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INTRODUÇÃO A MICROBIOLOGIA PROF. DRA. FABÍOLA KEGELE Mecanismos de agressão e defesa I Professora: Jorgenilce de Souza Sales Estudo de seres microscópicos Antes da microscopia “não” existia nada menor que os insetos e do que os vermes. Procariontes e Eucariontes... • Procariotos e eucariotos são quimicamente similares (ácidos nucleicos, proteínas, lipídeos e carboidratos) • A estrutura da parede celular/ membranas e a ausência de organelas que distinguem procariotos de eucariotos. • PROCARIOTOS (pré-núcleo) Seu DNA é circular e não está envolvido por membrana DNA não associada a histonas Não possuem organelas revestidas por membrana Peptideoglicano comum na parede Fissão binária (DNA é duplicado e a célula se divide em duas) • EUCARIOTOS (núcleo verdadeiro) Seu DNA é encontrado no núcleo das células, que é separado do citoplasma por membrana nuclear em cromossomos múltiplos; DNA associado a histonas Diversas organelas revestidas por membrana Parede celular quando presente é simples Todas as bactérias apresentam: Citoplasma, Ribossomos, Membrana plasmática Nucleóide. Morfologia e Estrutura da Célula Bacteriana MORFOLOGIA BACTERIANA Cocos são geralmente redondos, mas podem ser ovais, alongados ou achatados em uma das extremidades Após a divisão para se reproduzir: Diplococos, estreptococos Tétrades Sarcínas Estafilococos MORFOLOGIA BACTERIANA A maioria apresenta-se como bastonete simples Diplobacilos apresenta-se em pares Estreptobacilos em cadeia Cocobacilos, são ovais e parecidos com os cocos. “Bacilo” em microbiologia significa a forma, como vimos aqui, e quando escrito em latim, em letra maiúscula em itálico, refere- se ao gênero específico. Ex: bactéria Bacillus anthracis é o agente do antraz. Os bacilos se dividem ao longo do seu eixo. MORFOLOGIA BACTERIANA MORFOLOGIA BACTERIANA Além das três formas básicas, existem células com formato de estrela (gênero Stella) Células retangulares e planas (arquibactérias halofílica) A forma de uma bactéria é determinada pela hereditariedade. Monomórfica é quando mantém a forma única e pleomórfica é quando podem ter muitas formas, não somente uma. Bacilos EspiraladosCocos Morfologia Bacteriana Estrutura complexa semirrígida, responsável pela forma da célula Protege o interior da célula de alterações adversas do meio ambiente externo Quase todos os procariontes possuem parede celular A principal função é prevenir a ruptura das células bacterianas quando a pressão da água dentro da célula é maior que fora dela Ajuda a manter a forma de uma bactéria e serve como ponto de ancoragem para os flagelos Clinicamente, a parede celular é importante, pois contribui para a virulência e também pode ser o local de ação de alguns antibióticos Além disso a composição química da parede é usada para diferenciar os principais tipos de bactéria Parede Celular Na maioria das bactérias gram-positivas, a parede celular consiste em muitas camadas de peptideoglicana (cerca de 50% a 90%), tornando a estrutura espessa e rígida. Além disso, as paredes celulares das bactérias gram-positivas contêm ácidos teicoicos Existem duas classes de ácidos teicoicos: ácido lipoteicoico, que atravesssa a camada de peptideoglicana e está ligado à membrana plasmática e ácido teicoico da parede, que está ligado à camada de peptideoglicana (especificidade antigênica). Por serem carregados negativamente acredita-se que os ácidos teicóicos possam ajudar no transporte de íons positivos para dento e fora da célula e no armazenamento de fósforo Paredes Celular Gram-positiva A parede celular das bactérias gram-negativas apresenta uma complexidade maior que as bactérias gram-positivas Consistem em uma ou poucas camadas de peptideoglicana (10%) e uma membrana externa Esta membrana externa corresponde a uma segunda bicamada lipídica (semelhante à membrana plasmática), localizada acima do peptideoglicano, contendo fosfolipídeos, proteínas e também lipopolissacarídeos (LPS). Presença de porinas que formam canais para passagem de nutrientes. Paredes Celular Gram-negativa Gram- positiva Gram- negativa Parede Celular Parede Celular • Gram positiva – Coloração de GRAM roxo • Gram negativa – Coloração de GRAM vermelho Que parede é mais complexa? Citologia e Estruturas da Célula Bacteriana Estruturas externas: Flagelos- As bactérias podem apresentar um número variável de flagelos, os quais, rodando sobre a sua base, permitem que a célula se movimente (motilidade). Ele é composto por três partes básicas: filamento, alça (gancho) e o corpo basal. -Filamento: Composto por uma proteína denominada flagelina. As proteínas flagelares são utilizadas para a identificação de algumas bactérias patogênicas. - Gancho: Faz a ligação entre o filamento e o corpo basal e é constituído de uma proteína diferente ao do filamento - Corpo basal: Composto por uma haste central inserida numa série de anéis. As bactérias Gram negativas possuem 2 pares de anéis e as Gram positivas apenas um par. Os anéis são responsáveis pela ancoragem do flagelo a membrana e parede celular da bactéria e pelo movimento de rotação. ESTRUTURA DE UM FLAGELO PROCARIÓTICO Fímbrias - As fímbrias são numerosos apêndices filamentosos, semelhantes a pêlos que são mais curtos, retos e finos que os flagelos. Fixação da bactéria. Elas podem ocorrer em toda a superfície da célula. Estas estruturas são constituídas de um proteína denominada pilina, e não estão relacionados com a motilidade e sim com a fixação das bactérias. Podem ocorrer nos pólos ou estar distribuída em toda a superfície bacteriana. Elas facilitam a aderência da bactéria a substratos sólidos ou aos tecidos dos organismos parasitados. Os Pili (singular: Pilus) normalmente são mais longos que as fímbrias e ocorrem em par ou único por célula. Ele esta envolvido na reprodução sexual das bactérias, por isso também é chamado de pili sexual. Forma a ponte citoplasmática que permite essa transferência genética. Glicocálice- É o termo geral utilizado para a camada viscosa, a base de polissacarídeos, que circundam as bactérias. Quando o glicocálice é organizado e firmemente acoplado a parede celular da bactéria ele recebe o nome de cápsula. Quando ele se apresenta desorganizado, sem forma e se estiver ligado frouxamente a parede celular da bactéria ele é denominado camada viscosa. Funções da cápsula: • Impedir a fagocitose por células de defesa e anticorpos; • Permite a aderência a várias superfícies (dentes, trato respiratório, mucosa intestinal, raízes de plantas e etc); • Ela também tem a função de proteger a bactéria da desidratação, da infecção dos vírus bacteriófagos; • Muitas vezes também funcionam com reservatórios de nutrientes. • Alguns antibióticos, como a penicilina, atuam inibindo a produção de cápsulas. • Algumas cápsulas podem ser formadas por polipeptídeos, e a determinação dos constituintes da cápsula é um passo importante para a identificação das bactérias. Glicocálice- Exemplo: Bacillus anthracis – encapsulado causa o antraz. Especula-se que a cápsula pode impedir a sua destruição por fagocitose. Streptococcus mutans – bactéria que causa a cárie. Streptococcus pneumoniae – causa a pneumonia somente quando as células são protegidas por uma cápsula de polissacarídeo. As não encapsuladas são fagocitadas e não causam a pneumonia. Estruturas internas: Material nuclear (nucleóide)- O nucleóide bacteriano consiste numa única molécula circular de DNA que determina as características da célula e comanda as suas atividades. Não é um verdadeiro núcleo,já que não está delimitado do resto da célula por membrana própria. Além do cromossomo bacteriano as bactérias frequentemente possuem pequenas moléculas de DNA circulares chamadas de plasmídeos. Plasmídeos : 1- Pequenas moléculas de DNA circular 2- Replicação independente do DNA cromossômico 3- Não possuem genes essencias, mas genes que conferem alguma vantagem: Capacidade de conjugar, resistência a antibióticos ou ainda capacidade de metabolizar diferentes substratos. Citoplasma- Solução aquosa (80%) com consistência de gel na qual estão suspensos todos os componentes internos; pode conter substâncias úteis para a célula como enzimas, ácidos nucléicos, lipídeos, sais minerais, glicose e outros açucares, proteínas funcionais e várias outras moléculas orgânicas. É no citoplasma que ocorre as reações químicas envolvidas, por exemplo, na síntese de componentes celulares a partir dos nutrientes. Ribossomos- São pequenos corpos granulares, com os quais ocorre a síntese de proteínas; movem-se livremente no citoplasma. São compostos por duas subunidades formados por RNAr e proteínas. Eles diferem dos ribossomos eucarióticos no tamanho (70S) e no número de proteínas e moléculas de RNAr que possuem. Grânulos (corpos) de inclusão- São grânulos que funcionam como depósito de reserva de substâncias insolúveis. Os grânulos de inclusão podem servir como uma reserva energética para as bactérias. Algumas inclusões são comuns em várias bactérias e outras são limitadas a um número pequeno de espécies, servindo então como base para a identificação. Ex: Volutina (grânulos metacromáticos), PHB (lipídeo), enxofre, glicogênio e magnetossomos (óxido de ferro). Membrana plasmática- Se situa logo abaixo da parede celular, é formada por uma bicamada lipídica (fosfolipídeos) imersa de proteínas. A membrana plasmática é o sítio de atividade enzimática específico (produção de energia e degradação de nutrientes) e de transporte seletivo de moléculas para dentro e fora da célula bacteriana. Em alguns casos, invaginações na membrana citoplasmática (mesossomos) participam no processo de divisão. Reprodução Bacteriana • Muito rápida • Forma básica de reprodução é a divisão binária (assexuada) • Mas há troca de material genético por: Conjugação, transformação e transdução Fissão Binária Transmissão genética – Recombinação genética: Conjugação - Consiste na passagem (ou troca) de material genético entre duas bactérias através de uma ponte citoplasmática formada pelo pili sexual. Transformação - A bactéria absorve moléculas de DNA disperso no meio. Esse DNA pode ser proveniente, por exemplo, de bactérias mortas. Transdução - As moléculas de DNA são transferidas de uma bactéria a outra usando vírus como vetores. Tempo de Geração: É o tempo necessário para uma célula se dividir (e sua população dobrar de tamanho). Tempo varia de acordo com o organismo; das condições ambientais (nutricionais, temperatura etc). Maioria das bactérias varia entre 1 – 3 h. Conjugação Transformação Transdução Questões de estudo dirigido: 1) Quais as diferenças entre as células procariontes e eucariontes? Com base nessas informações, como as bactérias são classificadas? 2) Identifique as principais estruturas da célula bacteriana e descreva sua composição e funções. 3) O que são fatores de virulência? Cite exemplos 3 exemplos. 4) Defina esporos (endosporos) bacterianos e justifique sua importância. 5) Descreva como as bactérias se dividem e como ocorre a transferência de informação genética entre elas? 4) Indique quais os principais sítios de ação dos antibióticos nas bactérias. 6) Como as bactérias se tornam resistentes aos antibióticos? Bibliografia • BROOKS, F.G., CAROLL, C.K., BUTEL, S.J., MORSE, A.S., MIETZNER, A.T. (2014). Microbiologia Médica de Jawetz, Melnick e Adelberg (Lange). 26ª edição. Rio de Janeiro: AMGH • MADIGAN, T.M., MARTINKO, M.J., BENDER, S.K., BUCKLEY, H.D., STAHL, A.D. (2016). Microbiologia de Brock. 14ª edição. Porto Alegre: Artmed. • TORTORA, J.G., FUNKE, R., CASE, L.C. (2012). Microbiologia. 8ª edição. Porto Alegre: Artmed.