Morfologia e funcao leucocitos 090313

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LEUCÓCITOS 
leukos = branco 
Valores de referência em Hematologia 
(Williams Hematology, 7th Ed., 2006) 
Valores de referência em Hematologia 
(Williams Hematology, 7th Ed., 2006) 
 
Valores de referência em Hematologia 
(Wintrobe Hematologia Clínica, 9ª Ed., 1998) 
HEMATOPOESE 
Compartimentos dos leucócitos 
• Medula óssea 
• Sangue periférico 
• Tecidos 
 
 
Leucograma avalia os leucócitos do sangue periférico 
 
Compartimentos dos leucócitos 
Fonte: Hoffbrand et al, 2004 – Fundamentos de Hematologia 
Leucograma 
• Contagem dos leucócitos totais 
 Câmara de contagem de células 
 Automação 
 
• Contagem diferencial relativa 
 Contagem de no mínimo 100 leucócitos diferenciando pelo tipo de 
leucócito (um a um). 
 
 
• Contagem diferencial absoluta 
 Com o número de leucócitos totais e as porcentagens de cada célula 
obtidas na contagem diferencial é possível calcular o número absoluto de 
cada um dos leucócitos 
 
 
 
Leucograma 
Contagem diferencial relativa 
• Contagem de no mínimo 100 leucócitos diferenciando pelo tipo de células 
• Se houver leucocitose (contagem global de leucócitos > 10 . 103/uL) deve-se contar na 
contagem diferencial maior número de células (200 ou 500). 
 
 
 
Para identificar cada um dos leucócito, utilize os seguintes 
critérios morfológicos: 
 Tamanho da célula 
 
 Razão núcleo/citoplasma 
 
 Características do citoplasma 
(cor, presença ou ausência de grânulos, cor e tamanho dos grânulos) 
 
 Características do núcleo 
 (forma, cor, padrão de cromatina, presença e ausência de nucléolo) 
 
Os leucócitos podem ser classificados 
 
Granulações no citoplasma 
• Granulócitos (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) 
• Agranulócitos (monócitos e linfócitos) 
 
Segmentação do núcleo 
• Polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) 
• Mononucleares (monócitos e linfócitos) 
 
De acordo com a função 
• Fagócitos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos e monócitos) 
• Imunócitos (linfócitos) 
Granulócitos 
 
 
 
Agranulócitos 
LEUCÓCITOS 
NEUTRÓFILOS 
EOSINÓFILOS 
BASÓFILOS 
LINFÓCITOS 
MONÓCITOS 
Contagem relativa dos leucócitos 
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no 
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. 
Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino 
Contagem relativa dos leucócitos 
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no 
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. 
Campo muito 
grosso 
Campo adequado Campo muito fino 
Contagem relativa dos leucócitos 
• É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no 
mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. 
A 
A 
B 
A – Cerca de 25 células 
B- Cerca de 50 células 
Contagem relativa dos leucócitos 
As células não tem distribuição uniforme na extensão sanguínea 
Cabeça Corpo Cauda 
Os linfócitos predominam no meio da extensão 
Neutrófilos e monócitos predominam nas margens e na cauda 
LEUCÓCITOS 
Linfócito 
Monócito 
Neutrófilo 
Eosinófilo 
Basófilo 
LEUCOGRAMA 
 Avalia alterações quantitativas e morfológicas dos leucócitos 
 
 Contagem dos leucócitos totais 
 Valores de referência: 5,0 a 11,0 x 103/uL (ou 109/L) 
 ou 
 4,0 a 11,0 x 103/uL 
 
 - Leucocitose = leucócitos totais > 11,0 x 103/uL 
 
 - Leucopenia = leucócitos totais < 4,0 x 103/uL 
 
 
 
Exemplo 
Contagem de leucócitos totais: 9,0 x 103/L 
 
 
Células % Número absoluto 
( /L) 
Neutrófilos bastonetes 02 
Neutrófilos segmentados 
 
57 
Eosinófilos 03 
Basófilos 01 
Linfócitos 31 
Monócitos 06 
total 100 
Contagem de leucócitos totais: 9,0 x 103/L 
 
 
Neutrófilos bastonetes 
 
9.000 -------------------------- 100% 
 x -------------------------- 2% 
 
X= 180 neutrófilos bastonetes/ L 
Neutrófilos segmentados 
9.000 -------------------------- 100% 
 x -------------------------- 57% 
 
X= 5.130 neutrófilos segmentados/ L 
 
Fórmula leucocitária relativa e absoluta 
Células % Número absoluto 
/L de sangue 
Neutrófilos bastonetes 02 180 
Neutrófilos segmentados 
 
57 5.130 
Eosinófilos 03 270 
Basófilos 01 90 
Linfócitos 31 2.790 
Monócitos 06 540 
total 100 9.000 
Neutrófilos 
Disciplina de Fisiologia do Sistema 
Hematopoético 2011 
Neutrófilos 
• É o leucócito mais frequente no sangue periférico do adulto 
 
• Apresenta vários estágios de maturação 
 (mieloblastos, promielócitos, mielócitos, metamielócitos, neutrófilos 
bastonetes e neutrófilos segmentados) 
 
 A meia vida dos neutrófilos desde a fase de mieloblasto até a morte é de 
 9 a 10 dias 
 
• No sangue periférico são encontrados, fisiologicamente, 
poucos neutrófilos bastonetes ( 2 a 5%) e grande frequência 
( 50 a 60%) são neutrófilos segmentados 
 
 
 
• No sangue do adulto é o leucócito mais predominante 
 (40-70%) 
 
• Alto poder de fagocitose 
 
• Primeira linha de defesa contra microorganismos 
 
• Vida-média curta na circulação sanguínea (6 horas) 
 
• Pool de neutrófilos: Medula Óssea, Circulação Sanguínea e 
Tecidos 
 
 
 
 
 
 
NEUTRÓFILOS - características 
Williams 7ª ed. 
• Núcleo 
 - polimórfico 
 - 2-5 lóbulos 
 - cromatina condensada de coloração púrpura 
 
• Citoplasma 
 - ligeiramente acidófilo 
 - granulações abundantes, finas e de coloração rósea 
 
• Tamanho: 12-15 µm 
 
 
NEUTRÓFILOS - morfologia 
Williams 7ª ed. 
Constituintes dos grânulos 
dos neutrófilos 
Grânulos específicos 
Lactoferrina 
Lizozima 
Fosfatase alcalina 
Colagenase tipo IV 
 
Grânulos Azurófilos 
 MPO (mieloperoxidase) 
Lizozimas 
Elastase 
Colagenase 
Catepsina G 
GRÂNULOS PRIMÁRIOS 
ou 
GRÂNULOS SECUNDÁRIOS 
ou 
 
Amulic et al. Annu. Rev. Immunol. 2012.30:459-489. 
NEUTRÓFILOS – maturação e morfologia 
NEUTRÓFILOS – maturação e morfologia 
 IL-3 
Atua em fases precoses da 
hematopoese, afetando as células 
pluripotentes. 
 GM-CSF 
Estímulo de granulócitos-monócitos 
 G-CSF 
Estímulo de granulócitos 
 Stem Cell factor 
Estímulo para células progenitoras 
Regulam a produção, 
sobrevivência e atividade 
funcional 
NEUTRÓFILOS – maturação 
Granulação Início Conteúdo 
Grânulos azurófilos Promielócito Hidrolases 
Fosfatase ácida 
Β-glicuronidase 
Mieloperoxidase 
Elastase 
Arilsulfatase 
Proteínas cationicas 
Grânulos específicos Mielócito Lisozima 
Lactoferrina 
Colagenase 
Ativador de plasminogênio 
Aminopeptidase 
Grânulos terciários Mielócito Gelatinase 
Organelas 
citoplasmáticas 
Fosfatase alcalina 
NEUTRÓFILOS – grânulos 
• Quimiotaxia 
 Citocinas 
 Monocinas 
 Toxinas bacterianas 
 Células e tecidos necrosados 
• Diapedese 
 Selectinas e integrinas 
 Moléculas de adesão intercelular (ICAM) 
 
• Comunicação com outras células 
 Recrutamento de células para o local da infecção 
NEUTRÓFILOS – funções 
Fagocitose 
 
 Degranulação ou ação 
enzimática; 
 
 
 Geração de radicais oxidantes 
 
 
 Queda do pH no interior do 
fagossoma. 
NEUTRÓFILOS – Funções 
Fagocitose 
 Fagocitose 
1) Reconhecimento e fixação da partícula 
2) Engolfamento 
3) Destruição ou degradação 
Mecanismos dependentes de O2 (O2-e MPO) 
Lizozima, lactoferrina, proteína básica principal 
NEUTRÓFILOS – quimiotaxia e diapedese 
Amulic et al. Annu. Rev. Immunol. 2012.30:459-489. 
Borregaard, 2010. Immunity, 33. 
NEUTRÓFILOS – quimiotaxia e diapedese 
Amulic et al. Annu. Rev. Immunol. 2012.30:459-489. 
NEUTRÓFILOS – mecanismos de ação 
Amulic et al. Annu. Rev. Immunol. 2012.30:459-489. 
NEUTRÓFILOS – comunicação com outras células 
Amulic et al. Annu. Rev. Immunol. 2012.30:459-489. 
NEUTRÓFILOS – inflamação 
Produção de neutrófilos, eosinófilos e basófilos 
Granulopoese 
 
Neutrófilos 
Fonte: Hoffbrand et al, 2004 – Fundamentos de Hematologia 
Mieloblastos (mais imaturo) 
Promielócitos 
Mielocítos 
Metamielócitos 
Neutrófilos bastonetes 
Neutrófilos segmentados 
TECIDOS 
Borregaard, 2010. Immunity, 33. 
GRANULOPOESE 
Cinética dos neutrófilos 
MEDULA ÓSSEA 
Pool mitótico (2 a 3 dias) Maturação e estoque (5 a 7 dias) 
Stem cell, mieloblastos, 
promielócitos e mielócitos 
Metamielócitos, bastonetes e 
neutrófilos segmentados) 
Pool mitótico 
Quatro ou cinco 
divisões 
Cinética dos neutrófilos 
SANGUE PERIFÉRICO 
Medula óssea 
Sangue 
(margem) 
 
Tecidos 
 
Sangue 
(pool circulante) 
Tempo médio de vida: 5-10 dias 
Maturação 
Reserva 
NEUTRÓFILOS – compartimentos 
Cinética dos neutrófilos 
Em condições de estresse e em processos reacionais 
 O tempo de maturação pode ser diminuído 
 O número de divisões podem ser abolidas 
 As células podem ser liberadas no sangue periférico precocemente 
 
Em processo infecciosos 
O tempo decorrido do estágio de mielócito a neutrófilo segmentado no sangue 
periférico pode ser reduzido a  48 horas. 
Cinética dos neutrófilos 
Os neutrófilos circulam no sangue periférico cerca de 6 a 10 horas 
 
Aproximadamente a metade da quantidade de neutrófilos presentes 
no sangue periférico estão marginados 
 
Mudanças na posição de marginados para circulantes podem ocorrer 
em condições de estresse, exercícios físicos ou após a 
administração de adrenalina, levando a leucocitose transitória 
 
A taxa de produção de neutrófilos é de  1,63 x 109 células/ kg de 
peso corpóreo 
Esta produção pode aumentar dramaticamente frente a um 
estímulo inflamatório 
Neutrofilia 
Número de neutrófilos > 8.000 /uL 
(contagem absoluta desta célula no hemograma) 
NEUTROPENIA 
Número de neutrófilos < 2.000/ul 
 
Intensidade da neutropenia: 
• Discreta: 1.000 a 2.000 neutrófilos/uL de sangue 
• Moderada: 500 a 1.000 neutrófilos/uL de sangue 
• Grave: < 500 neutrófilos/uL de sangue 
 
 
 
EOSINÓFILOS 
Eosinófilos 
 
 célula de 10-15µm 
 granular, com afinidade por eosina 
 originada a partir de cél. hematopoética CD34+ 
 IL3, IL5 e GM-CSF são críticas para a estimulação da MO 
para a sua produção 
 essas citocinas também são produzidas por linfócitos T, 
CD4 e CD 8+ 
 
 
 Citoplasma com granulação grosseira alaranjada 
 
 Núcleo polimórfico (normalmente bilobulado) 
 
 Tamanho: 10-15 µm; 
 
 Frequência relativa: até 4% 
EOSINÓFILOS - morfologia 
 Grânulos contém proteína básica tóxica para parasitas e células 
 
 Também contém hidrolases ácidas, peroxidases, fosfolipases e 
catepsinas 
 
 Neutraliza a heparina e induz liberação dos basófilos 
 
 Os eosinófilos secretam IL-1, IL-3, IL-6, IL-8, TNF-α e GM-CSF 
EOSINÓFILOS - grânulos 
• Grânulos ricos em enzimas 
 
• Vida média na circulação = 14-18h 
 
• Migram para os tecidos permanecendo por aproximadamente 
12 dias 
 
• Eosinófilos maduros expressam CD16 e CD32. 
 
EOSINÓFILOS - características 
 
 
• Combate a parasitas multicelulares 
 Degranulação 
 “Fagocitose frustrada” 
 Citotóxico para parasitas e células hospedeiras 
 
 Através dos receptores Fc, os eosinófilos se conjugam com os 
parasitos recobertos com anticorpos, degranulam e liberam o 
seu conteúdo granular sobre a cutícula dos parasitos 
 
• Fagocitose de complexos Ag-Ac 
 
• Resposta alérgica 
 
 
 
EOSINÓFILOS - funções 
 
 
• Liberação de mediadores pró-inflamatórios 
 
 Estimula liberação de histamina pelos basófilos 
 
 
• Apresentação de Ag à linfócitos T 
 
 
• Redução de respostas inflamatórias 
 
EOSINÓFILOS - FUNÇÕES 
Valores da normalidade no sangue periférico 
• 50-500/µL 
 
• Eosinofilia: 
• Leve: 500-1500/µL 
• Moderada: 1500-5000/µL 
• Severa: > 5000/µL 
 
 
VALORES DE REFERÊNCIA PARA EOSINÓFILOS 
BASÓFILOS 
 Citoplasma com granulação grosseira preta ou roxa 
 Núcleo polimórfico 
 Tamanho: 12-14 µm 
 
 Frequência relativa: 0-1% 
 
BASÓFILOS - morfologia 
 
• Participam de reações alérgicas – reações de 
hipersensibilidade imediata 
 
 
•Promovem atração de eosinófilos 
 
 
•Produzem mediadores químicos importantes 
 
BASÓFILOS - FUNÇÕES 
 
• Histamina – participa reação inflamatória 
 
 
• Prostaglandinas – dor e broncoconstrição 
 
 
• IL-3 – atração de eosinófilos 
BASÓFILOS - Mediadores químicos principais 
BASOFILIA (> 0,3/ L ) 
 
• reações de hipersensibilidade 
• leucemia mielóide crônica 
• policitemia vera, metaplasia mieloide 
MONÓCITOS 
 Citoplasma azul acinzentado (vacúolos) 
 
 Núcleo irregular (reniforme) 
 
 Maior leucócito circulante 
 
 Vida na circulação: 1-3 dias 
 
 Tamanho: 12-20 µm 
 
 Frequência relativa: 1 a 10% 
MONÓCITOS - morfologia 
 Fagocitose – bactérias, debris celulares, células senescentes, partículas 
 
 Processamento de antígenos 
 
 Imunidade celular - citotoxicidade celular dependente de anticorpos 
 
 Produção de citocinas 
 
 
 Macrófagos 
MONÓCITOS - funções 
 Tamanho maior que o monócito 
 
 Grânulos no citoplasma 
 
 Formas heterogêneas 
 
 Vacúolos 
 
 Modula respostas à citocinas 
 
 Secreção de moléculas bioativas 
 
 
MACRÓFAGOS - tecidos 
Macrófagos alveolares 
 
Células de Kupffer 
 
Foam cell 
MACRÓFAGOS 
 
 
 
 
Localizações comuns: 
 
• Intestino 
 
• Trato Genitourinário 
 
• Pele 
 
• Pulmões 
 
• Medula óssea (histiócito) 
 
 
 
MACRÓFAGOS 
Ingersoll et al. Trends in Immunology 32(10). 2011. 
MACRÓFAGOS 
Ingersoll et al. Trends in Immunology 32(10). 2011. 
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LINFÓCITOS 
LINFÓCITOS 
Tipos de linfócitos 
 Linfócitos T 
 Linfócitos B 
 Natural killer - NK 
Não é possivel identificar cada um dos 
tipos de linfócitos através da análise 
morfológica (corantes de Romanovsky) 
Identificação é feita através dos antígenos 
de diferenciação (citometria de fluxo) 
CD “cluster differentiation” 
 Citoplasma azul acinzentado 
 Núcleo pleomórfico 
 Alta relação N/C 
 Tamanho: 8-10 µm 
 Meia vida na circulação: dias, meses ou anos 
 
 Frequência relativa sangue adulto: 25 a 35% 
 Frequência diferente em crianças e adultos 
LINFÓCITOS - morfologia 
LINFÓCITOS 
Tipos de linfócitos 
 Linfócitos T (resposta imune celular) 
 Linfócitos B (resposta imune humoral) 
 Natural killer – NK (resposta imune 
inespecífica) 
LINFÓCITOS 
Tanto os linfócitos T como os B são capazes de 
recircular do vaso para tecido e vice versa 
Ativaçãoda resposta imune depende: 
 Interação entre linfócitos T, B e células dendríticas 
 Moléculas de adesão presentes nas membranas 
celulares 
Os linfócitos T podem ser ativados 
Estas células que apresentam morfologia de 
células maduras, após a ativação readquire 
a aparência de blastos e entra em divisão 
LINFÓCITOS 
LINFÓCITOS T 
A maioria dos linfócitos circulantes são 
linfócitos T (~ 80%) 
 
Função 
 Imunidade mediada por células 
(reconhecimento de antígenos) 
 Inclui a hipersensibilidade tardia, rejeição 
de enxertos, reações enxerto-hospedeiro, 
defesa contra organismos intracelulares 
(como os bacilos da tuberculose e 
brucelose) e provavelmente defesa contra 
células neoplásicas. 
• Imunidade celular 
 
• Produção de citocinas 
 
• Regulação dos linfócitos B 
 
• Tipos: T helper e T citotóxico. 
 
 
 
 
 
Funções do Linfócito T 
Disciplina de Fisiologia do Sistema 
Hematopoético 2011 
SUB-TIPOS DE LINFÓCITOS T 
(Classificados quanto a função) 
 
Linfócitos T auxiliares (Helper) – CD4 
São aqueles que induzem a síntese de 
imunoglobulinas pelos linfócitos B. 
Ativam LT CD8 e Macrófagos (MØ). 
São sub-divididos em: 
 CD4 tipo 1 ou Th1: secretam IL2 e interferon 
gama, mas não secretam IL 4,5 e 6 – predomínio de 
resposta celular (LT e MØ). 
 CD 4 tipo 2 ou Th2: secretam IL 4,5 e 6 e não 
secretam IL2 e interferon gama – predomínio de 
resposta humoral (LB) 
LINFÓCITO 
Linfócitos ATIPICOS (reativos) 
SUB-TIPOS DE LINFÓCITOS T 
(Classificados quanto a função) 
 
Linfócitos T citotóxicos – CD8 
-Células infectadas 
-Células neoplásicas 
-Células alogênicas 
 
Disciplina de Fisiologia do Sistema 
Hematopoético 2011 
LINFÓCITOS 
LINFÓCITOS B (~10-15%) 
atuam na imunidade humoral, ou seja, na 
produção e secreção de anticorpos, após 
a transformação em plasmócito (Ag-
específico). 
 
Marcadores de linfócitos B 
CD34+ 
CD38+ 
CD10+ 
CD19+ 
 Imunidade humoral 
 
 Produção de anticorpos 
 
 Apresenta Ag para o Linfócito T 
 
 
 
 
 
 
Plasmócito 
Funções do Linfócito B 
Medula óssea 
Linfócito 
LINFÓCITOS 
NK “natural killer” 
São desprovidos de marcadores de 
células T e de células B, são chamados 
de células “null” 
 
Cerca de 5 % do total da população de 
linfócitos 
Sua função é destruir as células 
infectadas e células neoplásicas. 
Tem receptor para Fc de IgG 
 
Marcadores: CD16+ e CD56+ 
 
 
 
 
 
 
 
Funções das células NK 
• Imuno-regulatórias - potente capacidade de produção de 
citocinas 
 
• Função citotóxica – destruição de células infectadas e células 
tumorais 
 
 
LINFOCITOSE 
O aumento de células em divisão nos linfonodos e no 
baço é responsável pela linfocitose no sangue periférico 
Linfocitose = aumento do número absoluto de 
linfócitos no sangue periférico 
Número de linfócitos > 4,5 .103/uL no adulto 
Número de linfócitos > 9,0 . 103/uL na criança 
 fase aguda das infecções 
 corticoterapia, quimioterapia, radioterapia 
 lupus eritematoso sistêmico 
 infecções por vírus, AIDS, sarampo, polio, varicela 
 estresse e desnutrição protéico calórica 
LINFOCITOPENIA ( < 1.000/ L ) 
Cecil linfopenia < 1.500 linfócitos/ L 
 
Martini. Fundamentals of Anatomy & Physiology. 6ed. Cap22, 2004. 
Maturação e distribuição dos linfócitos 
NK CELLS 
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Williams 7ª ed. 
NK cell functions. The known and suspected biological roles of NK 
cells are indicated in red and blue, respectively. 
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Células NK