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RIA Características Gerais 1959 Berson e Yalow – primeiro RIA para quantificação de insulina. O RIA foi a primeira técnica imunológica padronizada capaz de detectar e quantificar substâncias da ordem de nano a picogramas. Torna-se então possível determinar qualquer tipo de molécula biológica, desde que haja um receptor específico e que a molécula biológica possa ser marcada. Definição O termo radioimunoensaio (RIA) é mais empregado em ensaios com antígenos marcados. O termo imunorradiométrico (IRMA) é utilizado em ensaios com anticorpos marcados. Apresenta alta sensibilidade que é conferida pela detecção radioativa. O RIA também apresenta elevada especificidade. Graças à sua especificidade, os ensaios podem acontecer diretamente no líquido biológico. Por causa da sua sensibilidade, o volume de amostra pode ser menor. Vantagens Método muito sensível; Específico e de alta afinidade; Baixo custo; Requer pouca amostra; Rápido; Desvantagens Instabilidade dos radioisótopos. Risco operacional. Necessidades de medidas especiais. Elevado custo de biossegurança e problemas com o descarte de material. Aplicações Alta sensibilidade → permite dosagem de substâncias não encontradas em concentrações suficientes para serem percebidas por outras técnicas. polipeptídios, catecolaminas, esteróides, antibióticos, hormônios tireoidianos, proteínas, vitaminas, drogas e outras. vírus da hepatite B. marcador tumoral. Princípios Reação de competição por um receptor comum entre uma substância a ser determinada e a mesma substância marcada radioisotopicamente. - Componentes: Anticorpo radioativo Antígeno radioativo Amostra a ser testada Leitor radiométrico Características dos Marcadores 125 I e 131I É o radioisótopo mais comumente empregado. Meia vida de 57,5 dias. Liga-se facilmente aos resíduos de tirosina das proteínas. Produz radiação Υ. Estabilidade menor que 3H. Dosagem de hormônios protéicos. Trítio (3H) Produz radiação β . Dosagem de esteróides. Carbono 14 Tipos de RIA De competição com Ag marcado. De competição com Ac marcado. Sanduíche ou captura de Ag. Para detecção de IgE: Paper Radioimmunosorbent Test (PRIST). Radioallergosorbent Test (RAST).
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