Conhecimentos Específicos

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CONHECIMENTOS 
ESPECÍFICOS 
Conhecimentos Específicos 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
SISTEMA DE ENSINO 
 
 
 
 
 
 
Livro Eletrônico 
Imunofluorescência 
Aspectos teóricos
Profª. Débora Juliani
Imunofluorescência
Testes sorológicos ou Imunoensaios (IE): técnicas para detectar e quantificar antígenos e anticorpos, ou outras 
substancias que desempenhem o papel de antígeno no ensaio, tais como fármacos, hormônios, ácidos nucleicos, 
citocinas, receptores de células, etc.
Reagentes marcados
radioativos
Reagentes não marcados
maior sensibilidade → amplificam o sinal
enzimáticos
quimioluminescentes FLUORESCENTES
menor sensibilidade → necessária a formação de 
grandes imunocomplexos
Ex: precipitação não automatizada
A amplificação do sinal também pode ser obtida com o emprego de partículas, como na aglutinação e nos métodos 
automatizados de precipitação, que são híbridos entre os métodos com reagentes marcados e não marcados
Imunofluorescência
Imunofluorescência (IF): Baseia-se na capacidade das moléculas de anticorpos de se ligarem covalentemente a 
fluorocromos sem perder sua reatividade específica com o antígeno (conjugação em grupos não críticos do Ac) 
Fluorocromos: moléculas complexas
(anéis com duplas ligações) capazes de 
emitir fluorescência ao serem excitadas →
absorvem luz em λ menor (maior energia) 
e, instantaneamente, emitem luz em 
λ maior (menor energia)
Os espectros de absorção e de fluorescência de um fluorocromo em 
geral são próximos
Tempo de armazenamento da energia: 10–7 a 10–9 segundos
mais utilizados: isotiocianato de fluoresceína
absorvem nas regiões UV e próxima do 
visível e emitem luz na faixa do visível
Imunofluorescência
O Ac a ser marcado deve ser uma preparação purificada de gamaglobulina para aumentar a eficiência da coloração e 
evitar colorações não especificas, pois os fluorocromos também marcam a albumina e as frações α e β globulinas. 
A intensidade de luz emitida pela fluoresceína depende do pH do meio, sendo máxima em pH 8,5.
O uso de corantes diminui a coloração de fundo e melhora o contraste 
Microscópio de fluorescência
- fonte de luz de alta intensidade: lâmpada
de mercúrio ou de quartzo-halogênio
- filtros de excitação: relacionam o
comprimento de onda capaz de ativar a
fluorescência
- filtros barreira: removem interferentes da
luz e permitem alta transmissão da
fluorescência emitida
Imunofluorescência
Pesquisa de Ag na amostra (células ou tecidos) 
Imunofluorescência direta
Uso de Ac específico e ÚNICO, marcado com 
fluorocromo (conjugado)
Conjugado + Ag → imunocomplexo
Elevada sensibilidade e especificidade
Imunofluorescência
Avaliação da especificidade
Imunofluorescência direta
Método de bloqueio Método de neutralização 
Ag + Ac específico não marcado, antes da 
adição do conjugado específico
Ac específico marcado é absorvido ao Ag 
antes da adição ao preparado
Empregando-se anticorpos de diferentes especificidades marcados com fluorocromos contrastantes, 
podem-se localizar componentes diferentes dentro de uma célula, diferenciar uma célula de outra ou 
localizar a distribuição de antígenos em células ou tecidos. 
Imunofluorescência
Pesquisa de Ag na amostra
Imunofluorescência indireta
amplificar o sinal e aumentar a sensibilidade de detecção
Pesquisa de Ac IgG (preferencialmente) na amostra
Ag padronizados fixados em lâminasAc não marcado tem mais sítios de ligação que 
o Ag → amplificação com o uso de 2 Ac
Desvantagens: maior tempo de reação, mais 
reagentes e pode ser menos especifica
Diluições seriadas do soro → titulação
Imunofluorescência
A maior intensidade de fluorescência observada nas técnicas indiretas se deve ao maior número de moléculas 
fluorescentes que irão corresponder a cada determinante antigênico
Imunofluorescência indireta
Método diagnóstico de referência na sorologia de muitas doenças
sensível
específico
reprodutível
padronização e 
execução simples
mesmo conjugado para 
sistemas diferentes 
classes e 
subclasses de Ac
Imunofluorescência
técnica de amplificação do sinal da reação, empregada em IF, ELISA, imunoblotting, etc.
Sistema avidina/biotina 
avidina + biotina: interação biológica não covalente mais forte que se conhece
avidina + fluorocromo biotina + anticorpo e fluorocromo
Imunofluorescência 
Questões
Profª. Débora Juliani
COPESE - UFPI - 2017 - UFPI - Análises Clínicas: A detecção do antígeno diretamente em células ou tecidos,
intracelular ou de membrana, utilizando um anticorpo específico marcado com fluorocromo corresponde à
técnica de
A) Imunofluorescência indireta.
B) Aglutinação direta.
C) Imunofluorescência direta.
D) Teste de Coombs.
E) Aglutinação indireta.
COPESE - UFPI - 2017 - UFPI - Análises Clínicas: A detecção do antígeno diretamente em células ou tecidos,
intracelular ou de membrana, utilizando um anticorpo específico marcado com fluorocromo corresponde à
técnica de
A) Imunofluorescência indireta.
B) Aglutinação direta.
C) Imunofluorescência direta.
D) Teste de Coombs.
E) Aglutinação indireta.
UFTM - 2019 - UFTM - Biomédico: Sobre a técnica de imunofluorescência, assinale a afirmativa INCORRETA:
A) É necessário um microscópio com luz polarizada para detecção dos alvos.
B) É um tipo de imuno-histoquímica, que pode utilizar mais de um fluorocromo, podendo ser observado mais de
um alvo por reação.
C) Um aspecto a ser considerado é a autofluorescência natural dos tecidos.
D) A técnica pode utilizar anticorpos monoclonais ou policlonais e pode ser direta ou indireta.
UFTM - 2019 - UFTM - Biomédico: Sobre a técnica de imunofluorescência, assinale a afirmativa INCORRETA:
A) É necessário um microscópio com luz polarizada para detecção dos alvos.
B) É um tipo de imuno-histoquímica, que pode utilizar mais de um fluorocromo, podendo ser observado mais de
um alvo por reação.
C) Um aspecto a ser considerado é a autofluorescência natural dos tecidos.
D) A técnica pode utilizar anticorpos monoclonais ou policlonais e pode ser direta ou indireta.
IBFC - 2018 - Prefeitura de Divinópolis - MG - Laboratório: Os imunoensaios são técnicas para a detecção ou
quantificação de antígenos ou anticorpos, podendo utilizar reagentes marcados ou não marcados. Em relação
a técnica de imunofuorescência assinale a alternativa incorreta.
A) Imunofuorescência direta é muito utilizada para a pesquisa de vírus respiratórios (infuenza, parainfuenza,
vírus sincicial respiratório e adenovírus)
B) Imunofuorescência indireta é o teste de referência na sorologia de muitas doenças, como as infecciosas e
auto-imunes
C) Imunofuorescência indireta detecta anticorpos específicos contra microorganismos
D) As provas de tipagem ABO são realizadas pela técnica de imunofuorescência direta
IBFC - 2018 - Prefeitura de Divinópolis - MG - Laboratório: Os imunoensaios são técnicas para a detecção ou
quantificação de antígenos ou anticorpos, podendo utilizar reagentes marcados ou não marcados. Em relação
a técnica de imunofuorescência assinale a alternativa incorreta.
A) Imunofuorescência direta é muito utilizada para a pesquisa de vírus respiratórios (infuenza, parainfuenza,
vírus sincicial respiratório e adenovírus)
B) Imunofuorescência indireta é o teste de referência na sorologia de muitas doenças, como as infecciosas e
auto-imunes
C) Imunofuorescência indireta detecta anticorpos específicos contra microorganismos
D) As provas de tipagem ABO são realizadas pela técnica de imunofuorescência direta
IBFC - 2016 - SES-PR - Laboratório: A técnica sorológica em que se usa um reagente que é uma anti gama
globulina fluoresceinada para se visualizar a reação antígeno-anticorpo denomina-se:
A) Hemaglutinação.
B) Quimioluminescência.
C) Radio-Imunoensaio
D) Imunofluorescência.
IBFC - 2016 - SES-PR - Laboratório: A técnica sorológica em que se usa um reagente que é uma anti gama
globulina fluoresceinada para se visualizar a reação antígeno-anticorpo denomina-se:A) Hemaglutinação.
B) Quimioluminescência.
C) Radio-Imunoensaio
D) Imunofluorescência.
INSTITUTO AOCP - 2015 - EBSERH - Citopatogia: Na técnica de imunofluorescência, utilizamos anticorpos
marcados com corantes fluorescentes. A respeito dessa técnica, assinale a alternativa correta.
A) Após a reação antígeno-anticorpo, podemos visualizar o complexo formado em um microscópio óptico.
B) É necessário que não haja a ligação entre o antígeno e o anticorpo para que seja emitida fluorescência.
C) Os fluorocromos mais utilizados são a fluoresceína isocianetada (FITC) e a rodamina.
D) Na imunofluorescência indireta, o anticorpo marcado liga-se diretamente ao antígeno.
E) A imunofluorescência só ocorrerá caso não ocorra a ligação antígeno-anticorpo.
INSTITUTO AOCP - 2015 - EBSERH - Citopatogia: Na técnica de imunofluorescência, utilizamos anticorpos
marcados com corantes fluorescentes. A respeito dessa técnica, assinale a alternativa correta.
A) Após a reação antígeno-anticorpo, podemos visualizar o complexo formado em um microscópio óptico.
B) É necessário que não haja a ligação entre o antígeno e o anticorpo para que seja emitida fluorescência.
C) Os fluorocromos mais utilizados são a fluoresceína isocianetada (FITC) e a rodamina.
D) Na imunofluorescência indireta, o anticorpo marcado liga-se diretamente ao antígeno.
E) A imunofluorescência só ocorrerá caso não ocorra a ligação antígeno-anticorpo.
INSTITUTO PRÓ-MUNICÍPIO - 2015 - ISGH - Análises Clínicas: As reações imunológicas que envolvem a ligação
antígeno-anticorpo podem ser visualizadas ou quantificadas por meio de diferentes marcadores. Sobre o
teste de imunofluorescência, é INCORRETO afirmar:
A) A técnica de imunofluorescência, utiliza anticorpos marcados com corantes fluorescentes para revelar a
formação de imunocomplexos;
B) A imunofluorescência direta é um método utilizado para identificar somente antígenos fúngicos;
C) A imunofluorescência indireta é realizada em duas etapas: na primeira os anticorpos não são marcados e na
segunda etapa um anticorpo antiimuniglobulina conjugado com fluoresceína é adicionado;
D) Na imunofluorescência os anticorpos marcados são chamados de conjugados.
INSTITUTO PRÓ-MUNICÍPIO - 2015 - ISGH - Análises Clínicas: As reações imunológicas que envolvem a ligação
antígeno-anticorpo podem ser visualizadas ou quantificadas por meio de diferentes marcadores. Sobre o
teste de imunofluorescência, é INCORRETO afirmar:
A) A técnica de imunofluorescência, utiliza anticorpos marcados com corantes fluorescentes para revelar a
formação de imunocomplexos;
B) A imunofluorescência direta é um método utilizado para identificar somente antígenos fúngicos;
C) A imunofluorescência indireta é realizada em duas etapas: na primeira os anticorpos não são marcados e na
segunda etapa um anticorpo antiimuniglobulina conjugado com fluoresceína é adicionado;
D) Na imunofluorescência os anticorpos marcados são chamados de conjugados.
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Aspectos teóricos
Profª. Débora Juliani
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Testes rápidos: testes de fácil execução, que dispensam estrutura laboratorial e cuja execução, leitura e interpretação 
dos resultados são feitas em, no máximo, 30 minutos
A utilização dos testes rápidos permite atender à crescente demanda pelo diagnóstico de agravos relevantes à
saúde publica, visto que sua utilização aumenta a agilidade da resposta aos indivíduos e permite seu rápido 
encaminhamento para assistência médica e início de tratamento
Liberação dos resultados e assistência ao paciente em uma única consulta
Auxilia na prevenção da transmissão vertical, facilita o diagnóstico em populações-chave e promove o acolhimento 
imediato, dentro da estrutura assistencial do SUS
Aumentam a resolutividade do SUS → conhecimento de sua situação imunológica
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Amostras
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Tipos de testes rápidos
Imunocromatografia 
de fluxo lateral
Imunocromatografia de dupla 
migração (ou de duplo percurso – DPP)
Imunoconcentração Fase sólida
Pesquisar Ag ou Ac contra os agentes infecciosos para os quais foram projetados
Pesquisa de Ac: Ag imobilizados na membrana de nitrocelulose para a captura dos Ac presentes na amostra
Pesquisa de Ag: Ac imobilizados na membrana de nitrocelulose para a captura dos Ag presentes na amostra
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Imunocromatografia de fluxo lateral
utilizam uma membrana de nitrocelulose subdividida em
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Imunocromatografia de fluxo lateral
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Imunocromatografia de dupla migração (ou de duplo percurso – DPP)
utilizam uma membrana de nitrocelulose na qual estão ligados antígenos e são subdivididos em
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Imunocromatografia de dupla migração (ou de duplo percurso – DPP)
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Imunoconcentração (flow through)
utilizam um dispositivo contendo
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Imunoconcentração (flow through)
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Fase sólida
baseiam-se no princípio metodológico de um ELISA indireto. 
A fase sólida se apresenta na forma de um pente com 12 dentes contendo
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes rápidos
Fase sólida
Conforme é indicado pelo fabricante, na área de reação existem três locais para leitura do teste: 
um na área de controle (C) e dois na área específica com diferentes antígenos 
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes de amplificação de ácidos nucléicos
Teste de amplificação de ácidos nucleicos (do inglês Nucleic Acid Amplification Test - NAAT): amplificação do RNA ou 
DNA de vírus e bactérias por Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), que a partir de pequena quantidade de cópias de 
ácido nucléico consegue detectar mais precocemente a presença do agente infeccioso
Objetivo: diminuir o período de janela imunológica (período compreendido entre o contato com o antígeno 
hemotransmissível e a produção de anticorpos em níveis detectáveis pelos testes sorológicos atuais). 
Uso mais comum: bolsas de sangue destinadas à transfusão
HIV: de 19-22 dias para 10 dias HCV: de 60 dias para 11 dias
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Testes de amplificação de ácidos nucléicos
O NAAT é complementar a sorologia e não possui a capacidade de substituí-la uma vez que com a progressão da 
infecção a carga viral tende a ficar em alguns momentos indetectável
Eclipse viral ou latência: vírus (HCV e HIV) apresenta replicação local intracelular e o organismo ainda não produziu 
anticorpos para o agente infeccioso → total garantia de detecção de agentes infecciosos não é proporcionada por 
nenhum teste utilizado→ não sendo possível detectar a presença de antígenos e nem anticorpos circulantes
Kit NAAT HIV/HCV Brasileiro
96 reações
2 controles negativos 2 controles positivos 92 reações
minipool de 6 amostras
(92 x 6 = 552 amostras)
minipool positivo
as seis amostras são processadas em uma 
próxima rotina separadamente (“single”) para 
identificação da amostra positiva 
Testes rápidos e amplificação de ácidos nucléicos
Questões
Profª. Débora Juliani
COMPERVE - 2015 - UFRN - Farmacêutico Bioquímico - UFRN: O teste rápido para detecção do HIV tem como
princípio metodológico a imunocromatografia de fluxo lateral. Esse teste apresenta a vantagem de não exigir
grandes expertises dos executores, com resultado em cerca de 20 minutos. Em relação aos novos testes
rápidos para detecção do HIV, é correto afirmar:
A) apesar de apresentarem alta especificidade, têm sensibilidade baixa com alta incidência de resultados falsosnegativos.
B) apesar de serem muito sensíveis, apresentam baixa especificidade e, consequentemente, não se prestam ao
diagnóstico.
C) apresentam performance comparável aos EIA (enzima imuno ensaio), sendo aplicável seu uso para o
diagnóstico do HIV.
D) são aplicados como triagem e nunca como diagnóstico pois não apresentam resultados confiáveis.
COMPERVE - 2015 - UFRN - Farmacêutico Bioquímico - UFRN: O teste rápido para detecção do HIV tem como
princípio metodológico a imunocromatografia de fluxo lateral. Esse teste apresenta a vantagem de não exigir
grandes expertises dos executores, com resultado em cerca de 20 minutos. Em relação aos novos testes
rápidos para detecção do HIV, é correto afirmar:
A) apesar de apresentarem alta especificidade, têm sensibilidade baixa com alta incidência de resultados falsos
negativos.
B) apesar de serem muito sensíveis, apresentam baixa especificidade e, consequentemente, não se prestam ao
diagnóstico.
C) apresentam performance comparável aos EIA (enzima imuno ensaio), sendo aplicável seu uso para o
diagnóstico do HIV.
D) são aplicados como triagem e nunca como diagnóstico pois não apresentam resultados confiáveis.
UPENET/IAUPE - 2014 - SES-PE - Analista em Saúde - Biomédico: Os testes rápidos são atualmente os mais
utilizados em triagem de diversos tipos de doença. Isso se deve à metodologia simples neles empregada.
Assinale a alternativa que contém o fundamento metodológico aplicado nos testes rápidos.
A) Imunoprecipitação
B) Aglutinação
C) Imunodifusão
D) Imunocromatografia
E) Floculação em látex
UPENET/IAUPE - 2014 - SES-PE - Analista em Saúde - Biomédico: Os testes rápidos são atualmente os mais
utilizados em triagem de diversos tipos de doença. Isso se deve à metodologia simples neles empregada.
Assinale a alternativa que contém o fundamento metodológico aplicado nos testes rápidos.
A) Imunoprecipitação
B) Aglutinação
C) Imunodifusão
D) Imunocromatografia
E) Floculação em látex
IBFC - 2016 - Prefeitura de São Paulo - SP - Analista de Saúde: Considerando o teste rápido para Sífilis, analise
as afirmativas abaixo, dê valores Verdadeiro (V) ou Falso (F) e assinale a alternativa que apresenta a
sequência correta de cima para baixo.
( ) O teste rápido para sífilis é um teste imunocromatográfico, treponêmico, de uso único para detecção de
anticorpos específicos para Treponema pallidum.
( ) Pode ser realizado com amostra de sangue total, soro ou plasma.
( ) O diagnóstico é baseado exclusivamente em exames de microscopia e exames sorológicos.
( ) Em todos os casos, sem exceção, há a recomendação de tratamento somente com resultado do teste rápido
reagente.
A) V,F,V,F.
B) V,V,F,V.
C) F,F,V,V.
D) F,V,V,V.
E) V,V,F,F.
IBFC - 2016 - Prefeitura de São Paulo - SP - Analista de Saúde: Considerando o teste rápido para Sífilis, analise
as afirmativas abaixo, dê valores Verdadeiro (V) ou Falso (F) e assinale a alternativa que apresenta a
sequência correta de cima para baixo.
( ) O teste rápido para sífilis é um teste imunocromatográfico, treponêmico, de uso único para detecção de
anticorpos específicos para Treponema pallidum.
( ) Pode ser realizado com amostra de sangue total, soro ou plasma.
( ) O diagnóstico é baseado exclusivamente em exames de microscopia e exames sorológicos.
( ) Em todos os casos, sem exceção, há a recomendação de tratamento somente com resultado do teste rápido
reagente.
A) V,F,V,F.
B) V,V,F,V.
C) F,F,V,V.
D) F,V,V,V.
E) V,V,F,F.
FDC - 2014 - IF-SE - Enfermeiro: O teste com fluido oral para detecção do HIV é um tipo de teste rápido, cujo
resultado é evidenciado em 30 minutos. Para a obtenção do material para o exame, deve-se proceder da
seguinte maneira:
A) coletar a saliva produzida pelo cliente, depositada no pote coletor estéril
B) raspar, com espátula arredondada na ponta , o conteúdo presente na parte posterior da língua
C) extrair, com haste coletora, o fluido da parte final da gengiva com o começo da mucosa da bochecha
D) aspirar, com seringa estéril de ponta fina, a saliva contida ao longo da bolsa formada pela curvatura da
bochecha
FDC - 2014 - IF-SE - Enfermeiro: O teste com fluido oral para detecção do HIV é um tipo de teste rápido, cujo
resultado é evidenciado em 30 minutos. Para a obtenção do material para o exame, deve-se proceder da
seguinte maneira:
A) coletar a saliva produzida pelo cliente, depositada no pote coletor estéril
B) raspar, com espátula arredondada na ponta , o conteúdo presente na parte posterior da língua
C) extrair, com haste coletora, o fluido da parte final da gengiva com o começo da mucosa da bochecha
D) aspirar, com seringa estéril de ponta fina, a saliva contida ao longo da bolsa formada pela curvatura da
bochecha
COSEAC - 2014 - UFF - Médico - Infectologista: Os testes de amplificação de ácidos nucleicos, denominados
HCV-RNA, são indicados:
A) para caracterizar transmissão horizontal.
B) para confirmar diagnóstico de hepatite C.
C) somente em acidentes com materiais biológicos.
D) na definição da estratégia de tratamento da hepatite crônica.
E) por serem capazes de identificar os diversos genótipos, subtipos e populações mistas do HCV.
COSEAC - 2014 - UFF - Médico - Infectologista: Os testes de amplificação de ácidos nucleicos, denominados
HCV-RNA, são indicados:
A) para caracterizar transmissão horizontal.
B) para confirmar diagnóstico de hepatite C.
C) somente em acidentes com materiais biológicos.
D) na definição da estratégia de tratamento da hepatite crônica.
E) por serem capazes de identificar os diversos genótipos, subtipos e populações mistas do HCV.
VUNESP - 2015 - HCFMUSP - Patologia Clínica: No caso da AIDS, a presença de anticorpos é usada em triagens
nos bancos de sangue, excluindo o indivíduo como doador; entretanto, há um curto período no qual não se
pode identificar os indivíduos infectados pelo HIV com os testes usuais (anticorpos). Qual é a técnica
molecular que também está sendo utilizada e permite identificar a presença do vírus logo após a infecção?
A) Sequenciamento.
B) Citometria de fluxo.
C) Técnica de amplificação do ácido nucleico (NAT).
D) Captura híbrida.
E) Western blotting.
VUNESP - 2015 - HCFMUSP - Patologia Clínica: No caso da AIDS, a presença de anticorpos é usada em triagens
nos bancos de sangue, excluindo o indivíduo como doador; entretanto, há um curto período no qual não se
pode identificar os indivíduos infectados pelo HIV com os testes usuais (anticorpos). Qual é a técnica
molecular que também está sendo utilizada e permite identificar a presença do vírus logo após a infecção?
A) Sequenciamento.
B) Citometria de fluxo.
C) Técnica de amplificação do ácido nucleico (NAT).
D) Captura híbrida.
E) Western blotting.
Imunoterapia passiva e vacinas para patógenos 
causadores de infecções hospitalares
Aspectos teóricos
Profª. Débora Juliani
Tipos de Imunização
Imunização passiva: injeção de anticorpos pré formados (imunoglobulinas), seja na forma purificada ou em soros
contendo o anticorpo, para fornecer proteção imediata e temporária ou ainda tratamento a uma pessoa. 
Imunização ativa: resposta imune é estimulada pelo contato com um imunógeno → exposição a um agente infeccioso 
(imunização natural) ou através de exposição a microrganismos ou seus antígenos em vacinas. 
Os recém-nascidos recebem a imunidade passiva natural através das imunoglobulinas materna que cruzam a 
placenta (IgG) ou estão presente no leite materno (IgA) → capacidades protetoras IMEDIATAS
Na exposição subsequente ao antígeno, uma resposta imune secundária é ativada, e esta é mais rápida e mais 
eficaz em proteger o indivíduo, ou o anticorpo está presente para bloquear a disseminação ou função do agente.
Imunização passiva-ativa: fornecimento de proteção imediata (curto prazo) na forma de anticorpos, assim como 
proteção de longo prazo na forma de imunização ativa.
Prevenção de tétano em indivíduos não imunizados que apresentam ferimento contaminado. Tanto a antitoxina 
tetânica quanto o toxoide tetânico devem seradministrados. A administração deve ser feita em locais distintos, a 
fim de que os anticorpos da antitoxina não neutralizem o toxoide
Tipos de Imunização
Imunização natural: ocorrência espontânea 
(infecção no caso de imunidade ativa ou transmissão vertical no caso de imunidade passiva)
Imunização artificial: induzida 
(vacinação no caso de imunidade ativa ou soroterapia no caso de imunidade passiva
Imunoterapia passiva
Imunização passiva artificial: administração de anticorpos pré-formados a um indivíduo para prevenir ou atenuar as 
manifestações clínicas de uma doença, tratar intoxicações causadas pelo veneno de animais peçonhentos ou por toxinas 
de agentes infecciosos (antitoxinas)
Atividade biológica: quantidade de anticorpos existentes
Esterelidade: ausência de contaminações com microrganismos 
Inocuidade: segurança para o uso humano
Apirogenicidade: ausência de substâncias que alterem a temperatura dos pacientes 
Imunoterapia passiva
Tipos de soros
Heterólogo: Ac policlonais produzidos em indivíduos de espécies diferentes da espécie-alvo (humanos), geralmente 
cavalos (equinos), hiperimunizados com o(s) antígeno(s) de interesse. 
Homólogo: Ac policlonais produzidos em indivíduos da mesma espécie, hiperimunizados com o(s) antígeno(s) de 
interesse.
Não há risco de 
transmissão de 
infecções
Pode causar reações 
de hipersensibilidade 
tipo III (doença do soro)
Mais baratos
Pode haver excesso de formação de 
imunocomplexos →
depósitos endoteliais → reações 
inflamatórias
Risco de transmissão 
de doenças 
(AIDS, Hepatites)
Menor chance de 
reações de 
hipersensibilidade
Mais caros
Imunoterapia passiva
Imunoglobulinas
Anticorpos obtidos a partir de plasma de doadores selecionados (adultos e sadios), da mesma espécie do receptor, 
em cujo plasma há grandes concentrações de anticorpos da doença contra a qual se quer efetivar a proteção
Imunoglobulina humana normal ou gamaglobulina standard: gamaglobulinas para vários tipos de infecção →
reduzir o risco da infecção e/ou neutralizar a ação de toxinas
Prevenção de infecções em pessoas suscetíveis (agamaglobulinemia ou hipogamaglobulinemia) e em 
situações de pós-exposição (imunoglobulina anti-hepatite B (IGAHB)
Imunoglobulina específica ou gamaglobulina hiperimune: obtida de doadores que receberam imunização ativa 
recente ou de convalescentes da doença infecciosa específica contra a qual se pretende proteger.
Ex: imunoglobulinas anti-hepatite B, antitetânica, antirrábica e antivaricela zoster
Imunoterapia passiva
Doença do soro
Reação sistêmica de hipersensibilidade tipo III mediada por imunocomplexos, que ocorre após a administração de 
soro heterólogo (porção Fc dos anticorpos equinos), com subsequente ativação do complemento.
Sintomas: Edema e eritema local, febre, 
mal estar e erupções de pele
Tratamento: anti-histamínicos, corticoide 
e analgésicos
 
 
Imunoterapia passiva
Principais tipos de soroterapia
Antitoxina tetânica: tratamento e profilaxia do tétano
Antitoxina botulínica: utilizada no tratamento de 
botulismo → Ac contra as toxinas botulínicas A, B e E
Antitoxina diftérica: tratamento da difteria
Antirrábica: utilizada no tratamento da raiva
Vacinas
O termo vacina é derivado do vírus vaccinia, um membro menos virulento da família poxvírus que é utilizado para 
imunizar pessoas contra a varíola
vacinas
viva inativada
DNA
toxoide
mortas
subunidades
toxinas inativadas
da cápsula ou de proteínas
Vacinas
vivas
Contém organismos limitados em sua capacidade de causar doença (Ex: organismos não virulentos ou atenuados) mas 
que possam ser capazes de multiplicar-se no organismo hospedeiro para que ocorra a resposta imune
Especialmente úteis para proteção contra infecções causadas por vírus envelopados, que exigem respostas imunes das 
células T para a resolução da infecção
Se assemelha à infecção natural pois o sistema imune é incapaz de diferenciar entre uma infecção pelo microrganismo
vacinal e o microrganismo selvagem: são desenvolvidas respostas imunes humorais, celulares e de memória.
A imunidade geralmente é duradoura e, dependendo da via de administração, pode se assemelhar à resposta imune 
normal contra o agente infectante
Vacinas
inativada
Grande quantidade de Ag para produzir uma resposta de Ac protetora, com microrganismos incapazes de multiplicar-se 
→ sem risco de infecção pelo agente
Podem ser produzidas por inativação química (Ex: formol) ou física (radiação UV, aquecimento, etc.) de bactérias, toxinas 
bacterianas, ou vírus, ou por purificação ou síntese dos componentes ou subunidades dos agentes infecciosos
Proteção contra a maioria das bactérias e vírus que não podem ser atenuados, que podem causar infecção recorrente ou 
que têm potencial oncogênico.
Geralmente são administradas com um adjuvante, que 
reforça sua imunogenicidade
Geralmente são seguras, exceto em pessoas alérgicas aos 
componentes da vacina (Ex: albumina)
Vacinas
DNA
Novo meio de imunização: segura, barata e de fácil obtenção, porém induz respostas imunes muito fracas em humanos
São constituídas por um plasmídeo bacteriano que contém 
gene para uma proteína (antígeno) contra a resposta 
imune será induzida.
O DNA é injetado no músculo ou na pele e é captada pelas 
células dendríticas, musculares ou macrófagos, ativando 
resposta de células T e a expressão do gene para o 
imunógeno como se fosse uma infecção natural
Vacinas
DNA
Novo meio de imunização: segura, barata e de fácil obtenção, porém induz respostas imunes muito fracas em humanos
São constituídas por um plasmídeo bacteriano que contém 
gene para uma proteína (antígeno) contra a resposta 
imune será induzida.
O DNA é injetado no músculo ou na pele e é captada pelas 
células dendríticas, musculares ou macrófagos, ativando 
resposta de células T e a expressão do gene para o 
imunógeno como se fosse uma infecção natural
Vacinas
Adjuvantes: substâncias presentes na composição de algumas vacinas e que aumentam a resposta imune dos 
produtos que contêm microrganismos inativados ou seus componentes
Inflamação local: recrutamento de células 
inflamatórias e ativação de macrófagos 
Retardam destruição do antígeno vacinal: 
prolonga estímulo linfocitário
Não são utilizados em vacinas que contêm 
microrganismos vivos
Os sais de alumínio são os adjuvantes mais 
utilizados em vacinas para o uso humano
Vacinas
Propriedade Viva Inativada
Via de administração Natural (oral ou respiratória) ou injeção Injeção
Custo Baixo Alto
Número de doses Única Múltiplas
Necessidade de adjuvante Não Sim
Duração da imunidade Longo prazo Curto prazo
Classe de anticorpos de resposta IgG e IgA (se via natural) IgG
Imunidade celular Sim Não
Efeitos colaterais Sintomas brandos ocasionais Braço ocasionalmente dolorido
Reversão para virulência Raramente Nenhuma
Instabilidade ao calor Sim Não
Vacinas bacterianas
DTP
DT
Vacinas bacterianas
Vacina de Streptococcus pneumoniae
Vacina de subunidade: polissacarídeos capsulares de 23 sorotipos mais prevalentes (sorotipos ausentes poderão causar doença)
Recomendada para indivíduos com mias de 60 anos e pacientes em qualquer idade portadores de doenças crônicas, 
com função esplênica comprometida ou esplenectomizados, como proteção contra PNEUMONIA.
Vacina de Neisseria meningitidis
Vacina de subunidade: polissacarídeos capsulares
É recomendada em situações de risco elevado de MENINGITE (Ex: durante um surto, quando recrutas militares 
ingressam em campos de treinamento ou quando indivíduos viajam para regiões onde a meningite é hiperendêmica)
Vacinas bacterianas
Vacina de Haemophilus influenzae
Vacina de subunidade: polissacarídeos capsulares
É recomendada a crianças entre 2 e 15 meses para prevenir MENINGITE
Vacina de Salmonella typhi
Vacina de subunidade (toxina inativada) e Vacina viva atenuada (linhagem viva atenuada da bactéria)
Recomendada a indivíduos residentes ou que viajam por regiões onde existe risco elevado deFEBRE TIFOIDE, bem como 
para indivíduos em contato próximo com pacientes ou portadores crônicos
Vacinas bacterianas
Vacina de Corynebacterium diphtheriae
Vacina de toxoide: exotoxina tratada com formaldeído
Indicada para todas as crianças, como proteção contra a DIFTERIA, sendo administrada em três doses, aos dois, quatro e 
seis meses de idade, com reforços administrados após um ano e em intervalos subsequentes.
Vacina de Clostridium tetani
Vacina de toxoide: toxoide tetânico
Administradas a todos os indivíduos precocemente e, em seguida, na forma de reforços como proteção contra o TÉTANO
Vacinas bacterianas
Vacina de Bordetella pertussis
Vacina de toxoide: toxina pertússis inativada
Indicada a todas as crianças como proteção contra COQUELUCHE. É geralmente administrada em combinação com os 
toxoides diftérico e tetânico (vacina DPT ou DTPa)
Vacina de Mycobacterium bovis (BCG)
Vacina viva atenuada: linhagem viva atenuada da bactéria
Recomendada, em alguns países, para crianças sob alto risco de exposição à TUBERCULOSE ativa
Vacinas bacterianas
Vacina de Vibrio cholerae
Vacina de microrganismo morto
Indicada para indivíduos que viajam para regiões onde a CÓLERA é endêmica
Vacina de Rickettsia rickettsiae
Vacina de microrganismo morto
Imunização de membros das Forças Armadas, como proteção contra TIFO
Vacinas virais
Vírus Componentes da Vacina Quem Deve Receber Vacinações
Pólio Inativado ou atenuado Crianças
Sarampo Atenuado Crianças
Caxumba Atenuado Crianças
Rubéola Atenuado Crianças
Varicela-zóster Atenuado Crianças
Vírus HPV Partícula semelhante ao vírus (VLP) Meninas de 9 a 26 anos
Influenza Inativado ou atenuado Adultos, especialmente pessoas da área médica e idosos
Hepatite B Subunidade (VLP) Recém-nascidos, profissionais de cuidado à saúde, grupos de alto risco
Hepatite A Vivo inativado Crianças, profissionais cuidadores de crianças, viajantes para áreas endêmicas
Febre amarela Atenuado Viajantes em risco de exposição, militares
Raiva Inativado Vegetarianos, tratadores de animais
Varíola Vírus da vaccinia vivo Proteção contra bioterrorismo
Imunoterapia passiva e vacinas para patógenos 
causadores de infecções hospitalares
Questões
Profª. Débora Juliani
IADES - 2019 - SEASTER - PA - Enfermeiro. No que se refere a soros e imunoglobulinas, assinale a alternativa correta.
A) A administração de imunoglobulinas e soros caracteriza a imunização ativa, por meio da qual o organismo humano
recebe anticorpos pré-formados.
B) Os soros heterólogos são assim denominados porque os anticorpos são obtidos a partir do plasma de doador
(principalmente bovinos) de espécie diferente daquela do receptor (homem).
C) As imunoglobulinas são assim denominadas porque os anticorpos são obtidos a partir de plasma de doadores
selecionados da mesma espécie do receptor, a exemplo de pessoas submetidas a imunização passiva recente ou
convalescentes de doença infecciosa.
D) A imunoglobulina humana normal, também chamada de gamaglobulina hiperimune, é extraída do plasma de
doadores adultos e sadios, contendo os anticorpos específicos (gamaglobulinas) na proporção adequada para vários
tipos de infecção.
E) As imunoglobulinas anti-hepatite B, antitetânica, antirrábica e antivaricela zoster são exemplos de imunoglobulina
humana específica.
IADES - 2019 - SEASTER - PA - Enfermeiro. No que se refere a soros e imunoglobulinas, assinale a alternativa correta.
A) A administração de imunoglobulinas e soros caracteriza a imunização ativa, por meio da qual o organismo humano
recebe anticorpos pré-formados.
B) Os soros heterólogos são assim denominados porque os anticorpos são obtidos a partir do plasma de doador
(principalmente bovinos) de espécie diferente daquela do receptor (homem).
C) As imunoglobulinas são assim denominadas porque os anticorpos são obtidos a partir de plasma de doadores
selecionados da mesma espécie do receptor, a exemplo de pessoas submetidas a imunização passiva recente ou
convalescentes de doença infecciosa.
D) A imunoglobulina humana normal, também chamada de gamaglobulina hiperimune, é extraída do plasma de
doadores adultos e sadios, contendo os anticorpos específicos (gamaglobulinas) na proporção adequada para vários
tipos de infecção.
E) As imunoglobulinas anti-hepatite B, antitetânica, antirrábica e antivaricela zoster são exemplos de imunoglobulina
humana específica.
Consulplan – 2013 – AVAPE. Sobre os princípios da imunidade e o uso dos imunobiológicos, marque a
alternativa correta.
A) As vacinas conferem ao organismo imunidade passiva artificialmente adquirida.
B) Na imunidade ativa, o organismo produz anticorpos específicos contra determinado antígeno.
C) Os anticorpos obtidos pelo recém-nascido, por meio da mãe, é um exemplo de imunidade ativa.
D) As imunoglobulinas e os soros são produzidos a partir de antígenos ou pelo produto de antígenos.
E) A duração da proteção conferida pelos soros é relativamente mais duradoura do que pelas vacinas.
Consulplan – 2013 – AVAPE. Sobre os princípios da imunidade e o uso dos imunobiológicos, marque a
alternativa correta.
A) As vacinas conferem ao organismo imunidade passiva artificialmente adquirida.
B) Na imunidade ativa, o organismo produz anticorpos específicos contra determinado antígeno.
C) Os anticorpos obtidos pelo recém-nascido, por meio da mãe, é um exemplo de imunidade ativa.
D) As imunoglobulinas e os soros são produzidos a partir de antígenos ou pelo produto de antígenos.
E) A duração da proteção conferida pelos soros é relativamente mais duradoura do que pelas vacinas.
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Farmacologia Aplicada a Produtos Naturais: Considerando as
diferenças entre imunização passiva e imunização ativa é correto afirmar que:
I. A primeira é dependente do tratamento com preparações de anticorpos purificados e a segunda de vacinas preparadas a
partir de preparados de vírus ou bactérias inativadas ou atenuados.
II. A imunização ativa resulta exclusivamente em resposta celular, envolvendo desenvolvimento de células B ou T de
memória.
III. Imunização ativa é mais duradoura que a humoral, podendo ser adquirida naturalmente ou artificialmente.
Assinale:
A) se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas.
B) se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
C) se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.
D) se todas as afirmativas estiverem corretas.
E) se apenas a afirmativa I estiver correta.
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Farmacologia Aplicada a Produtos Naturais: Considerando as
diferenças entre imunização passiva e imunização ativa é correto afirmar que:
I. A primeira é dependente do tratamento com preparações de anticorpos purificados e a segunda de vacinas preparadas a
partir de preparados de vírus ou bactérias inativadas ou atenuados.
II. A imunização ativa resulta exclusivamente em resposta celular, envolvendo desenvolvimento de células B ou T de
memória.
III. Imunização ativa é mais duradoura que a humoral, podendo ser adquirida naturalmente ou artificialmente.
Assinale:
A) se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas.
B) se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
C) se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.
D) se todas as afirmativas estiverem corretas.
E) se apenas a afirmativa I estiver correta.
IADES - 2019 - AL-GO - Enfermeiro do Trabalho: Com relação aos fatores relacionados à vacina, que
influenciam a resposta imune, assinale a alternativa correta acerca dos adjuvantes.
A) São substâncias presentes na composição de algumas vacinas e que diminuem a resposta imune dos
produtos que contêm microrganismos inativados ou os respectivos componentes.
B) São substâncias presentes na composição de algumas vacinas e que aumentam a resposta imune dos
produtos que contêm microrganismos vivos.
C) Os sais de alumínio são os adjuvantes menos utilizados em vacinas para uso humano.
D) Podem ser utilizados em vacinas que contêm microrganismos vivos.
E) Não são utilizadosem vacinas que contêm microrganismos vivos.
IADES - 2019 - AL-GO - Enfermeiro do Trabalho: Com relação aos fatores relacionados à vacina, que
influenciam a resposta imune, assinale a alternativa correta acerca dos adjuvantes.
A) São substâncias presentes na composição de algumas vacinas e que diminuem a resposta imune dos
produtos que contêm microrganismos inativados ou os respectivos componentes.
B) São substâncias presentes na composição de algumas vacinas e que aumentam a resposta imune dos
produtos que contêm microrganismos vivos.
C) Os sais de alumínio são os adjuvantes menos utilizados em vacinas para uso humano.
D) Podem ser utilizados em vacinas que contêm microrganismos vivos.
E) Não são utilizados em vacinas que contêm microrganismos vivos.
CEPERJ - 2013 - SEDUC-RJ - Professor: O tétano é causado por uma bactéria gram-positiva encontrada comumente no solo,
sob a forma de esporos. Essa doença é imunoprevenível e pode acometer indivíduos de qualquer idade, mas não é
transmissível de uma pessoa para outra. Ao se ferirem, muitas pessoas, temendo uma infecção tetânica, procuram
assistência médica imediata; poucos sabem, entretanto, distinguir qual o procedimento a ser adotado.
Com relação a esse fato, correlacione a coluna da esquerda com suas respectivas características listadas na coluna da direita:
1- Vacina antitetânica ( ) Contém antígenos
2- Soro antitetânico ( ) Contém imunoglobulinas
( ) Produz imunidade passiva
( ) Induz imunidade ativa
( ) Proporciona imunização temporária
( ) Provoca imunização duradoura
A sequência correta obtida é:
A) 1 – 2 – 1 – 2 – 1 – 2
B) 2 – 1 – 2 – 1 – 2 – 1
C) 1 – 2 – 2 – 1 – 2 – 1
D) 2 – 1 – 1 – 2 – 1 – 2
E) 1 – 2 – 1 – 2 – 2 – 1
CEPERJ - 2013 - SEDUC-RJ - Professor: O tétano é causado por uma bactéria gram-positiva encontrada comumente no solo,
sob a forma de esporos. Essa doença é imunoprevenível e pode acometer indivíduos de qualquer idade, mas não é
transmissível de uma pessoa para outra. Ao se ferirem, muitas pessoas, temendo uma infecção tetânica, procuram
assistência médica imediata; poucos sabem, entretanto, distinguir qual o procedimento a ser adotado.
Com relação a esse fato, correlacione a coluna da esquerda com suas respectivas características listadas na coluna da direita:
1- Vacina antitetânica ( ) Contém antígenos
2- Soro antitetânico ( ) Contém imunoglobulinas
( ) Produz imunidade passiva
( ) Induz imunidade ativa
( ) Proporciona imunização temporária
( ) Provoca imunização duradoura
A sequência correta obtida é:
A) 1 – 2 – 1 – 2 – 1 – 2
B) 2 – 1 – 2 – 1 – 2 – 1
C) 1 – 2 – 2 – 1 – 2 – 1
D) 2 – 1 – 1 – 2 – 1 – 2
E) 1 – 2 – 1 – 2 – 2 – 1
IBFC - 2013 - EBSERH - Enfermeiro - Terapia Intensiva (HUB): O homem possui um sistema imunológico, que destrói os
corpos estranhos ao seu organismo, como microrganismos e suas toxinas, sendo esse processo chamado de estado de
imunidade (imunização). O estado de imunidade pode ser permanente ou provisório, e é adquirido por meio de
____________________, que acontece pela reação do próprio organismo decorrente de ___________________
(imunidade naturalmente adquirida) ou ____________________ (imunidade artificialmente adquirida); ou de
________________________, quando o indivíduo recebe os anticorpos prontos, sendo elaborados em outro organismo
como __________________ (imunidade naturalmente adquirida) ou administração de _________________ (imunidade
artificialmente adquirida).
Preencha as lacunas e assinale a alternativa correta respectivamente.
A) imunização ativa; vacinação; doença espontânea; imunização passiva; soro com anticorpos; vasos
placentários ou do colostro.
B) imunização passiva; doença espontânea; vacinação; imunização ativa; vasos placentários ou do colostro; soro
com anticorpos.
C) imunização ativa; doença espontânea; vacinação; imunização passiva; vasos placentários ou do colostro; soro
com anticorpos.
D) imunização passiva; vacinação; doença espontânea; imunização ativa; soro com anticorpos; vasos
placentários ou do colostro.
IBFC - 2013 - EBSERH - Enfermeiro - Terapia Intensiva (HUB): O homem possui um sistema imunológico, que destrói os
corpos estranhos ao seu organismo, como microrganismos e suas toxinas, sendo esse processo chamado de estado de
imunidade (imunização). O estado de imunidade pode ser permanente ou provisório, e é adquirido por meio de
____________________, que acontece pela reação do próprio organismo decorrente de ___________________
(imunidade naturalmente adquirida) ou ____________________ (imunidade artificialmente adquirida); ou de
________________________, quando o indivíduo recebe os anticorpos prontos, sendo elaborados em outro organismo
como __________________ (imunidade naturalmente adquirida) ou administração de _________________ (imunidade
artificialmente adquirida).
Preencha as lacunas e assinale a alternativa correta respectivamente.
A) imunização ativa; vacinação; doença espontânea; imunização passiva; soro com anticorpos; vasos
placentários ou do colostro.
B) imunização passiva; doença espontânea; vacinação; imunização ativa; vasos placentários ou do colostro; soro
com anticorpos.
C) imunização ativa; doença espontânea; vacinação; imunização passiva; vasos placentários ou do colostro; soro
com anticorpos.
D) imunização passiva; vacinação; doença espontânea; imunização ativa; soro com anticorpos; vasos
placentários ou do colostro.
FGV - 2015 - Prefeitura de Cuiabá - MT - Especialista em Saúde - Médico Veterinário (adaptada): A imunização
ativa apresenta diversas vantagens em relação à imunização passiva, as quais incluem um período
prolongado de proteção e memória.
Assinale a opção que indica o mérito relativo dos diferentes tipos de vacina.
A) As vacinas vivas não necessitam de adjuvantes imunológicos.
B) As vacinas inativadas podem ser administradas pela via natural de infecção sem o risco de reversão da
doença.
C) As vacinas vivas apresentam maiores custos de desenvolvimento.
D) As vacinas atenuadas são mais estáveis para o armazenamento.
FGV - 2015 - Prefeitura de Cuiabá - MT - Especialista em Saúde - Médico Veterinário (adaptada): A imunização
ativa apresenta diversas vantagens em relação à imunização passiva, as quais incluem um período
prolongado de proteção e memória.
Assinale a opção que indica o mérito relativo dos diferentes tipos de vacina.
A) As vacinas vivas não necessitam de adjuvantes imunológicos.
B) As vacinas inativadas podem ser administradas pela via natural de infecção sem o risco de reversão da
doença.
C) As vacinas vivas apresentam maiores custos de desenvolvimento.
D) As vacinas atenuadas são mais estáveis para o armazenamento.
INSTITUTO AOCP - 2017 - EBSERH - Biomédico (HUJB – UFCG): A imunização ativa é um mecanismo em que
A) se introduz uma pequena quantidade de antígeno no organismo para produção de anticorpo.
B) se introduz uma grande quantidade de anticorpos que se ligam às células de defesa do organismo.
C) o próprio corpo do indivíduo, sem a introdução de antígenos, gera células de defesa.
D) se introduz uma grande quantidade de antígeno no organismo para produção de anticorpo.
E) se introduzem antígeno e anticorpo juntos para que sejam gerados anticorpos específicos.
INSTITUTO AOCP - 2017 - EBSERH - Biomédico (HUJB – UFCG): A imunização ativa é um mecanismo em que
A) se introduz uma pequena quantidade de antígeno no organismo para produção de anticorpo.
B) se introduz uma grande quantidade de anticorpos que se ligam às células de defesa do organismo.
C) o próprio corpo do indivíduo, sem a introdução de antígenos, gera células de defesa.
D) se introduz uma grande quantidade de antígeno no organismo para produção de anticorpo.
E) se introduzem antígeno e anticorpo juntos para que sejam gerados anticorpos específicos.
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Produção de Vacinas Virais: Uma das muitas classificações das
vacinas refere-se à forma como são produzidas. Sobre vacinas virais atenuadas é correto afirmar que:
A) A resposta imunológica provocadapor vacinas deste tipo é de menor intensidade e duração do que a obtida
com vacinas inativadas, e fundamentalmente, do tipo celular.
B) A resposta imunológica é intensa e de longa duração, similar à originada pela infecção natural. Estimula tanto
a imunidade humoral como a celular.
C) Utilizam vetores vivos não patogênicos que expressam, por recombinação genética, os genes que codificam
antígenos protéicos de outros microrganismos diante daqueles que se pretende imunizar.
D) A resposta imunológica é fundamentalmente do tipo humoral.
E) As vacinas de sarampo, rubéola e Haemophilus influenzae tipo b (Hib) são de vírus vivo atenuado.
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Produção de Vacinas Virais: Uma das muitas classificações das
vacinas refere-se à forma como são produzidas. Sobre vacinas virais atenuadas é correto afirmar que:
A) A resposta imunológica provocada por vacinas deste tipo é de menor intensidade e duração do que a obtida
com vacinas inativadas, e fundamentalmente, do tipo celular.
B) A resposta imunológica é intensa e de longa duração, similar à originada pela infecção natural. Estimula tanto
a imunidade humoral como a celular.
C) Utilizam vetores vivos não patogênicos que expressam, por recombinação genética, os genes que codificam
antígenos protéicos de outros microrganismos diante daqueles que se pretende imunizar.
D) A resposta imunológica é fundamentalmente do tipo humoral.
E) As vacinas de sarampo, rubéola e Haemophilus influenzae tipo b (Hib) são de vírus vivo atenuado.
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Virologia Aplicada a Imunobiológicos: A vacina tríplice viral
imuniza e protege o organismo contra:
A) HTLV-I, sarampo e hepatite B.
B) sarampo, rubéola e caxumba.
C) rubéola, hepatite C e herpes.
D) caxumba, hepatite B, influenza A.
E) hepatite B, influenza A e HTLV-I.
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Virologia Aplicada a Imunobiológicos: A vacina tríplice viral
imuniza e protege o organismo contra:
A) HTLV-I, sarampo e hepatite B.
B) sarampo, rubéola e caxumba.
C) rubéola, hepatite C e herpes.
D) caxumba, hepatite B, influenza A.
E) hepatite B, influenza A e HTLV-I.
IBFC - 2017 - EBSERH - Farmacêutico - (HUGG-UNIRIO): Os surtos de doenças no mundo estão se mostrando
cada vez mais evidentes como situações preocupantes como o vírus Ebola e até mesmo de doenças benignas
como a escarlatina. Assinale a alternativa correta que indica as medidas ideais a serem tomadas por um
indivíduo em três diferentes situações: picadas de cobras peçonhentas, febre amarela e sífilis.
A) Antibiótico contra o vírus da febre amarela, soro antiofídico caso seja picado por uma cobra e vacina contra a
sífilis
B) Antibiótico ou soro, tanto contra o vírus da febre amarela como para veneno de cobras e para sífilis
C) Soro contra o vírus da febre amarela, antibiótico caso seja picado por uma cobra e vacina contra a sífilis
D) Vacina contra o vírus da febre amarela, soro antiofídico caso seja picado por uma cobra e antibiótico caso
tenha adquirido sífilis
E) Soro antiofídico contra a sífilis ou para o veneno de cobra e vacina contra a febre amarela caso entre em
contato com o vírus causador da doença
IBFC - 2017 - EBSERH - Farmacêutico - (HUGG-UNIRIO): Os surtos de doenças no mundo estão se mostrando
cada vez mais evidentes como situações preocupantes como o vírus Ebola e até mesmo de doenças benignas
como a escarlatina. Assinale a alternativa correta que indica as medidas ideais a serem tomadas por um
indivíduo em três diferentes situações: picadas de cobras peçonhentas, febre amarela e sífilis.
A) Antibiótico contra o vírus da febre amarela, soro antiofídico caso seja picado por uma cobra e vacina contra a
sífilis
B) Antibiótico ou soro, tanto contra o vírus da febre amarela como para veneno de cobras e para sífilis
C) Soro contra o vírus da febre amarela, antibiótico caso seja picado por uma cobra e vacina contra a sífilis
D) Vacina contra o vírus da febre amarela, soro antiofídico caso seja picado por uma cobra e antibiótico caso
tenha adquirido sífilis
E) Soro antiofídico contra a sífilis ou para o veneno de cobra e vacina contra a febre amarela caso entre em
contato com o vírus causador da doença
CETRO - 2013 - ANVISA - Especialista em Regulação - Vigilância Sanitária – Área 2: A administração da vacina
denominada tríplice bacteriana tem, como objetivo, evitar o desenvolvimento das seguintes doenças:
A) difteria, tétano e caxumba.
B) sarampo, rubéola e caxumba.
C) sarampo, tétano e caxumba.
D) difteria, tétano e coqueluche.
E) sarampo, rubéola e coqueluche.
CETRO - 2013 - ANVISA - Especialista em Regulação - Vigilância Sanitária – Área 2: A administração da vacina
denominada tríplice bacteriana tem, como objetivo, evitar o desenvolvimento das seguintes doenças:
A) difteria, tétano e caxumba.
B) sarampo, rubéola e caxumba.
C) sarampo, tétano e caxumba.
D) difteria, tétano e coqueluche.
E) sarampo, rubéola e coqueluche.
CETRO - 2013 - ANVISA - Especialista em Regulação - Vigilância Sanitária – Área 2: O Bacilo de Calmette e
Guérin e sua sigla (BCG) fazem referência à utilização de Mycobacterium bovis com virulência atenuada. Essa
vacina é utilizada visando à prevenção do desenvolvimento de:
A) tuberculose.
B) hepatite B.
C) poliomielite.
D) influenza.
E) rotavírus.
CETRO - 2013 - ANVISA - Especialista em Regulação - Vigilância Sanitária – Área 2: O Bacilo de Calmette e
Guérin e sua sigla (BCG) fazem referência à utilização de Mycobacterium bovis com virulência atenuada. Essa
vacina é utilizada visando à prevenção do desenvolvimento de:
A) tuberculose.
B) hepatite B.
C) poliomielite.
D) influenza.
E) rotavírus.
AOCP – 2013 - Instituto Benjamin Constant: Assinale a alternativa que apresenta uma vacina composta por
vírus vivos atenuados.
A) BCG
B) Febre Amarela.
C) DTP.
D) Hepatite B.
E) Haemophilus influenzae do tipo b.
AOCP – 2013 - Instituto Benjamin Constant: Assinale a alternativa que apresenta uma vacina composta por
vírus vivos atenuados.
A) BCG
B) Febre Amarela.
C) DTP.
D) Hepatite B.
E) Haemophilus influenzae do tipo b.
ELISA 
Aspectos teóricos
Profª. Débora Juliani
ELISA
Testes sorológicos ou Imunoensaios (IE): técnicas para detectar e quantificar antígenos e anticorpos, ou outras 
substancias que desempenhem o papel de antígeno no ensaio, tais como fármacos, hormônios, ácidos nucleicos, 
citocinas, receptores de células, etc.
Reagentes marcados
radioativos
Reagentes não marcados
maior sensibilidade → amplificam o sinal
ENZIMÁTICOS
quimioluminescentes fluorescentes
menor sensibilidade → necessária a formação de 
grandes imunocomplexos
Ex: precipitação não automatizada
ELISA
Técnicas imunoenzimáticas ou enzimaimunoensaio (EIA): utilização de antígenos ou anticorpos marcados com enzimas 
→ sinal da reação
detecção quantificaçãotitulação
Anticorpo 
ou Antígeno
Enzima
Processo 
de 
conjugação
Ef
ic
iê
n
ci
a 
d
o
 c
o
n
ju
ga
d
o
Destaque no laboratório clinico: elevada sensibilidade, 
comparável à do radioimunoensaio, apresenta as 
vantagens de utilizar reagentes estáveis, estar livre das 
exigências de trabalhar com radioisótopos e poder ser 
adaptado tanto a testes simples quanto à automação
qualitativa: visual 
quantitativa: espectrofotômetro
ELISA
Técnicas imunoenzimáticas
homogêneos heterogêneos
não há necessidade de separação 
(lavagem) dos imunocomplexos formados 
e dos não formados, pois é a interação 
Ag-Ac que modula a atividade da enzima
moléculas menores
enzima solúvel enzima insolúvel
ELISA Imunoperoxidase
Western blott
há necessidade de separação (lavagem) 
dos imunocomplexos formados e dos não 
formados, pois a atividade da enzima não
é alterada pela interação Ag-Ac
moléculas maiores
ELISA
Técnicas imunoenzimáticas
enzima
atividade 
específica
produto 
da reação 
estável
Fácil 
quantificação
forma 
pura
facilmente 
conjugável
Sem perda 
de 
atividade
custo
acessível
PEROXIDASE
FOSFATASEALCALINA
substrato
H2O2
substrato
PNPP
OPD, ABTS, TMB
ELISA
ELISA: Enzyme-linked immunosorbent assay ou ensaio de imunoabsorção enzimática 
Ag ou Ac
Elevada sensibilidade (reação enzimática) e especificidade (ligação Ag-Ac), rapidez, baixo custo, simplicidade técnica, 
versatilidade, objetividade de leitura e possibilidade de adaptação a diferentes graus de automação
Alternativa ao radioimunoensaio (sensibilidade comparável, sem problemas decorrentes da utilização de radioisótopo), à 
imunofluorescência e à aglutinação 
Imobilização de um dos reagentes (solúvel) em uma fase sólida (poliestireno), enquanto outro reagente pode ser ligado 
a uma enzima, com preservação das atividades enzimática e imunológica do anticorpo
Determinar o limiar de reatividade ou cut-off. Valores acima do limiar de reatividade são considerados positivos
ELISA
ELISA: Enzyme-linked immunosorbent assay ou ensaio de imunoabsorção enzimática 
formação dos 
imunocomplexos
(Ag + Ac)
adição do 
conjugado 
(Ac + enzima)
adição do 
substrato
(revelação)
produtos solúveis coloridos
LAVAGEM LAVAGEM
oxidação do cromógeno
ELISA
Pesquisa de Ac IgG na amostra
ELISA indireto
Bloqueador (H2SO4) interrompe o excesso de 
reação
HIV e Doença de Chagas
Opção: Proteína A marcada com enzima 
Ac anti-IgG
ELISA
ELISA direto ou “sanduíche” ou “de captura”
Pesquisa de Ag na amostra
Bloqueador (H2SO4) interrompe o excesso de 
reação
Hormônios e parasitas
Maior sensibilidade que indireto
ELISA
ELISA de competição
Pesquisa de Ac na amostra que, se presente, 
desloca o Ac marcado do sítio de ligação ao Ag
Bloqueador (H2SO4) interrompe o excesso de reação
Intensidade de coloração inversamente proporcional à concentração
Pesquisa de Ag na amostra que, se presente, 
desloca o Ag marcado do sítio de ligação ao Ac
1ª geração: ELISA indireto
Fase sólida: Ag de lisado viral de HIV em cultura de células
2ª geração: ELISA indireto
Fase sólida: Ag recombinantes e peptídeos sintéticos do 
HIV (maior sensibilidade e especificidade)
3ª geração: ELISA “sanduíche”
Fase sólida e conjugado: Ag recombinantes e peptídeos sintéticos
mais sensível e específico (detecta todas as classes de 
anticorpos anti-HIV - IgG, IgM, IgA ou IgE) 
4ª geração: ELISA “sanduíche”
capazes de detectar, além dos Ac, o antígeno p24
janela imunológica reduzida (15 dias)
HIV
ELISA
Questões
Profª. Débora Juliani
COPESE - UFJF - 2017 - UFJF - Análises Clínicas: Os imunoensaios são utilizados rotineiramente em laboratórios
clínicos para identificar e quantificar antígenos e anticorpos. O imunoensaio enzimático que permite a
detecção de anticorpos específicos, fazendo uso de um antígeno imobilizado é:
A) Radioimunoensaio.
B) Inibição da hemoaglutinação.
C) ELISA.
D) Nefelometria.
E) Eletroforese.
COPESE - UFJF - 2017 - UFJF - Análises Clínicas: Os imunoensaios são utilizados rotineiramente em laboratórios
clínicos para identificar e quantificar antígenos e anticorpos. O imunoensaio enzimático que permite a
detecção de anticorpos específicos, fazendo uso de um antígeno imobilizado é:
A) Radioimunoensaio.
B) Inibição da hemoaglutinação.
C) ELISA.
D) Nefelometria.
E) Eletroforese.
IBFC - 2017 - EBSERH - Análises Clínicas – (HUGG-UNIRIO): Os testes imunológicos fornecem informações
importantes para o diagnóstico e tratamento de pacientes. Detectam a presença de anticorpos (Ac) contra
parasitas, fungos, bactérias, vírus ou a presença de antígenos (Ag) destes agentes. Assinale a alternativa que
apresenta a técnica imunológica baseada em reações Ag-Ac detectáveis por meio de reações enzimáticas e
que é um dos métodos para diagnóstico da doença de Chagas.
A) Técnica de precipitação
B) Técnica de cromatografia
C) Técnica de radioimunoensaio
D) Técnica de ELISA
E) Técnica de hemaglutinação
IBFC - 2017 - EBSERH - Análises Clínicas – (HUGG-UNIRIO): Os testes imunológicos fornecem informações
importantes para o diagnóstico e tratamento de pacientes. Detectam a presença de anticorpos (Ac) contra
parasitas, fungos, bactérias, vírus ou a presença de antígenos (Ag) destes agentes. Assinale a alternativa que
apresenta a técnica imunológica baseada em reações Ag-Ac detectáveis por meio de reações enzimáticas e
que é um dos métodos para diagnóstico da doença de Chagas.
A) Técnica de precipitação
B) Técnica de cromatografia
C) Técnica de radioimunoensaio
D) Técnica de ELISA
E) Técnica de hemaglutinação
IBFC - 2016 - EBSERH - Biomédico (HUAP-UFF): Os leitores de placas ou microplacas ELISA utilizam como
princípio:
A) Nefelometria
B) Radioimunoensiao
C) Aglutinação
D) Imunodifusão
E) Espectrofotometria
IBFC - 2016 - EBSERH - Biomédico (HUAP-UFF): Os leitores de placas ou microplacas ELISA utilizam como
princípio:
A) Nefelometria
B) Radioimunoensiao
C) Aglutinação
D) Imunodifusão
E) Espectrofotometria
UFTM - 2019 - UFTM - Biomédico: Em relação a técnica de ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática),
assinale a alternativa INCORRETA:
A) Os ensaios não competitivos podem ser empregados tanto na detecção de antígenos quanto de anticorpos.
B) Os ensaios competitivos são empregados na medida de hormônios, pois apresentam maior especificidade e
menor sensibilidade.
C) Para pesquisa de anticorpos podem ser utilizadas as técnicas indiretas e sanduíche.
D) Os ensaios utilizados para diagnósticos não requerem o uso do cut off.
UFTM - 2019 - UFTM - Biomédico: Em relação a técnica de ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática),
assinale a alternativa INCORRETA:
A) Os ensaios não competitivos podem ser empregados tanto na detecção de antígenos quanto de anticorpos.
B) Os ensaios competitivos são empregados na medida de hormônios, pois apresentam maior especificidade e
menor sensibilidade.
C) Para pesquisa de anticorpos podem ser utilizadas as técnicas indiretas e sanduíche.
D) Os ensaios utilizados para diagnósticos não requerem o uso do cut off.
UFTM - 2019 - UFTM - Biomédico: São características da técnica de ELISA (ensaio de imunoabsorção
enzimática), EXCETO:
A) Boa sensibilidade e especificidade.
B) Rapidez e baixo custo.
C) Subjetividade na leitura.
D) Possibilidade de adaptação a diferentes graus de automação.
UFTM - 2019 - UFTM - Biomédico: São características da técnica de ELISA (ensaio de imunoabsorção
enzimática), EXCETO:
A) Boa sensibilidade e especificidade.
B) Rapidez e baixo custo.
C) Subjetividade na leitura.
D) Possibilidade de adaptação a diferentes graus de automação.
IDECAN - 2016 - UFPB - Análises Clínicas: O Elisa é uma técnica de Imunoensaio Enzimático (EIA) heterogêneo,
muito utilizada para diagnóstico, principalmente por causa de seu baixo custo e por detectar quantidades
extremamente pequenas de antígenos ou anticorpos. Esse exame se baseia na detecção de anticorpos ou de
antígenos específicos, através da reação anticorpo-antígeno. São cromógenos utilizados para o teste Elisa,
EXCETO:
A) OPD
B) TMB
C) ABTS
D) Fenolftaleína
IDECAN - 2016 - UFPB - Análises Clínicas: O Elisa é uma técnica de Imunoensaio Enzimático (EIA) heterogêneo,
muito utilizada para diagnóstico, principalmente por causa de seu baixo custo e por detectar quantidades
extremamente pequenas de antígenos ou anticorpos. Esse exame se baseia na detecção de anticorpos ou de
antígenos específicos, através da reação anticorpo-antígeno. São cromógenos utilizados para o teste Elisa,
EXCETO:
A) OPD
B) TMB
C) ABTS
D) Fenolftaleína
MS CONCURSOS - 2017 - Prefeitura de Tanguá - RJ - Técnico de Laboratório: De acordo com os testes
sorológicos, assinale a alternativa correta.
A) O ELISA é um teste imunoenzimático que permite a detecção de anticorpos específicos, através da reação de
floculação.
B) O teste de imunofluorescência é uma técnica baseada na ligação de anticorpos com fluorocromos. A
imunofluorescência pode ser direta ou indireta.
C) O teste de precipitação é um teste quantitativo, baseado na presença de precipitados visíveis formados pela
atração Ag-Ac.
D) O teste de hemaglutinaçãogera agregação de eritrócitos devido à presença somente de anticorpos.
MS CONCURSOS - 2017 - Prefeitura de Tanguá - RJ - Técnico de Laboratório: De acordo com os testes
sorológicos, assinale a alternativa correta.
A) O ELISA é um teste imunoenzimático que permite a detecção de anticorpos específicos, através da reação de
floculação.
B) O teste de imunofluorescência é uma técnica baseada na ligação de anticorpos com fluorocromos. A
imunofluorescência pode ser direta ou indireta.
C) O teste de precipitação é um teste quantitativo, baseado na presença de precipitados visíveis formados pela
atração Ag-Ac.
D) O teste de hemaglutinação gera agregação de eritrócitos devido à presença somente de anticorpos.
IBFC - 2017 - POLÍCIA CIENTÍFICA-PR - Químico Legal: Os imunoensaios usam anticorpos, proteínas produzidas
pelo sistema imune dos animais em resposta à introdução de corpos estranhos. Sobre o imunoensaio ELISA
(imunoensaio enzimático). Assinale a alternativa incorreta a respeito desse imonuensaio.
A) Um anticorpo contra uma proteína de interesse é imobilizado em um sólido inerte
B) A solução a ser analisada é aplicada na superfície coberta de anticorpos
C) O anticorpo liga-se à proteína de interesse, e as demais proteínas são removidas por lavagem
D) Faz-se a reação de uma segunda proteína específica – esta sem ligação com enzima – com o complexo
proteína-anticorpo, gerado na etapa anterior
E) A quantidade de complexos anticorpo-enzima é medida por meio do teste de atividade da enzima
IBFC - 2017 - POLÍCIA CIENTÍFICA-PR - Químico Legal: Os imunoensaios usam anticorpos, proteínas produzidas
pelo sistema imune dos animais em resposta à introdução de corpos estranhos. Sobre o imunoensaio ELISA
(imunoensaio enzimático). Assinale a alternativa incorreta a respeito desse imonuensaio.
A) Um anticorpo contra uma proteína de interesse é imobilizado em um sólido inerte
B) A solução a ser analisada é aplicada na superfície coberta de anticorpos
C) O anticorpo liga-se à proteína de interesse, e as demais proteínas são removidas por lavagem
D) Faz-se a reação de uma segunda proteína específica – esta sem ligação com enzima – com o complexo
proteína-anticorpo, gerado na etapa anterior
E) A quantidade de complexos anticorpo-enzima é medida por meio do teste de atividade da enzima
COSEAC - 2019 - UFF - Farmacêutico - Bioquímico: Logo após a descoberta do HIV, foram desenvolvidos
imunoensaios (IE) para o diagnóstico da infecção. Nas últimas décadas, quatro gerações de IE foram
desenvolvidas. Um dos ensaios detecta simultaneamente o antígeno p24 e anticorpos específicos anti-HIV. O
componente de detecção de anticorpo tem o formato de “sanduíche”; portanto, detecta todas as classes de
imunoglobulinas contra proteínas recombinantes ou peptídeos sintéticos derivados das glicoproteínas gp41 e
gp120/160. Este ensaio é definido como ensaio imunoenzimático:
A) “sanduíche” ou imunométrico de terceira geração do tipo ELISA.
B) indireto de primeira geração do tipo ELISA.
C) indireto de segunda geração do tipo ELISA.
D) de captura de primeira geração do tipo ELISA.
E) “sanduíche” ou imunométrico de quarta geração do tipo ELISA.
COSEAC - 2019 - UFF - Farmacêutico - Bioquímico: Logo após a descoberta do HIV, foram desenvolvidos
imunoensaios (IE) para o diagnóstico da infecção. Nas últimas décadas, quatro gerações de IE foram
desenvolvidas. Um dos ensaios detecta simultaneamente o antígeno p24 e anticorpos específicos anti-HIV. O
componente de detecção de anticorpo tem o formato de “sanduíche”; portanto, detecta todas as classes de
imunoglobulinas contra proteínas recombinantes ou peptídeos sintéticos derivados das glicoproteínas gp41 e
gp120/160. Este ensaio é definido como ensaio imunoenzimático:
A) “sanduíche” ou imunométrico de terceira geração do tipo ELISA.
B) indireto de primeira geração do tipo ELISA.
C) indireto de segunda geração do tipo ELISA.
D) de captura de primeira geração do tipo ELISA.
E) “sanduíche” ou imunométrico de quarta geração do tipo ELISA.
UPENET/IAUPE - 2017 - UPE - Biólogo: Um dos métodos imunológicos mais utilizados, por apresentar grande sensibilidade
e especificidade na quantificação da concentração de antígenos/anticorpos é o ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay), que, em português, equivale a Ensaio Imunoenzimático. Observe a figura que representa quatro tipos de ELISA.
Sobre ELISA, analise as proposições a seguir:
I. Elisa 1 - Direto - uma enzima se liga a um anticorpo,
que reconhece um antígeno alvo. A enzima reage com
um substrato incolor para produzir um produto colorido.
Se o antígeno estiver presente, o complexo anticorpo-enzima
irá ligar-se a ele, e a enzima catalisará a reação. Então, a
presença de produto colorido indica a presença de antígeno.
II. Elisa 2 - Sanduíche - o anticorpo se liga ao antígeno adsorvido
no poço; anticorpos ligados à enzima se ligam aos anticorpos
primários. O substrato é adicionado e convertido pela enzima a uma cor determinada. A coloração é inversamente proporcional à
quantidade de anticorpo.
III. Elisa 3 - Indireto - o anticorpo de captura é, inicialmente, adsorvido no poço. Depois, a amostra com o antígeno é adicionada e se liga a
esse anticorpo. Adiciona-se outro anticorpo específico para o antígeno. Um terceiro anticorpo ligado à enzima é adicionado. Esse anticorpo
irá reagir com o substrato adicionado, gerando cor.
IV. Elisa 4 - bloqueio ou competição - a presença de anticorpos em determinado soro é revelada pela competição com um anticorpo
específico (mono ou policlonal) dirigido contra o antígeno. Igualmente, o resultado é dado pela adição de um conjugado, porém a coloração
aparecerá nos poços onde não havia anticorpos.
Assinale a alternativa cujas proposições correspondem, CORRETAMENTE, às imagens, ao tipo de ELISA e a sua descrição.
UPENET/IAUPE - 2017 - UPE - Biólogo: Um dos métodos imunológicos mais utilizados, por apresentar grande sensibilidade
e especificidade na quantificação da concentração de antígenos/anticorpos é o ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay), que, em português, equivale a Ensaio Imunoenzimático. Observe a figura que representa quatro tipos de ELISA.
Assinale a alternativa cujas proposições correspondem, CORRETAMENTE, às imagens, ao tipo de ELISA e a sua descrição.
A) I, II e III.
B) I e IV.
C) II e III.
D) II, III e IV.
E) III e IV.
UPENET/IAUPE - 2017 - UPE - Biólogo: Um dos métodos imunológicos mais utilizados, por apresentar grande sensibilidade
e especificidade na quantificação da concentração de antígenos/anticorpos é o ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay), que, em português, equivale a Ensaio Imunoenzimático. Observe a figura que representa quatro tipos de ELISA.
Assinale a alternativa cujas proposições correspondem, CORRETAMENTE, às imagens, ao tipo de ELISA e a sua descrição.
A) I, II e III.
B) I e IV.
C) II e III.
D) II, III e IV.
E) III e IV.
CESPE - 2018 - EBSERH - Análises Clínicas: Acerca das técnicas sorológicas e de imunofluorescência
empregadas em laboratório de imunologia, julgue o item a seguir.
A imagem a seguir representa um exemplo da técnica de ELISA tipo sanduíche.
CESPE - 2018 - EBSERH - Análises Clínicas: Acerca das técnicas sorológicas e de imunofluorescência
empregadas em laboratório de imunologia, julgue o item a seguir.
A imagem a seguir representa um exemplo da técnica de ELISA tipo sanduíche.
ERRADO
IDECAN - 2016 - UERN - Ciências da Saúde: O Teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) se baseia em
reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações enzimáticas. Uma enzima muito comum a ser
usada nesse teste trata-se da:
A) Amilase.
B) Catalase.
C) Peroxidase.
D) Ribozimase.
IDECAN - 2016 - UERN - Ciências da Saúde: O Teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) se baseia em
reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações enzimáticas. Uma enzima muito comum a ser
usada nesse teste trata-se da:
A) Amilase.
B) Catalase.
C) Peroxidase.
D) Ribozimase.
IBFC - 2017 - EBSERH - Farmacêutico - (HUGG-UNIRIO):O Departamento de Doenças Sexualmente
Transmissíveis, AIDS e Hepatites Virais do Ministério da Saúde liberou uma nota técnica em imunoenzimático
(ELISA) do vírus causador da AIDS (HIV) pode dar falso positivo em até 120 dias após vacina contra o vírus da
gripe suína (H1N1). Assinale a alternativa correta que demonstre o motivo desse problema:
A) O teste citado realiza detecção contra anticorpos antivirais do tipo IgM e, pelo fato dos vírus possuírem semelhanças
antigênicas, podem ocorrer reações cruzadas
B) O teste citado realiza detecção contra os antígenos virais anti-HIV, mas, por possuírem semelhanças antigênicas com o
H1N1, podem ocorrer reações cruzadas
C) O teste citado realiza detecção contra proteínas virais do HIV e, por possuírem falhas nessa reação, podem ocorrer
reações cruzadas com outras proteínas como as do H1N1
D) O teste citado realiza detecção contra antígenos virais anti-HIV, mas, por possuírem falhas nessa reação, podem ocorrer
reações cruzadas
E) O teste citado realiza detecção somente contra anticorpos antivirais do tipo IgG e, por possuírem falhas nessa reação,
podem ocorrer reações cruzadas
IBFC - 2017 - EBSERH - Farmacêutico - (HUGG-UNIRIO): O Departamento de Doenças Sexualmente
Transmissíveis, AIDS e Hepatites Virais do Ministério da Saúde liberou uma nota técnica em imunoenzimático
(ELISA) do vírus causador da AIDS (HIV) pode dar falso positivo em até 120 dias após vacina contra o vírus da
gripe suína (H1N1). Assinale a alternativa correta que demonstre o motivo desse problema:
A) O teste citado realiza detecção contra anticorpos antivirais do tipo IgM e, pelo fato dos vírus possuírem semelhanças
antigênicas, podem ocorrer reações cruzadas
B) O teste citado realiza detecção contra os antígenos virais anti-HIV, mas, por possuírem semelhanças antigênicas com o
H1N1, podem ocorrer reações cruzadas
C) O teste citado realiza detecção contra proteínas virais do HIV e, por possuírem falhas nessa reação, podem ocorrer
reações cruzadas com outras proteínas como as do H1N1
D) O teste citado realiza detecção contra antígenos virais anti-HIV, mas, por possuírem falhas nessa reação, podem ocorrer
reações cruzadas
E) O teste citado realiza detecção somente contra anticorpos antivirais do tipo IgG e, por possuírem falhas nessa reação,
podem ocorrer reações cruzadas
FCC - 2018 - Prefeitura de Macapá - AP - Biomédico: Considere a figura abaixo.
O método empregado é
A) ELISA direto.
B) ELISA indireto.
C) Southern Blotting.
D) Western Blotting.
E) ELISA sanduíche.
FCC - 2018 - Prefeitura de Macapá - AP - Biomédico: Considere a figura abaixo.
O método empregado é
A) ELISA direto.
B) ELISA indireto.
C) Southern Blotting.
D) Western Blotting.
E) ELISA sanduíche.
Quimioluminescência
Aspectos teóricos
Profª. Débora Juliani
Quimioluminescência
Testes sorológicos ou Imunoensaios (IE): técnicas para detectar e quantificar antígenos e anticorpos, ou outras 
substâncias que desempenhem o papel de antígeno no ensaio, tais como fármacos, hormônios, ácidos nucleicos, 
citocinas, receptores de células, etc.
Reagentes marcados
radioativos
Reagentes não marcados
maior sensibilidade → amplificam o sinal
enzimáticos
QUIMIOLUMINESCENTES fluorescentes
menor sensibilidade → necessária a formação de 
grandes imunocomplexos
Ex: precipitação não automatizada
A amplificação do sinal também pode ser obtida com o emprego de partículas, como na aglutinação e nos métodos 
automatizados de precipitação, que são híbridos entre os métodos com reagentes marcados e não marcados
Quimioluminescência
Quimiluminescência: emprego de uma reação química (hidrólise) como fonte de energia para emissão de luz visível
dissociação de ligações fracas → compostos intermediários em estado eletronicamente excitado que, 
quando retornam ao estado de energia inicial, emitem luz.
x Imunofluorescência: fonte de energia que promove a 
excitação das moléculas é uma radiação incidente 
x Bioluminescência: energia provém de reação 
biológica, emissão de luz facilitada por uma enzima 
Sistema de monitoramento e amplificação em uma grande variedade de testes →
enzimaimunoensaio (ELISA) e o immunoblotting (WB)
Emprego: detecção de Ag, hormônios, marcadores tumorais e Ac
Ligação Ag + Ac: um dos reagentes conjugado a uma substância emissora de luz visível
Perícia criminal: Quando em contato com o sangue, mesmo que o local tenha sido limpo, utiliza o ferro
da hemoglobina como catalisador para a reação de liberação de luz, evidenciando a presença do sangue
Quimioluminescência
Vantagens
elevada 
sensibilidade
de 
detecção linearidade 
da curva 
dose-
resposta
rapidez
aplicação 
em 
automação
segurança e 
simplicidade
aumento
da 
sensibilidade
custo
acessível
Quimioluminescência
Enzimaimunoensaio quimioluminescente
enzimas
PEROXIDASE
FOSFATASE ALCALINA
β GALACTOSIDASEXANTINA OXIDASE
substrato
LUMINOL
ELISA quimioluminescente: pesquisa de haptenos, Ag e anticorpos específicos. Ex: IgG, utilizando-se anti-IgG conjugado à
peroxidase, cuja ligação ao complexo antígeno-anticorpo é detectada por meio de um substrato luminescente, como 
luminol ou luciferol
Pela ação da peroxidase, o peróxido de hidrogênio promove a oxidação do luminol, formando um radical luminol →
emite luz captada por fotodetectores
Quimioluminescência
Western blotting quimioluminescente
Neste caso, em vez de utilizar um substrato colorimétrico da enzima, emprega-se um substrato quimioluminescente, sem 
a necessidade de alterar qualquer outra etapa dos protocolos
Utilizam peroxidase e uma mistura de luminol, peroxido de hidrogênio e um amplificador, como o p-iodofenol
Substratos quimioluminescentes podem emitir luz estável por até 24 h → grande vantagem sobre os colorimétricos em 
sistemas com baixos níveis de proteínas e quando a quantidade de amostra é muito pequena
Quimioluminescência
Quimioluminescência 
Questões
Profª. Débora Juliani
IBADE - 2018 - Prefeitura de Ji-Paraná - RO - Biomédico: Sobre a técnica de quimioluminescência, é correto
afirmar que:
A) neste ensaio, uma molécula eletroquimioluminescente, como o rutênio, é utilizada como marcador indicador
em imunoensaios competitivos ou sanduíche.
B) neste ensaio, é medida a emissão da luz produzida durante a reação química de uma molécula emissora tipo
luminol.
C) neste ensaio, é medida a emissão da luz produzida durante a reação química de uma molécula emissora tipo
fluoresceína.
D) neste ensaio, é medida a emissão da luz produzida durante uma cinética enzimática.
E) é necessário o uso de “esferas magnéticas” como apoio aos anticorpos utilizados nas reações
quimioluminescentes.
IBADE - 2018 - Prefeitura de Ji-Paraná - RO - Biomédico: Sobre a técnica de quimioluminescência, é correto
afirmar que:
A) neste ensaio, uma molécula eletroquimioluminescente, como o rutênio, é utilizada como marcador indicador
em imunoensaios competitivos ou sanduíche.
B) neste ensaio, é medida a emissão da luz produzida durante a reação química de uma molécula emissora tipo
luminol.
C) neste ensaio, é medida a emissão da luz produzida durante a reação química de uma molécula emissora tipo
fluoresceína.
D) neste ensaio, é medida a emissão da luz produzida durante uma cinética enzimática.
E) é necessário o uso de “esferas magnéticas” como apoio aos anticorpos utilizados nas reações
quimioluminescentes.
UFJF – 2018 – Residência em Análises Clínicas: Uma grande variedade de imunoensaios tem utilizado como
sistema de monitoramento e amplificação um fenômeno em que se obtém energia luminosa a partir de uma
reação química. Nesta reação a energia química gerada como resultado da dissociação de ligações fracas
produz compostos intermediários em um estado eletronicamente excitado que ao retornar ao estado de
energia inicial, emitem luz. Assinale a alternativa CORRETA que corresponde ao fenômeno descrito no texto:
A) Fluorescência
B) Quimioluminescência
C) Radiação
D) Colorimetria
UFJF – 2018 – Residência em Análises Clínicas: Uma grande