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Taxonomia e estrutura de microrganismos Cristina Viana Niero cristina.viana@unifesp.br Taxonomia é a ciência de classificação 1969 Robert Whittaker propõe o sistema de 5 reinos baseado em observações microscópicas - Procaryotae ou Monera: bactérias - Protista: organismos unicelulares, protozoários, algumas algas - Fungi: fungos unicelulares e multicelulares - Plantae: algumas algas, plantas - Animalia: organismos multicelulares 1978 Carl Woese propõe um sistema de classificação com base na organização celular revela a existência de 3 domínios: (2 tipos de procariotos) - Archaea (antigas, com utilidade industrial) - Bacteria (consideradas verdadeiras e patogênicas ao homem) - Eucaryota (protista, fungi, plantae e animalia) status de Reino Domínio Classificação filogenética com os três domínios Microrganismos podem ser classificados em 3 domínios de acordo com suas características Linnaeus 1735 2 reinos Haeckel 1866 3 reinos Chatton 1937 2 impérios Copeland 1956 4 reinos Whittaker 1969 5 reinos Woese e cols 1978 3 domínios (não tratado) Protista Prokaryotae Monera Prokaryotae Bacteria Archaea Eukaryota Protista Protista Eukarya Vegetabilia Plantae Fungi Plantae Plantae Animalia Animalia Animalia Animalia Sumário Domínio Bacteria Eucaryota Filo Proteobactéria Chordata Classe Gamaproteobactéria Mammalia Ordem Enterobacteriales Primata Família Enterobacteriaceae Hominidae Gênero Escherichia Homo Espécie coli sapiens Fonte: Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, 2001. Escherichia coli Homo sapiens Domínio Bacteria Bacteria Filo ou divisão Proteobacteria Actinobacteria Classe Gammaproteobacteria Actinobacteria Ordem Pseudomonadales Actinomycetales Família Pseudomonadaceae Corynebacteriaceae Gênero Pseudomonas Corynebacterium Espécie aeruginosa afermentans Sub-espécie - lipophilum Pseudomonas aeruginosa Corynebacterium afermentans sub-espécie lipophilum http://www.bacterio.cict.fr/bacdico/taxonomie.html, Bergey´s Manual of Systematic Bacteriology. Taxonomia de Lineu (bi-nominal) gênero e espécie Pseudomonas aeruginosa Candida albicans Homo sapiens Nomenclatura Científica Nome científico em latim (gênero) letra inicial maiúscula (espécie) letra minúscula grifado ou itálico Ex: Escherichia coli, Streptococcus mutans Lactobacillus spp. (para designar mais de uma espécie) Domínio Grupo Organização celular Archaea Arqueas procarioto Bacteria Bactérias procarioto Eucariota Fungos eucarioto Eucariota Algas eucarioto Eucariota Protozoários eucarioto - Vírus Não apresenta estrutura celular Classificação de microrganismos de acordo com organização celular Organização celular: Procariotos e eucariotos A célula é a estrutura básica da vida. Todas as células são divididas em procariotos (bactéria) e eucariotos (animais, plantas, fungos, protozoários e algas). Diferenças básicas entre procariotos e eucariotos de 0,2 a 2 µm de diâmetro (2 a 8 µm comprimento) 10 a 100 µm Célula Procariótica São unicelulares, Não possuem núcleo nem organelas, Possui DNA circular Diferenças entre Procariotos e Eucariotos Características Procarioto Eucarioto Tamanho (diâmetro) 0,2 a 2 µm > 10 µm DNA 1 circular +1 linear Membrana nuclear Ausente Presente Divisão celular Fissão binária mitose Histonas Ausente Presente Mitocôndrias Ausente Presente Aparelho de Golgi Ausente Presente Retículo endoplasmático (RE) Ausente Presente Lisossomos Ausente Presente Ribossomos Distribuído no citoplasma Livres e Ligados ao RE rugoso Membrana citoplasmática Fosfolipídeo Colesterol Peptideoglicano (parede celular) Presente Ausente Archaea = grupo distinto de bactérias com características próprias. encontradas em ambientes extremos (pH, temperatura, salinidade ...) utilidade em uso industrial (alimentos, purificação de água) não são consideradas patogênicas para o homem não possuem parede composta de peptideoglicano e sim macromoléculas variadas (polissacarídeo e proteínas - pseudomureína) Bacteria (Eubacteria) “ eu” = verdadeira inclui as bactérias que infectam o homem parede composta de peptideoglicano (mureína) Microrganismos procariotos Podem ser encontrados distribuídos no ambiente, plantas, animais, homens São unicelulares com tamanho variando de 0,2 a 2 µm de diâmetro e 2 a 8 µm de comprimento e diversas formas e arranjos (cocos, bacilos) Microrganismos procariotos Cocos Gram positivos agrupados Cocos Gram positivos em cadeia Morfologia e arranjo das bactérias Salmonella typhi Staphylococcus aureus Vibrio cholerae Streptococcus pneumoniae Bacillus anthracis Neisseria meningitidis Legionella pneumophila Corynebacterium diphtheriae Clostridium botulinum Clostridium tetani Neisseria gonorrhoeae Escherichia coli Brucella melitensis Mycobacterium tuberculosis Lactobacillus spp Divisão em: 1 plano aos pares, em cadeia 2 planos diferentes tétrades 3 planos irregulares agrupados Estrutura Função parede celular proteção e forma membrana celular controla entrada e saída de componentes citoplasma contem DNA, ribossomos DNA contem informação genética nucleóide área nuclear ribossomo tradução de mRNA em proteínas inclusões reserva de nutrientes fímbria, pili adesão, transferência de DNA flagelo movimento cápsula proteção contra fagocitose plasmídeo podem conter genes de resistência Parede celular Célula eucariótica • vegetal, algas, e fungos possuem na parede celular (celulose e quitina) • células animais e protozoários não tem parede celular Célula procariótica • Bacteria tem parede composta por peptideoglicano • Archae tem parede composta de proteínas, carboidratos complexos parecidos com o peptídeoglicano (pseudomureína) • Estrutura semi rígida responsável pela morfologia Nem todos os procariotos possuem parede celular Gênero Mycoplasma tem apenas membrana plasmática Parede celular Responsável por manter a morfologia celular e rigidez Formada por uma rede de macromoléculas: peptideoglicano (mureína) dissacarídeos (NAG e NAM) interligados por uma cadeia polipeptídica NAG = n-acetil glicosamina NAM = ácido n-acetil murâmico Parede celular bactéria gram + bactéria gram - A parede das micobactérias apresenta composição e arquitetura distinta das bactérias Gram positivas e Gram negativas Gram positivo Gram negativo Micobactérias lipídeos (60%) fosfolipídeos peptideoglicano lipídeo+LPS porina ac. micólico lipídeos LAM arabinogalactano (URL: http://www.uct.ac.za/depts/mmi/lsteyn/cellwall.html) Coloração de Gram Cristal violeta Água Lugol Descorante (álcool) Água Safranina ou fucsina Bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) Coloraçãode Ziehl-Neelsen 1. Fucsina fenicada 0,3% 2. Aquecimento (vapor, ~ 5 min) 3. Lavagens com álcool-ácido 3% 4. Azul de metileno 0,1% As micobactérias retêm a fucsina na parede rica em lipídeos Álcool Ácido Resistentes - AAR -Cápsula: Virulência, Adesão a diferentes superfícies, proteção contra desidratação (glicocalix ou glicocalice é o termo geral usado para substâncias que circundam externamente células) -Fímbria e pili: Adesão e transferência de material genético -Flagelo: Movimentação, de acordo com a quantidade e posição podem ser: monotríquiais, anfitríquiais, lofotríquiais e peritríquiais ESTRUTURAS EXTERNAS À PAREDE CELULAR As bactérias recebem denominações especiais de acordo com a distribuição dos flagelos: - atríquias (sem flagelo); A - monotríquias (único flagelo em uma das extremidades); B - lofotríquias (tufo de flagelos em uma ou ambas as extremidades); C - anfitríquias (único flagelo em cada extremidade); D - peritríquias (cercadas de flagelos). Membrana citoplasmática Características: Bi-camada fosfolipídica ligada a proteínas necessárias para o metabolismo celular A membrana de procariotos difere da dos eucariotos pela ausência de esteróis = menos rígida. ESTRUTURAS INTERNAS À PAREDE CELULAR Polar (hidrofílica) Apolar (hidrofóbica) bi-camada fosfolipídica Membrana citoplasmática e Modelo do Mosaico Fluido Principal função é a permeabilidade seletiva Proteínas se movem livremente sem destruir a estrutura da membrana e por esse arranjo dinâmico entre proteínas e fosfolipídeo denomina-se modelo do mosaico fluido. DNA e Região Nuclear ou Nucleóide – Cromossomo bacteriano – único, circular, dupla-fita – Não apresenta membrana nuclear – 20% do volume bacteriano = DNA – Plasmídeos – DNA circular auto-replicativo, podem conferir características como resistência a antimicrobianos e fatores de virulência ... – Pode ser transferido a outras bactérias. (Tortora, Funke and Case) Ribossomos – Espalhados pelo citoplasma são essenciais para a produção das proteínas a partir da informação contida no DNA – Ribossomo completo: 70S – Uma bactéria possui ~15.000 ribossomos O estudo de fungos é chamado de micologia Os Fungos: • Existem há mais de 300 milhões de anos; • Distribuídos na natureza; • A grande maioria possui limitada patogenicidade; poucos causam doenças em humanos e animais; • Utilizados em indústrias de alimentos e decomposição de matéria. Conceito e características dos fungos: -São organismos eucarióticos - unicelular (leveduras) ou multicelulares (fungos filamentosos, bolores ou cogumelos), não possuem clorofila, nem pigmento fotossintético; -São amplamente distribuídos na natureza Formas Levedura Filamentoso (Bolor) Dimórfico Parede: constituída de polímeros de glicose: glucanas, mananas, galactomananas, quitina, polissacarídeos não possuem peptideoglicano. (Cryptococcus neoformans - cápsula); Membrana: ergosterol (não colesterol); Citoplasma: núcleo, mitocôndrias, ribossomos, retículo endoplasmático, etc... Tipos morfológicos básicos: Fungos Filamentosos: O talo (corpo) de um fungo filamentoso consiste em filamentos longos de células conectadas. Esses filamentos são denominados hifas. hifas que contêm septos (hifas septadas), enquanto outras não-septadas (hifas cenocíticas). As hifas são divididas em vegetativas (função de nutrição) e aéreas (função reprodutiva). cenocítica septada Aspergillus nidulans As hifas são divididas em vegetativas (função de nutrição) e aéreas (função reprodutiva). Paracoccidioides brasiliensis 23ºC 37ºC Micélio (conjunto de hifas) levedura Dimórficos: Formam estruturas diferentes quando submetidos a diferentes temperaturas. Existem como fungos filamentosos, no estado de saprófitas de vida livre ou quando estão em temperatura ambiente e como levedura nos tecidos do hospedeiro ou quando cultivados à 37ºC. MORFOLOGIA FUNGOS FILAMENTOSOS Características dos fungos filamentosos Cor, textura, superfície, bordas, reverso, produção de pigmento MORFOLOGIA FUNGOS LEVEDURIFORMES Características das leveduras Cor, textura, superfície, bordas, reverso, produção de pigmento Em 1892, Dmitri Iwanowski, botânico Russo, apresentou um trabalho na St. Petersburg Academy of Science mostrando que o filtrado de extratos de plantas com doença do tabaco podiam transmitir a doença a outras plantas. E que estas “pequenas bactérias” que passaram pelos poros do filtro deveriam ser responsáveis pela doença. Dmitri Iwanowski (1864-1920) Início da virologia 1935, Wendell Stanley isolou o microrganismo, realizou estudo químico e estrutural. Os vírus são microrganismos de grande simplicidade: - desprovidos de estrutura celular (não são classificados como eucariotas nem procariotas) - possuem apenas um tipo de ácido nucléico (RNA ou DNA) fita simples, dupla ou fragmentado - são parasitas intracelulares obrigatórios - possuem camada de proteína (capsídeo) infectam plantas, animais, humanos, fungos, bactérias Vírus do latim “veneno” Composição Proteínas, lipídeos, carboidratos Tamanho dos vírus Vírus nem sempre são menores que as bactérias Morfologia Podem ser classificados de acordo com tipo morfológico caracterizado pelo capsídeo em: Icosaédrica Helicoidal Complexa Bacteriófagos vírus bacteriano Classificação Viral Os dois principais componentes virais usados na classificação são: (1) tipo de ácido nucleico (DNA ou RNA). (2) capsídeo (tamanho, simetria e a presença do envelope). - Família agrupa vários gêneros com características comuns (sufixo – viridae). - Gênero agrupa espécies que compartilham características comuns (sufixo – virus).
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