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* Morfologia e Ultra-estrutura de BACTÉRIAS Profa Maria Célia Silva Lanna UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO Departamento de Ciências Biológicas CBI 618 – Microbiologia Professora: Maria Celia Silva Lanna * BIBLIOGRAFIA Capítulo 4, Tortora Capítulo 4, Pelczar * Objetivos do estudo da Morfologia Bacteriana Classificação taxonômica de familias de Bacterias Definição dos Fatores de Virulência morfologicos * Morfologia e Ultra-estrutura dos Microrganismos Procariotos X Eucariotos Tipos de células procarióticas: Eubactérias e Arqueobactérias Tamanho, Forma e Arranjo de Bactérias Estruturas externas à parede celular Parede Celular Estruturas internas à parede celular Célula Eucariótica * Procariotos X Eucariotos * Procariotos Eubactérias (Bactérias) Arqueobactérias (Archaea) Seqüências diferentes do rRNA (RNA ribossomal) * 1m * MORFOLOGIA CELULAR DAS BACTÉRIAS: Formas bacterianas básicas Esférica: Cocos Cilíndrica: Bacilos Espirilada: Vibriões, espirilos e espiroquetas * MORFOLOGIA CELULAR DAS BACTÉRIAS: Formas Bacterianas Básicas Vistas ao Microscópio Óptico * MORFOLOGIA CELULAR DAS BACTÉRIAS * Arranjos dos cocos * Tipos de Agrupamento dos cocos: Familia Micrococaceae: Gênero Staphylococcus Família Streptococaceae: Gênero Streptococcus Gênero Enterococcus Estreptococos(Diplococos) Estreptococos Estafilococos Sarcinas * Bacilos * Bacilos = Bastonetes Bastonetes Gram positivos Ex: Lactobacillus sp Ex: Clostridium sp Bastonetes Gram negativos Ex: Fam. Enterobacteriaceae:E.coli, Salmonella sp * Outras Formas celulares: Algumas são Bactérias de vida livre * Formas Espiraladas * Vibriões Ex: Vibrio cholerae (Cólera) * Espirilos : Ex: Helicobacter pilory (úlcera e câncer gástrico) * Espiroquetas Ex:Treponema pallidum (DST: sífilis) * Morfologia X Classificação Taxonômica Os 2 primeiros parâmetros de Classificação das bacterias em famílias são morfologicos: 1) A definição da Forma Celular: Cocos, bastonetes, vibriões, espirilos, espiroquetas 2) E a definição da afinidade pela Coloração de Gram: Bactéria Gram positiva ou Bactéria Gram negativa * Diversidade morfologica das famílias de bactérias Gram Positivas da Microbiota do Corpo Humano 1- FAMILIAS DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS Principais Famílas de COCOS Gram positivas Encontrados no corpo humano e animais 1º )COCOS EM CACHOS Familia Micrococaceae : Destaques: Gênero Staphylococcus ( Tolerante ao ambiente) Espécie : Staphylococcus epidermides Espécie : Staphylococcus aureus 2º ) COCOS EM CADEIAS curtas ou longas Familia Streptococaceae : Destaque:Gênero Streptococcus ( Não tolera o ambiente, é frágil no ambiente) Espécie : Streptococcus pneumoniae Espécie : Streptococcus pyogenes Gênero Enterococcus:Espécie:Enterococcus faecalis ( Tolerante ao ambiente) Principais FamiliasBastonetesGram positivos(Tolerante ao ambiente-Alguns formam Endosporos) Fam. Lactobacillacea (gênero Lactobacillus comensal não patogenico) e Fam. Clostridiaceae(gênero Clostridium : especies patogenicas: C. botulinum, C. tetani, C. perfringens, C. difficili) * A diversidade morfologica das familias taxonômicas de bactérias Gram Negativas da Microbiota do Corpo Humano 2- FAMILIAS DE BACTERIAS GRAM NEGATIVAS Principal Famíla de COCOS Gram NEGATIVOS Encontrados no corpo humano Família Neisseriaceae : Espécies patogênicas N.meningitidis e N. gonohroeae Especie não patogenica B. catarrralis 1º ) Principais Famílas de BASTONETES Gram NEGATIVOS no corpo humano A principal Familia de Bastonetes Gram negativos é a Família Enterobacteriaceae As Seguintes Espécies importantes para Nutrição e Ciência e Tecnologia dos Alimentos: Escherichia coli ( subespecie Comensal do intestino não patogenico), Escherichia coli ( subespecies Patogenicas ETEC, EPEC, EIEC, EHEC), Enterobacter sp (Não patogenicos), Salmonella sp., Shigella sp., Proteus sp. e Klebsiellla sp. são patogênicos. OBS: Em locais extraintestinais todos podem causar doenças. 2º )Vibriões Gram negativos : Fam. Vibrionaceae: Vibrio cholerae (água e alimen) 3º)Espirilos Gram negativos: Ex: Helicobacter pilory (alimentos) 4º) Espiroquetas Gram negativas : Ex 1: Leptospira sp. (água e alimentos) Ex 2: Treponema pallidum ( Doença Sífilis: Sexualmente Transmissível-DST) * Microbiota do Corpo Humano: Distribuição Corporal da Microbiota * Flora (Microbiota) Normal Flora Normal Residente-> População de micro-organismos de baixa virulência que estabelecem uma presença relativamente permanentes (colonizam) mas que não produzem doença em condições normais são membros da flora normal residente de todas as pessoas. Ex: Staphylococcus epidermides, Lactgobacillus acidophyllus , Enterococcus sp (Têm poucos fatores de virulencia) Flora Normal Transitória-> População de micro-organismos de média virulência que podem estar presentes por poucos dias, semanas ou meses e então desaparecem. Ex: Staphylococcus aureus, Streptococcus sp, Salmonella sp (Têm muitos fatores de virulência) * Célula Procariótica * * Componentes Obrigatórios da Célula Bacteriana 1-PAREDE CELULAR 2-MEMBRANA CITOPLASMÁTICA 3-CITOPLASMA ESTÁTICO 4-RIBOSSOMAS 70s DISPERSOS 5-CROMOSSOMA ÚNICO DE DNA fd * Parede Celular Bacteriana Constituída de PEPTIDEOGLICANO Estrutura rígida – Define formas e Proteção osmótica diferença estrutural/química da parede celular define: Bacteria Gram negativa: Peptideoglicano Fino+ LPS Bactéria Gram positiva: Peptideoglicano Espesso + ACIDO LIPOTEICOICO e outros comp. *OBS:TODAS AS BACTÉRIAS TÊM PAREDE CELULAR EXCETO fam. MICOPLASMAS * Estrutura do Peptidoglicano * Ação de lisozima sobre o peptidoglicano Quebra as ligações glicosídicas -1,4 entre N-acetlglicosamina e N-acetilmurâmico Antimicrobiano natural: lágrima, saliva, ovos Sob condições osmóticas apropriadas: Em Gram positiva forma os protoplastos (Célula sem parede) Em Gram negativa forma os esferoplastos (Celula sem parede) * Paredes Celulares Atípicas * Mecanismo da Coloração de Gram Distingue as bacterias Gram Positivas das Bacterias Gram Negativas Corante primário – Cristal violeta (entra na célula) Mordente – lugol (forma o complexo CVI) Descolorante – etanol-acetona (dissolve os lipídios da membrana externa – remove o complexo CVI) Contra-corante – fucsina ou safranina (entra nas células descoradas) * TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM * Coloração de Gram * Em função da diferença de composição da parede celular as bactérias se dividem em dois grupos: Seta A: Bactérias Gram positivas (ROXAS) Seta B: Bactérias Gram negativas (VERMELHAS) * Ultra-estrutura das Células de Bactérias Gram Positivas e Gram Negativas * Principais Diferenças entre Parede celular de Bactérias Gram Negativas e Gram Positivas * Parede Celular de Gram negativa * Parede celular de Gram positiva * Ácidos Teicóicos * Fatores de Virulência da Parede Celular 1) Bacterias Gram Negativas(todas): Lipopolissacarideo(LPS )-ENDOTOXINA 2) BactériasGram Positivas: * Acido Lipoteicoico em Gram positivas *Proteina A em Gram positivas (Staphylococcus aureus) *Proteina M em Gram positiva (Streptococcus pyogenes) *Acido Micólico em Gram positiva BAAR:Mycobacterium tuberculosis * LPS das Gram Negativas: Mecanismo de ação da febre * Componentes Acessórios : Estruturas Externas à Parede Celular * Glicocálice Cápsula Camada limosa Aderência Proteção Reserva nutriente Streptococcus sp Escherichia coli enteropatogênica * Cápsula – coloração negativa * Constituição Quimica das Capsulas Bacterianas: *Cápsula Polissacarídica: Maioria das espécies Bacterianas *Cápsula de ácido hialurônico: Streptococcus pyogenes * C * Fímbrias - Aderência * Pilus : Pili /Fimbria de Conjugação Importante na conjugação bacteriana aproximação de células compatíveis * Flagelos bacterianos Locomoção Atividade depende de energia Taxia: fototaxia e quimiotaxia * Estrutura de flagelos bacterianos * Flagelos em Gram negativas * Flagelos em Gram positivas * * Filamentos axiais = endoflagelos FA PC BE FA = Filamento Axial PC = Parede Celular BE = Bainha Externa * Tipos de flagelos bacterianos Polar ou monotríquio Lofotríquio Bipolar ou anfitríquio Peritríquio * Tipos de Flagelos Monotríquio Peritríquio Lofotríquio Anfitríquio * Ação de penicilina sobre a síntese de peptídeoglicano : impede formação das pontes cruzadas de aminoácidos * Componentes celulares internos à parede celular * Membrana Citoplasmática * Membrana citoplasmática Permeabilidade seletiva Transporte de nutrientes Alvo da ação de alguns antimicrobianos Processos de geração de energia:fotossíntese e respiração * Mesossomas: dobras da membrana plasmática onde acumulam-se pigmentos e enzimas responsáveis pela fotossíntese * Material genético: Cromossoma & Plasmídeos * Ribossomos próprios das Bactérias Dispersos no citosol Ribossomos 70S: Constituídos de duas subunidades 50S e 30S Síntese protéica Alvo de vários antibióticos antibacterianos: Ex: Estreptomicina * Inclusões Citoplasmáticas Magnetossomos Grânulos de polifosfato Grânulos de enxofre (Thiobacillus) Poli-hidroxi-butirato Glicogênio ou amido Vesículas de gás (cianobactérias – flutuação) * Magnetossomos: inclusões de óxido de ferro Fe3O4 * Inclusões = reserva energética PHB = polihidroxibutirato PP = polifosfato ou grãnulo de Voutina G = Glicogênio * Endósporos (Esporos) bacterianos Raras famílias de bactérias: Gênero Clostridium (Ex: Clostridium botulinum) Gênero Bacillus ( Ex: Bacillus cereus) Célula diferenciada Estrutura de resistência Resistência ao calor, à radiação, à dessecação, etc. Estrutura altamente desidratada Formada em algumas bactérias Gram positivas * * Esporulação e Germinação esporulação germinação * Estrutura do endosporo * Exemplos de especies produtoras de endosporos e importantes em Toxinfecção Alimentar: 1) Clostridium botulinum 2) Bacillus cereus * Tipos de Endosporos vistos ao microscópio óptico Central, terminal, subterminal, entumecido * Micoplasmas Riquetsias Clamídeas * Célula Eucariótica * * Célula Eucariótica Flagelos e cílios Parede celular Glicocálice Membrana plasmática Citoplasma Organelas Membranosas: Núcleo Retículo endoplasmático Ribossomos 80S Complexo de Golgi Mitocôndrias Cloroplastos Lisossomos Vacúolos centríolos * * * * * * * *
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