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1 2A LISTA DE EXERCÍCIOS EQB 367 e EQB366 - FUNDAMENTOS DE ENGENHARIA BIOQUÍMICA CONTEÚDO: CRESCIMENTO MICROBIANO E PROCESSOS CONTÍNUOS 1) Durante o crescimento exponencial de uma bactéria, em processo descontínuo, a concentração de células aumentou de 2,1 para 3,2 g/L, em, exatamente, 15 minutos. Calcule a taxa específica de crescimento do microorganismo. 2) A partir da equação de crescimento microbiano na fase exponencial, desenvolva uma expressão que permita o cálculo do tempo de duplicação da biomassa celular nesta fase e calcule este tempo para os dados fornecidos no exercício anterior. 3) Os dados fornecidos abaixo foram obtidos para o crescimento, em meio simples, da bactéria Aerobacter aerogenes. A curva de calibração da absorvância relacionada ao peso de matéria seca (X, em g/L) resultou na seguinte expressão: Abs = 0,0501 * X. Tempo (min) 0 49 78 107 139 168 201 230 238 259 321 346 376 400 Abs 0,08 0,09 0,09 0,11 0,14 0,17 0,21 0,26 0,34 0,39 0,46 0,48 0,48 0,48 O fator de rendimento de células em relação ao consumo de substrato foi de 0,4 g de células formadas/g de glicose consumida, sendo a concentração inicial de glicose igual a 20 g/L. Estabeleça graficamente o perfil de crescimento do microorganismo, indicando as suas fases e respectivas durações e, também, a curva de consumo de substrato. Determine a taxa específica de crescimento e o tempo de duplicação na fase exponencial. 4) Meio estéril é alimentado a um fermentador de volume útil igual a 3,25 litros, a uma vazão volumétrica de 15 mL/min. Qual é a taxa de diluição deste sistema e quais os valores do tempo de residência e o tempo de duplicação do agente, nessas condições? 5) Estudos sobre o crescimento de Escherichia coli em biorreator operando continuamente resultaram nos valores dados abaixo para a concentração de substrato para cada estado permanente. D (h-1) 1,06 0,97 0,83 0,78 0,70 0,58 0,39 S (g/L) 2,0 1,0 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 Determine os valores da taxa específica máxima de crescimento (máx.) e da constante de saturação (KS). 6) 80 Kg de melaço, contendo 55% (P/P) de açúcares redutores totais foram processados, visando a obtenção de biomassa microbiana. Empregou-se como inóculo 200 L de uma suspensão contendo 3,8 g de células por litro. Após a inoculação, o volume total contido no biorreator foi de 2000 L. O crescimento se deu, do início ao fim, em fase exponencial, com 24 horas de duração, apresentando uma taxa específica de crescimento de 0,14 h-1. 2 Com base nestes dados, calcular: a. O fator de conversão de substrato em células, supondo consumo total de substrato. b. Plotar as curvas de crescimento celular e de consumo de substrato. 7) Com base no exercício anterior, suponha que, devido a um erro no preparo do meio, empregou-se 60 Kg de melaço, ao invés da quantidade correta. Nesta situação, em quantas horas ocorrerá o consumo total de substrato. 8) Em um processo contínuo, conduzido em biorreator de mistura completa, operando em estado permanente, um microorganismo X transforma um substrato S em um produto P. O fator de conversão de substrato em células (YX/S) é igual a 0,8 g de células/g de substrato consumido e o fator de conversão de substrato em produto (YP/S) é igual a 0,5 g de produto/g de substrato consumido. O biorreator é alimentado com mosto estéril, contendo 100 g de substrato/litro. A taxa de formação de produto é de 20 g/L.h e a concentração de células no efluente é igual a 35 g/L. Com base nestes dados, calcular: a. A taxa específica de crescimento () b. A taxa específica de consumo de substrato (-qS) c. A taxa específica de formação de produto (qP) d. O fator de rendimento de produto em relação à biomassa (YP/X) e. A concentração de substrato no efluente f. A concentração de produto no efluente 9) No acompanhamento do crescimento de uma levedura foram obtidos os seguintes dados: Tempo (h) 0 1 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 S (g/L) 20 20 19,98 19,96 19,81 19,62 18,70 18,20 17,70 16,80 15,80 14,35 Tempo (h) 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 S (g/L) 12,60 10,40 7,60 5,02 3,10 1,68 1,00 0,46 0,20 0,18 0,19 0,17 Empregou-se concentração de inóculo igual a 0,18 g/L, sendo o fator de conversão de substrato em células (YX/S) constante igual a 0,40 g de células/g de substrato consumido. A partir desses dados: a. Indicar em um gráfico de Ln X x tempo as fases da curva de crescimento. b. Determinar o valor da taxa específica de crescimento na fase exponencial. 10) Numa instalação industrial para obtenção de proteína microbiana, utiliza-se melaço de cana como matéria-prima, sendo o microorganismo em pregado uma variedade selecionada de Torula utilis. Abaixo relacionados encontram-se os dados relativos ao processo de crescimento do bio-agente supra mencionado. Volume de inóculo 100 L Concentração de inóculo 1 mg célula/ ml meio Volume total de mosto no biorreator + inóculo 10.000 L Tempo de Fermentação 23 h 3 Velocidade específica de crescimento (nestas condições não ocorre fase lag) = 0,3 h -1 Quantidade de melaço/batelada 400 Kg Teor de ART no melaço 55 % (p/p) Concentração final de ART no mosto fermentado 2 g/L Com base nestes resultados pede-se: a. Rendimento do processo fermentativo, exprimindo a resposta em peso de células por peso de ART fermentado. b. Rendimento em relação a matéria-prima.