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Teste de sensibilidade aos antimicrobianos Larissa Ciappina de Camargo Mestranda em Microbiologia - UEL Termos Antimicrobiano Antibiótico Antimicrobiano é uma substância que mata ou inibe o crescimento de microrganismos Antibiótico é uma substância produzida por um microrganismo que inibi outros microrganismos. História dos Antimicrobianos HOJE 1900 Paul Ehrlich “Bala mágica” “Bala Mágica” que encontraria e destruiria patógenos de forma seletiva, porém sem afetar o hospedeiro. 3 História dos Antimicrobianos HOJE 1929 Alexander Fleming Penicillium notatum Penicilina 1944 “Bala Mágica” que encontraria e destruiria patógenos de forma seletiva, porém sem afetar o hospedeiro. 4 História dos Antimicrobianos HOJE 1932 Gerhard Domagk Corante Prontosil Rubrum Sulfa “Bala Mágica” que encontraria e destruiria patógenos de forma seletiva, porém sem afetar o hospedeiro. 5 E a História continua... Antimicrobiano Podem ser naturais Podem ser semissintéticos Podem ser sintéticos Bacteriostático e Bactericida MECANISMOS DE AÇÃO DOS ANTIBACTERIANOS Interferem na síntese da Parede Bacteriana Inibem a síntese proteica Inibem transcrição / replicação Inibem o metabolismo microbiano Alteram permeabilidade de membrana Interferem na síntese da Parede Bacteriana Inibem a síntese proteica Inibem transcrição / replicação Inibem o metabolismo microbiano Alteram permeabilidade de membrana Interferem na síntese da Parede Bacteriana BETALACTÂMICOS PENICILINAS CEFALOSPORINAS MONOBACTÂMICOS CARBAPENEMS GLICOPEPTÍDEOS (vancomicina) 15 Síntese Parede Celular Síntese Parede Celular Síntese Parede Celular Síntese Parede Celular Vancomicina L - Alanina D – Glicina L – Lisina D – Alanina D – Alanina NAG NAG NAM NAM Vancomicina Interferem na síntese da Parede Bacteriana Inibem a síntese proteica Inibem transcrição / replicação Inibem o metabolismo microbiano Alteram permeabilidade de membrana Inibem a Síntese Proteica AMINOGLICOSÍDEOS CLORANFENICOL TETRACICLINAS MACROLÍDEOS ESTREPTOGRAMINAS OXAZOLIDINONAS Síntese Proteica GENTAMICINA Estreptograminas Ligam-se à porção 50S do ribossomo. Oxazolidinonas Ligam-se à porção 50S do ribossomo. Cloranfenicol Ligam-se à porção 50S e inibe a formação da ligação peptídica. Gentamicina Muda a conformação da porção 30S, fazendo com que o código contido no mRNA seja lido incorretamente. Tetraciclina Interferem com o acoplamento entre tRNA e o complexo mRNA-ribossomo. 25 Interferem na síntese da Parede Bacteriana Inibem a síntese proteica Inibem transcrição / replicação Inibem o metabolismo microbiano Alteram permeabilidade de membrana Inibem transcrição / replicação RIFAMPICINA Inibem a atividade da RNA Polimerase QUINOLONAS Inibem a atividade da DNA Girase Interferem na síntese da Parede Bacteriana Inibem a síntese proteica Inibem transcrição / replicação Inibem o metabolismo microbiano Alteram permeabilidade de membrana Inibem o metabolismo microbiano SULFAMETOXAZOL + TRIMETOPRIM Interferem na síntese da Parede Bacteriana Inibem a síntese proteica Inibem transcrição / replicação Inibem o metabolismo microbiano Alteram permeabilidade de membrana Alteram permeabilidade de membrana POLIMIXINA Resistência aos Antimicrobianos Avalia as consequências macroeconômicas para o mundo, se a resistência antimicrobiana não for enfrentada. Prevê um retorno à idade das trevas da medicina. Era sem antimicrobianos. 34 MECANISMOS DE RESISTÊNCIA AOS ANTIBACTERIANOS Alteração da permeabilidade Os fármacos podem penetrar através da membrana celular de três formas, através da difusão pela porinas, por difusão na bicamada fosfolipídica. A penetração na bactéria depende das características intrínsecas das moléculas de antibiótico. Desta forma os compostos hidrofílicos penetram através das porinas e hidrofóbicos pela bicamada fosfolipídica. Alteração da permeabilidade: mais mecanismo com gram negativas, a membrana externa age como barreira, mas em alguns pontos existem porta de entrada para nutrientes que são chamada de porinas. Os antimicrobianos aproveitam as mesmas portas para alcançarem o alvo no interior da célula. Como mecanismo de resistência algumas porinas deixam de ser produzidas, assim a entrada do antimicrobiano fica limitada. Diminui número, aumenta seletividade ou diminuição do tamanho das porinas Ex: Pseudomonas resistente a imipenem. 36 Alteração do local de ação PBP2a Gene Pesquisar se bactéria passa a produzir só PBP2a – sem afinidade aos betalactamicos – bactéria sobrevive 37 Bomba de efluxo 38 Mecanismo enzimático Inativação dos betalactâmico No caso dos aminoglicosideos já estão descritas mais de cinquenta enzimas, estando a maioria associadas a Gram negativos. Dependendo do tipo de modificação que suceda, estas enzimas são classificadas como acetiltransferases aminoglicosídeos (AAC), adenililtransferases aminoglicosídeos (ANT) e fosfotransferases aminoglicosídeos (APH). Os aminoglicosídeos são modificados no grupo amino pela enzima AAC e no grupo hidroxilo pelas enzimas ANT e APH, perdendo a capacidade de ligação ao ribossoma. 39 TESTE DE SENSIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS Disco Difusão Diluição em caldo PCR e Eletroforese Testes Moleculares Sistemas automatizados Vitek PRÁTICA Realizar o teste de Microdiluição em caldo Interpretar o teste de Microdiluição em caldo Interpretar o teste de Macrodiluição em caldo
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