliares. Em meio sólido, as colônias bile-solúveis “desaparecem” 
em contato com algumas gotas de solução destes sais e o teste é um pouco mais difícil de ser 
visualizado. 
PROCEDIMENTO 
 Preparar uma suspensão bacteriana densa a partir da cultura recente, que não tenha 
ultrapassado 18-24 horas de incubação; 
 Separar dois tubos de ensaio com transparência adequada para observar a presença de 
suspensão bacteriana. Marcar um com “C” (tubo controle) e outro com “T” (tubo teste); 
 Adicionar solução de desoxicolato de sódio a 2% ao tubo “T” e solução salina a 0,85% ao 
tubo “C”. Os volumes em cada tubo devem ser iguais, pequenos, mas suficientes para 
fazer a leitura, por exemplo, 0,5 mL. Adicionar a cada tubo o mesmo volume, por exemplo, 
0,5 mL da suspensão bacteriana; 
 Homogeneizar e fazer a leitura imediatamente, após 1h e até 2h de incubação a 35 ºC 
(±2ºC). 
 
INTERPRETAÇÃO 
A leitura é feita observando a turvação do tubo T em relação ao tubo C. Verificar se o tubo C 
apresenta uma suspensão homogênea da cultura em solução salina. Compará-lo com o conteúdo 
do tubo teste, contendo a cultura em desoxicolato de sódio. 
Se o tubo T apresentar turvação visivelmente menor que o controle ou estiver límpido, o teste é 
positivo e identifica Streptococcus pneumoniae. 
 
C T 
Negativo 
Positivo 
S. pneumoniae