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MICROBIOLOGIA Profa Espa Camelissa Maeda Darian MICRORGANISMOS BACTÉRIAS Bacilo Cocos MEIOS DE CULTURAS # URINA - O meio utilizado é o Ágar Cled, onde há crescimento de bacilos e cocos, tanto gram positivo quanto negativo. # FEZES - É utilizado primeiramento o caldo tetrationato – estimula o crescimento apenas das bactérias patogênicas (Salmonella sp, Shigella sp, Escherichia coli, Pseudomonas sp). - Após as 24 horas do caldo em estufa já inoculado a fezes, utiliza-se o meio de Ágar SS, semeando e deixando na estufa novamente por 24 horas para analise em crescimento em meio. # SECREÇÕES - Todas as secreções em geral, como uretral, vaginal, feridas, até sangue (hemocultura) # ANTIBIOGRAMA - Caldo BHI (infusão de cérebro e coração) – é um meio que irá aumentar o crescimento das bactérias. - Soro fisiólogico – é só utilizado para diluição da bactéria onde será inoculada no ágar Muller Hinton - utilizado para fazer os antibiogramas, sendo então o meio preconicado universalmente para testes de sensibilidades as drogas. # MEIOS PARA CRESCIMENTO FÚNGICO - Ágar Sabouraud: meio que não tem adição de antibióticos, permite o crescimento da maioria das espécies fúngicas. - Ágar Mycosel: meio que tem adição de antibióticos (ex. Cloranfenicol), portanto é um meio que impede o crescimento de alguns fungos e permite o crescimento de outros. RESUMO - Bacilos: tem formas de bastonetes - Cocos: tem formas de esferas GRAM - Corado em rosa: negativo - Corado em roxo: positivo MEIOS DE CULTURAS - Ágar Cled: meio que há crescimento de bacilos e cocos, gram negativos e positivos e fungos. - Ágar SS: meio que é seletivo, onde apenas há crescimento das bacterias possíveis patogénicas. - Ágar Mac Conkey: meio seletivo, pois apenas faz crescimento de BGN - Ágar Sangue/Chocolate: meio onde há crescimento de todas as bactérias: bacilos e cocos, gram negativos e positivos, fungos (leveduras) TECNICAS DE SEMEADURA São necessário para semeadura: - SWAB: usado para coleta, inoculação primária e antibiograma -Filamento de platina ou niquel/cromo: #em forma de alça (alça de Henle) #em forma de fio preto (agulha) #em forma de L, usado em tecnicas fúngicas. - Seringa e agulha: para ajudar na inoculação de sangue. #SEMEADURA EM MEIO LIQUIDO (DIVERSOS MATERIASI) Meios utilizados para aumentar crescimento bacteriano. Inclina o tubo e inocular o material com filamento em gota ou agulha, na lateral do tubo, sempre encostando a amostra no liquido, até desprezar todo o material, posteriormente voltar o tubo na posição vertical. #SEMEADURA EM MEIO SEMI-SÓLIDO (DIVERSOS MATERIAIS) Meios usados para crescimento e motilidade bacteriana. Deve-se usar filamento em forma de agulha, manter o tubo na vertical, atravessar o ágar até chegar ao fundo, voltar na mesma linha. #SEMEADURA EM MEIOS SÓLIDOS ACOPLADOS EM TUBO (DIVERSOS MATERIAIS) - Meios para bactérias: os meios nestes tubos são inclinados, deve-se com filamento em forma de agulha atravessar o ágar até chegar ao fundo, voltar fazendo estrias em “S” na superfície do meio. - Meios para fungos: os meios nestes tubos são inclinados, deve-se com filamento em forma de gota, fazer movimentos de zigue-zague na superfície do meio, nunca inocular o fungo dentro do meio. #SEMEADURA EM MEIOS SÓLIDOS ACOPLADOS EM PLACA DE PETRI - Fezes: usar um filamento em forma de alça para fazer a primeira inoculação, desprezar-se o material em um “canto”da placa, com a mesma alça fazer zigue- zague em uma posição, virar a placa e fazer o zigue-zague em posição perpendicular ao primeiro. Cuidado para não furar o meio, o estriamento deve ser superficial. - Secreções: usar swab para fazer a inoculação primária, passa-se o swab em um “canto”da placa, com um filamento em forma de alça, fazer nova estria iniciando do final da primeira e assim, até fazer em torno de 4 estrias distantes e dispostas diferentemente. - Sangue: usar uma seringa e agulha para retirar o sangue do tubo de hemocultura, retira-se de 0,5 a 1 mL de sangue, despreza-se uma gota no centro da placa, com um filamento em forma de alça, fazer estrias em zigue-zague em dois sentivos. - Urina: deve-se usar alças de niquel/cromo calibrada – 0,001mL (1μL), é necessário obter a quantidade de colônias em 1 mL (1000µL) de urina, como foi colocado apenas 0,001mL de urina, deve-se multiplicar por 1000 a quantidade de bactérias encontradas. Este método de semeadura de urina é semi-quantitativo, pega-se o material com a alça de 0,001mL, faz-se uma unica estria que cruze o centro da placa, posteriormente com a mesma alça faz-se dois estriamento em zigue-zague em posições perpendiculares. - Antibiograma: utilizamos swabs estereis para fazer a semeadura do material na placa, toda a placa deve ser semeada, após retirar o swab do meio de enriquecimento liquido com a bactéria crescida (geralmente BHI), passamos o swab em duas posições, perpendiculares, até toda placa ficar preenchida.
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