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Centro Universitário do Distrito Federal – UDF Brasília-DF Iniciação à Bacteriologia Msc. Andreanne Gomes Vasconcelos O que abordaremos? • Organização celular • Estrutura • Morfologia • Reprodução • Fisiologia • Microbiota humana As bactérias • Procariontes: Menor complexidade citoplasmática; Ausência de membrana nuclear; DNA genômico haploide, único, circular; plasmídios; Sem organelas membranosas; Tamanho: 0,2 a 2,0 m diâmetro e 2 a 8 m de comprimento. Estrutura da célula bacteriana • Estruturas fundamentais: Membrana celular Citoplasma Nucleoide Ribossomos Parede celular • Estruturas acessórias: Cápsula Flagelo Fímbrias/Pili Plasmídio Endosporo Estrutura da célula bacteriana • Membrana celular: Modelo mosaico fluido • dupla camada de fosfolipídeo • proteínas periféricas: catalisam reações químicas • proteínas integrais: canais por onde substâncias entram/saem da célula. Funções: Digestão de nutrientes, Transporte de elétrons e a produção de energia (ATP) • Citoplasma: Fluido semilíquido • água, proteínas, aminoácidos, carboidratos, lipídios, minerais, metabólitos • inclusões, ribossomos, plasmídios • Citoesqueleto Função: local das reações metabólicas Estrutura da célula bacteriana • Nucleoide: Não possui carioteca nem nucleossomo Cromossomo – 1 molécula única DNA dupla fita circular Função: contém informação genética; controla as funções celulares • Ribossomos: Ribossomos 70S (subunidades 30S e 50S) Conferem ao citoplasma um aspecto granular Função: síntese proteica Neisseria gonorrhoeae Parede celular • Parede celular: é uma estrutura semi-rígida que recobre a membrana citoplasmática e contribui para a forma das bactérias. Parede celular Peptidoglicano Carboidrato Polipeptídeo N-acetilglicosamina (NAG) N-acetilmurâmico (NAM) Parede celular • Gram positiva: Várias camadas de peptidioglicano (cerca de 90%) Ácidos teicoicos e lipoteicoicos. • Gram negativa: Internamente: camada de fosfolipídeos e lipoproteína, ancorada ao peptidioglicano. Externamente => lipopolissacarídeo (LPS). Espaço periplasmático. Parede celular e coloração de Gram Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus Neisseria gonorrhoeae Neisseria meningitidis Escherichia coli Salmonella enterica Estrutura da célula bacteriana • Cápsula: Substância viscosa e gelatinosa situada externamente à parede celular • Polissacarídeos e/não lipídios e proteínas Função: Proteção contra fagocitose, fator de virulência (Ex: Streptococcus pneumoniae encapsuladas) • Flagelo: Filamentos proteicos (flagelina) Surgem de um corpúsculo basal na MC Função: motilidade bacteriana Estrutura da célula bacteriana • Fímbrias/Pili: Proteínas polimerizadas (pilina) Mais finos que flagelos Surgem do citoplasma Função: Aderência e fixação, transferência de material genético Plasmídio: Fragmentos de DNA dupla fita circular extracromossômicos Função: vantagens seletivas • Gene blaKPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemase): resistência a todos os beta-lactâmicos. • Gene mecA (MRSA – Staphylococcus aureus meticillin resistant): resistência a todos os beta-lactâmicos Estrutura da célula bacteriana • Endosporo: Célula desidratada, com vida latente, sem atividade metabólica Contém muito ácido dipicolínico e íons Ca (essenciais para retomar o metabolismo) Bacillus anthracis; Clostridium tetani, C. perfringens, C. botulinum. ácido dipicolínico esporogênese Morfologia celular Forma Arranjo Bastonete EspiraladaCocobacilos e Vibriões Helicobacter pylori Treponema pallidum Gardnerella vaginalis Vibrio cholerae Esférica Morfologia celular Forma Arranjo Reprodução bacteriana • Assexuada divisão binária; • A duplicação do material genético dispara a iniciação da divisão celular; • O processo de replicação requer muitas enzimas: helicase, proteínas de ligação ao DNA, primase, DNA-polimerase, ligases; Fisiologia bacteriana • Necessidade de ar (CO2 e O2); DEMANDA DE O2 Aeróbios obrigatórios Anaeróbios obrigatórios Microaerófilos Anaeróbios aerotolerantes Anaeróbios facultativos Percentual de O2 + - Caldo tioglicolato Capnófilos: 5 - 10% de CO2 Pseudomonas aeruginosa Clostridium tetani Campylobacter jejuni Escherichia coli Fisiologia bacteriana • Nutrição e metabolismo energético; FONTE DE CARBONO Autotróficos (utilizam CO2 como fonte de carbono) Heterotróficos (utilizam compostos orgânicos diferentes de CO2 como fonte de carbono) FO N TE D E EN ER G IA Fototróficos (utilizam luz como fonte de energia) Fotoautotróficos Foto-heterotróficos Quimiotróficos* (utilizam substâncias químicas como fonte de energia) Quimioautotróficas Quimio-heterotróficas Elementos essenciais: C, N, O, H, S, P, K, Mg e Fe. Nutrientes Macronutrientes Micronutrientes Fisiologia bacteriana • Nutrição e metabolismo energético; • Gram positivas Sintetizam exoenzimas que são liberadas no meio, clivando os nutrientes, que são captados por proteínas transportadoras. • Gram negativas Apresentam grande número de porinas associadas à membrana externa que permitem a passagem de moléculas hidrofílicas de baixa massa molecular. No espaço periplasmático são encontrados proteases, fosfatases, lipases, nucleases e enzimas de degradação de carboidratos. Fisiologia bacteriana • Nutrição e metabolismo energético; Catabolismo x Anabolismo Fisiologia bacteriana • Nutrição e metabolismo energético; Catabolismo: respiração celular aeróbica 38 moléculas de ATP a partir de 1 uma molécula de glicose. Fisiologia bacteriana • Nutrição e metabolismo energético; Catabolismo: respiração celular anaeróbica O aceptor final de e- é uma substância inorgânica diferente do O2 (NO3¯; SO4 2- ; CO3 2-). Menor rendimento de ATP que em aeróbios. Fisiologia bacteriana • Nutrição e metabolismo energético; Fermentação é um processo anaeróbico para liberação de energia a partir de carboidratos, aminoácidos, etc. Não há ciclo de Krebs e cadeia transportadora de elétrons. Fisiologia bacteriana • Crescimento. O crescimento e divisão celulares necessitam de um ambiente propício com todos os constituintes químicos e físicos necessários para o seu metabolismo. Fatores que afetam o crescimento microbiano • Disponibilidade de nutrientes • Atmosfera gasosa • Umidade • Temperatura • pH • Pressão osmótica e salinidade • Psicrotroficos: podem desenvolver-se a < 7ºC • Psicrófilos: 15-20°C • Mesófilos: 25-40°C • Termófilos: 50-70°C • Ideal: ~ 7 • Acidófilos: 2 – 5 • Alcalífilos: > 8 Microbiota humana • 10 trilhões de células 100 trilhões de microrganismos Microbiota humana • Comensal: “Comem juntos” Participa no metabolismo de produtos alimentares; Fornece fatores essenciais de crescimento; Protege contra infecções Estimula resposta imune • Colonização vs doença; • Microrganismos oportunistas; • Virulência e patogenicidade. Bibliografia sugerida • Básica OPLUSTIL, C. P. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. 2.ed. São Paulo: Atheneu, 2004. TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. Microbiologia. 10.ed. Porto Alegre: Artmed, 2012. TRABULSI, L. R.; ALTELTHUN, F. Microbiologia. 5.ed. Rio de Janeiro: Atheneu, 2008. • Complementar BARROS, E.; MACHADO, A.; SPRINZ, E. Antimicrobianos – Consulta Rápida. 5.ed.. Porto Alegre: ArtMed, 2013.(e-book) BROOKS, G.F.; CAROLL, K.C.; BUTEL, J.S.; MORSE, S.A.; MIETZNER, T.A. Microbiologia Médica de Jawetz, Melnick e Adelberg. 26.ed. Porto Alegre: AMGH, 2014. (e-book) ENGELKIRK, P.G.; DUBEN-ENGELKIRK, J.; BURTON, G.W.B. Microbiologia para as Ciências da Saúde. 9.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2012. (e-book) MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J.M.; DUNPLAP, P.V.; CLARK, D.P. Microbiologia de Brock.12.ed. Porto Alegre: ArtMed, 2011. (e-book) SALVATIERRA, C. M. Microbiologia - Aspectos morfológicos, bioquímicos e metodológicos. São Paulo: Érica, 2014 (e-book). andreanne.vasconcelos@udf.edu.br
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