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BIOENERGETICA A acetil-Coa é metabolizada a CO2 em um conjunto de reações de oxirredução as quais ocorrem na MATRIZ MITOCONDRIAL, denominada de ciclos dos ácidos tricarboxilicos. VERDADEIRA. Sobre o caso relatado acima (síndrome de Leigh) é correto afirmar que não há alteração na capacidade de realizar respiração celular nas células da paciente. – FALSA, pois há um defeito na fosforilação oxidativa envolvendo múltiplas alterações genéticas tanto no complexo piruvato desidrogenase responsável por formar acetilcoa quanto no citocromo C oxidase. Os elevados níveis de lactato encontrados nos portadores da síndrome de Leigh são decorrentes das deficiências mencionadas no textos, as quais ocorrem na parte mitocondrial do catabolismo da glicose. VERDADEIRA. O complexo citocromo C oxidase (complexo IV) faz parte da glicólise. – FALSA, faz parte da cadeia transportadora de elétrons. É correto afirmar que portadores da síndrome de Leigh possuem metabolismo oxidativo e realizam mais síntese de ATP pela ATP sintase. – FALSA, pelo contrário há uma deficiência no metabolismo oxidativo e na geração de ATP celular. Portadores da síndrome de leigh realizam mais fermentação que outras pessoas. VERDADEIRA. SOBRE ORGANIZAÇÃO E O PROCESSO DE REPLICAÇÃO DO GENOMA: Para que ocorra a síntese de DNA, é necessária a síntese de primers de RNA, pois a DNA polimerase só atua a partir de uma extremidade 3´livre. – FALSA, a DNA polimerase não só pode ligar um nucleotídeo a um nucleotídeo pareado na dupla hélice de DNA. O primer é pareado à fita molde e fornece a extremidade 3´pareada como um ponto de início para a DNA polimerase. O genoma bacteriano é circular apresenta genes monocistrônicos. – FALSO, é policistrônico, ou seja, um mesmo RNA vai codificar mais de uma proteína. Além do genoma principal, bactérias podem apresentar plasmídeos, os quais são pequenas moléculas de DNA circular que apresentam replicação independente do ciclo celular. VERDADEIRA. Devido a abertura bidirecional da forquilha, uma das fitas de DNA é sintetizada de forma descontinua gerando fragmentos de okasaki. VERDADEIRA. Em procariotos a fita descontinua gera extremidades mais curtas, sendo necessária a ação da telomerase para a ampliação da fita molde e compensação da perda do DNA. – FALSA, a telomerase atua em eucariotos uma vez que seu DNA é linear noe a síntese da fita retardada para um pouco antes do final do molde sendo necessário então uma porção de DNA-molde que se estenda além do DNA a ser copiado. SOBRE O PROCESSO DE SÍNTESE PROTEICA E A SUA REGULAÇÃO. Em células procarióticas, o códon de iniciação do mRNA é sempre o primeiro códon GGA após a região CAP 5´. FALSA, a região CAP 5´é em eucariotos, e a sequência iniciadora é AUG. Um mesmo RNA transportador pode se ligar a mais de um mesmo códon devido ao pareamento oscilante. VERDADEIRA. A síntese proteica em procariotos e eucariotos é mediada por fatores de tradução que atuam nas etapas de iniciação, alongamento da proteína e terminação da síntese. VERDADEIRA. mRNAs podem ser degradados antes de serem traduzidos pela ação de siRNAs no citosol. VERDADEIRA. Após a tradução as proteínas produzidas no citosol podem permanecer nele até que sejam ubiquitinadas e degradadas nos proteossomos e essas proteínas normalmente apresentam sequencias PESTS. VERDADEIRA. A RESPEITO DA REGULAÇÃO GENICA: Em eucariotos o sitio de iniciação da transcrição é reconhecido pelo fator sigma presente na RNA polimerase de eucariotos. – FALSA, é em procariotos. Em procariotos, após a sua síntese, o RNA precisa passar por diferentes etapas de processamento, tais como adição de um CAP 5´e a inserção de uma cauda poli A. – FALSA, é em eucariotos. Em eucariotos, o RNA mensageiro passa por um processo de remoção dos introns que pode gerar variantes do RNA após a transcrição e este processo é chamado de splicing alternativo. VERDADEIRA. Após transcrito o mRNA pode não ser traduzido pois existem mecanismos de regulação da expressão genica pós-transicionais como os micro RNAs citosolicos que podem degradar mRNAs alvos via complexo RISC. VERDADEIRA. Os corpos p são sítios de degradação de mRNAs citosolicos. VERDADEIRA. Existem vários níveis de regulação da expressão genica em células eucarióticas, atuando eles ao nível do DNA, do RNA e das proteínas. VERDADEIRA. A expressão genica pode ser regulada ao nível do DNA, pela alteração do seu grau de compactação e isso se dá por alterações nas caudas das histonas, tais como: acetilações, metilações e fosforilações. VERDADEIRA. RNAs inativos nas células podem ser encaminhados para a degradação em organelas denominadas de corpos p. VERDADEIRA. A técnica de RNAi (de interferência) citada acima se refere à uma aplicação de um mecanismo de regulação pos-transcricional utilizando RNA mensageiros exógenos. FALSA, é utilizado microRNA. A RESPEITO DO CICLO CELULAR: Na metáfase, a célula apresenta mínima expressão genica e o seu DNA encontra-se muito compactado nas formas de eucromatina e heterocromatina. – FALSA, o DNA está compactado em cromossomos. Células permanentes saem do ciclo celular e permanecem em G1. – FALSA, elas não permanecem em G1 pois quando saem não voltam a se dividir. A complexo S-CDK é responsável por ativar a replicação pela fosforilação de proteínas ligadas a origem de replicação do DNA. VERDADEIRA. Após S a célula ainda pode reverter ou parar o ciclo celular sem danos celular ou morte. FALSA- Quando a célula entra no ciclo ela não pode mais sair, ou ela vai adiante ou morre. A proteína p53 atua na fase S do ciclo celular verificando se houve dano ao DNA. Ela é ativada quando há quebra do DNA, e caso não haja reparo, pode levar a célula a apoptose. VERDADEIRA. Na Metáfase a célula está em máxima atividade metabólica e seu DNA encontra-se pouco compactado nas formas de eucromatina e heterocromatina – FALSA, não está em máxima atividade metabólica e o DNA encontra-se muito compactado em cromossomos. A complexo M-CDK é responsável por ativar a fosforilação de proteínas ligadas a origem de replicação do DNA. – FALSA, ela atua na mitose, ela é responsável por dar o ok para a passagem da metáfase para a anáfase, ela atua principalmente no processo de compactação. Após G1 a célula não pode reverter o ciclo celular sem danos celulares ou morte. VERDADEIRA. A discinesia ciliar primaria é uma condição genética que compromete o batimento ciliar caracterizada por infecções recorrentes nas vias aéreas e falha pulmonar em decorrência de mau funcionamento das células cicliadas. Na imagem abaixo foi identificada uma mutação do tipo deleção no gene de uma serina/treonina cinase (STK36) em um indivíduo portador de PCD e foi verificado que a mutação afeta a formação dos cílios. Na figura A verificamos o sequenciamento de DNA e os aminoácidos correspondentes aos códons. É comparada a sequência de um indivíduo portador de PCD e um indivíduo saudável. VERDADEIRA Um indivíduo com PCD apresenta mutação que leva a perda do quadro de leitura da proteína STK36 no exon 12. VERDADEIRA A mutação de transversão observada na figura A poderia ter sido evitada pelos mecanismos de reparo do DNA durante o processo de replicação. FALSA, os mecanismo de reparo durante o processo de replicação atuam apenas sobre mal pareamento e quebras do DNA. Na Transversão é um processo no qual uma purina se torna uma pirimidina ou vice e versa, ou seja, uma citosina ou guanina se torna uma adenina ou guanina, ou nosentido inverso. Na figura B, são observadas as alterações morfológicas (fenótipos) pela técnica microscopia eletrônica de transmissão, onde são analisados os cílios de um doador saudável e os de um portador de PCD. VERDADEIRA. Se a mutação fosse de substituição ao invés de deleção na posição, por exemplo G1399A, os efeitos sobre a deformação dos cílios poderiam ser menores. VERDADEIRA. A síntese proteica consiste na tradução da informação contida do mRNA em uma sequência polipeptídica, processo este que é realizado pelos ribossomos. Uma parte dos antibióticos atua interferindo no processo de tradução. Analise a figura extraída de um artigo abaixo e marque V ou F. Legenda: nova droga antimalárica atua sobre a síntese proteica via inibição da eEF2. A proteína eEF2 é um fator de alongamento e promove a translocação do ribossomo sobre o mRNA durante a síntese proteica. VERDADEIRA. Na figura b podemos afirmar que cada sigla representa uma possível mutação de substituição onde as letras representam as trocas de aminoácidos e os números a posição deles na proteína. VERDADEIRA. Na figura c verificamos dois tipos diferentes de microscopia, sendo eles de fluorescência e contraste de interferência diferencial, respectivamente. VERDADEIRA. Na figura c, a proteína eEF2 é uma proteína citosolica pois não apresenta peptídeo sinal. VERDADEIRA De acordo com a figura a, podemos afirmar que 100% do mRNA é traduzido em proteína. FALSA SOBRE O PROCESSO DE MORTE CELULAR: O tipo de morte celular pode ser definido observando as características morfológicas, vias de sinalização e as consequências fisiológicas da morte. VERDADEIRA. A morte celular por apoptose é caracterizada pela intensa vacuolização do citoplasma, compactação e fragmentação do DNA, liberação de corpos apoptoticos e perda da integridade da membrana plasmática. FALSA, liberação de corpos apoptoticos e perda da integridade da membrana são características da morte celular por necrose. A morte celular por necrose é caracterizada pela ruptura da membrana plasmática e o extravasamento do conteúdo citoplasmático. VERDADEIRA. A morte celular por apoptose pode ser ativada pela via intrínseca, a qual envolve dano mitocondrial liberando citocromo c no citosol levando a formação do apoptossomo. VERDADEIRA Um vez ativadas, as caspases efetoras podem ativar endonucleases as quais originam as quebras do DNA características da morte celular por apoptose. VERDADEIRA. Na via extrínseca da apoptose os sinais são recepcionados por receptores intracelulares os quais ativam as vias de sinalização indutoras de morte celular. FALSA- os receptores não são intranucleares e sim de membrana uma vez que a via é extrínseca. São classificadas como vias intrínsecas e extrínsecas de acordo com o tipo de sinal indutor de morte que a célula recebe. VERDADEIRA. Os sinais indutores de morte podem partir de dentro da célula ocasionados por danos intracelulares. VERDAEIRA. Proteínas como a BAD são pro-apoptoticas porque inibem a bcl-2 e dessa forma induzem a liberação do citocromo c da mitocôndria, ativando a apoptose pela via intrínseca. VERDADEIRA. Proteínas de sinalização extracelular ligam-se a receptores de morte, como a proteína FAS, citada acima (texto sobre síndrome linfoproliferativa) disparando a via intrínseca da apoptose. FALSA, pois a via não é intrínseca e sim extrínseca. Apesar de não mencionada no texto, o citocromo C integra a mesma via do FAS denominada via extrínseca de apoptose. FALSA, o citocromo c integra a via intrínseca de apoptose. A ativação de FAS pelo ligante FASL na superfície do linfócito leva ao recrutamento de proteínas adaptadoras intracelulares as quais ativam caspases iniciadoras que clivam capsases executoras para induzir a célula a apoptose. VERDADEIRA. Bax e Bak, Bad e Bid são proteínas são proteínas pro-apoptoticas pois promovem a apoptose. VERDADEIRA Bcl2 e Bclx são proteínas antiapoptoticas pois inibem a apoptose. VERDADEIRA. QUESTAO COM IMAGEM DE ELETROFORESE SOBRE MORTE CELULAR QUE GERA PADROES DE FRAGMENTAÇÃO DO DNA. O DNA com a faixa corada por completo até 250 bp é o padrão molecular do DNA. O DNA com distancias entre os fragmentos são de células apoptoticas. O DNA corado lá bem curto é o de células viáveis, ele represente as milhões de bases no cromossomo que não vão correr no gel pois não está fragmentado. O DNA com uma fragmentação sem padrão é de uma célula em necrose. QUESTÃO SOBRE IMAGEM MOSTRANDO A EXPRESSÃO DIFERENCIAL DO FATOR DE CRESCIMENTO EPITELIAL EGF E DO SEU RECEPTOR EM CÉLULAS DE PACIENTES COM CÂNCER DE MAMA, USANDO A TÉCNICA NORTHEN BLOT. A expressão genica de TGF-alfa esta aumentada em células de paciente com câncer. VERDADEIRA A presença de duas bandas para EGFR na imagem da esquerda indica um evento de edição do mRNA. FALSA, edição não altera o tamanho da banda que era 10,5kb e foi para 5,8kb, o que aconteceu foi um splicing alternativo. O RNA 7S é um RNA ribossomal e por ter expressão constitutiva foi utilizado como controle da técnica. VERDADEIRA, pois o rna ribossomal está presente em todas as células, sejam saudáveis ou cancerosas e por isso é usada para controle. SOBRE MATRIZ EXTRA CELULAR, DIFERENCIAÇÃO CÉLULAS E NEOPLASIAS. Questão sobre escorbuto, doença provocada pela carência grave de vitamina C na dieta, que é importante para o corpo, pois ela é um cofator da enzima prolol-hidroxilase que faz a hidroxilação do aminoácido prolina nas cadeias alfa de colágeno quando a proteína ainda se encontra no reticulo endoplasmático rugoso. Essa hidroxilação é tão importante porque aumenta o número de ligações de hidrogênio na molécula e da maior rigidez ao colágeno que é a principal proteína estrutural do corpo. A matriz extracelular é importante para o processo de diferenciação celular por conter mitogenos, fatores de crescimento e de diferenciação. VERDADEIRA. A célula adere a matriz extracelular através de proteínas integrais de membrana denominadas integrinas as quais também participam do processo de sinalização celular. VERDADEIRA. A molécula mencionada no texto acima é a queratina a qual so assume sua conformação final após a digestão com proteases no ambiente extracelular. FALSA. Sobre a doença citada acima, trata-se de um defeito na capacidade da célula realizar modificações pos-traducionais em uma das proteínas que compõe a matriz extracelular, ainda no reticulo endoplasmático e no complexo de golgi. VERDADEIRA. Dentre as funções na matriz extracelular estão o preenchimento do espaço entre as células, a delimitação dos espaços de migração das células, promoção da resistência do tecido, sendo o meio de chegada de nutrientes as células e de eliminação dos metabolitos. VERDADEIRA. QUESTÃO SOBRE A SINDROME DE EHLERS DANLOS: Na doença mencionada acima, as pessoas portadoras não produzem colágeno, o que compromete a estrutura dos seus tecidos conectivos. FALSA, há um defeito na síntese do colágeno o compromete a resistência a deformações, mas ele é produzido, só que não da maneira de deveria. Não há cura para a SED, pois sendo uma doença genética não há como reverter as mutações que comprometem a produção dos peptídeos de pro-colágeno no meio extracelular. FALSA, porque é no meio intracelular. Sendo o colágeno uma proteína fibrilar, mutações que levassem ao enovelamento dessas proteínas poderiam encaminha-las para a degradação nos corpos p. FALSA, pois o que levaria a degradação dessas proteínas seria o desenovelamento, e a degradaçãonão seria nos corpos p pois estes degradam RNA. A SED não compromete o acumulo de fatores de crescimento, mitogenos e fatores de diferenciação na MEC e, dessa forma, o organismo se desenvolve com aspectos morfológicos aparentemente normais. VERDADEIRA. SOBRE A ELETROFORESE EM GEL É utilizada para separar fragmentos de DNA pela quantidade de pares de base a partir de extratos celulares de DNA. É utilizada para separar RNAs pela quantidade de nucleotídeos a partir de extratos celulares de RNA É utilizado para separar proteínas pelo tamanho a partir de um extrato proteico. SOBRE TECNICAS MOLECULARES: O sequenciamento gênico consiste na determinação da sequência de nucleotídeos em DNA isolado de um determinado organismo, sendo para isto realizada uma reação de PCR contendo nucleotídeos trifosfatados. A técnica de micro arranjo consiste na utilização de um chip contendo sondas complementares aos dos diversos RNAs de um organismo. Essa técnica é utilizada para comparar a expressão genica a nível de RNA em células submetidas à variadas condições. A técnica western blot consiste na transferência de proteínas de um gel de eletroforese para uma membrana de nitrocelulose e posterior marcação dessas proteínas utilizando anticorpos específicos. A técnica da reação em cadeia PCR é utilizada para amplificar trechos específicos de DNA a partir de quantidade mínima de DNA alvo ou de RNA previamente convertidos em cDNA. Necessita de primers, da DNA polimerase, de dNTPs e sais (MgCl). SOBRE NEOPLASIAS: As células tumorais podem liberar fatores de crescimento e mitogenos que afetem não só a sua taxa de proliferação, via autocrina como também de células adjacentes. As células tumorais diminuem o metabolismo oxidativo diminuindo a taxa de respiração celular. O gene BRCA-1 é um gene supressor de tumor.
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