RIA: Radioimunoensaio e suas aplicações

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RIA
Características Gerais
1959 Berson e Yalow – primeiro RIA para quantificação de insulina.
O RIA foi a primeira técnica imunológica padronizada capaz de detectar e quantificar substâncias da ordem de nano a picogramas. 
Torna-se então possível determinar qualquer tipo de molécula biológica, desde que haja um receptor específico e que a molécula biológica possa ser marcada.
Definição
O termo radioimunoensaio (RIA) é mais empregado em ensaios com antígenos marcados.
O termo imunorradiométrico (IRMA) é utilizado em ensaios com anticorpos marcados.
Apresenta alta sensibilidade que é conferida pela detecção radioativa.
O RIA também apresenta elevada especificidade.
Graças à sua especificidade, os ensaios podem acontecer diretamente no líquido biológico.
Por causa da sua sensibilidade, o volume de amostra pode ser menor. 
Vantagens
Método muito sensível;
Específico e de alta afinidade;
Baixo custo;
Requer pouca amostra;
Rápido;
Desvantagens
Instabilidade dos radioisótopos.
Risco operacional.
Necessidades de medidas especiais.
Elevado custo de biossegurança e problemas com o descarte de material.
Aplicações
Alta sensibilidade → permite dosagem de substâncias não encontradas em concentrações suficientes para serem percebidas por outras técnicas.
polipeptídios, catecolaminas, esteróides, antibióticos, hormônios tireoidianos, proteínas, vitaminas, drogas e outras.
vírus da hepatite B.
marcador tumoral.
Princípios
Reação de competição por um receptor comum entre uma substância a ser determinada e a mesma substância marcada radioisotopicamente.
- Componentes: 
Anticorpo radioativo
Antígeno radioativo
Amostra a ser testada
Leitor radiométrico
Características dos Marcadores
125 I e 131I
 É o radioisótopo mais comumente empregado.
 Meia vida de 57,5 dias.
 Liga-se facilmente aos resíduos de tirosina das proteínas.
 Produz radiação Υ.
 Estabilidade menor que 3H.
 Dosagem de hormônios protéicos.
Trítio (3H) 
Produz radiação β .
Dosagem de esteróides.
Carbono 14
Tipos de RIA
De competição com Ag marcado.
 De competição com Ac marcado.
 Sanduíche ou captura de Ag.
 Para detecção de IgE:
 Paper Radioimmunosorbent Test (PRIST).
Radioallergosorbent Test (RAST).