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Roteiro de Aulas Práticas em Biofísica – Depto Fisiologia e Biofísica – ICB - UFMG ROTEIRO PARA A AULA PRÁTICA: TONICIDADE INTRODUÇÃO O movimento de água através de uma membrana seletiva (por exemplo, a membrana plasmática) depende não apenas da concentração dos solutos, mas também da permeabilidade da membrana para estes solutos. OBJETIVO Estudar a influência da composição do meio externo sobre o movimento de água através da membrana plasmática, utilizando hemácias de mamífero como modelo. Avaliar o efeito da permeabilidade a solutos diferentes: o cloreto de sódio (membrana plasmática impermeável) e a ureia (membrana plasmática permeável). CONHECIMENTOS PRÉVIOS Osmolaridade Tonicidade celular Preparo de soluções Osmolaridade do líquido intracélular de hemácea: 300 mOsm MATERIAL Hemácias de mamífero Água destilada Solução de NaCl (0,3 mol/L) Solução de ureia (0,6 mol/L) Tubos de ensaio Pipetas Roteiro de Aulas Práticas em Biofísica – Depto Fisiologia e Biofísica – ICB - UFMG MÉTODO 4- Prepare as soluções indicadas na Tabela 1, com volume final de 6 mL, e determine a concentração osmótica em osmolar para cada solução. Comparando esta concentração osmótica com a concentração osmótica do líquido intracelular de hemácias, classifique cada uma como iso- osmótico, hiper-osmótico ou hipo-osmótico. Tabela 1 Tubo Solução Conc. Osmolar Iso-, hiper-, ou hipo-osmótico? 1 Água destilada 2 NaCl 0,05 mol/L 3 NaCl 0,15 mol/L 4 NaCl 0,3 mol/L 5 Ureia 0,3 mol/L 6 NaCl 0,150 mol/L + ureia 0,3 mol/L 5- Acrescente uma gota de sangue a cada tubo. Observe a aparência da solução, classificando-a como translúcida (indicando a hemólise) ou turva (indicando a não hemólise). RESULTADOS Preencha a tabela a seguir avaliando se houve ou não hemólise. Avalie a tonicidade das diferentes soluções, utilizando os resultados experimentais e seus conhecimentos teóricos. Preencha a tabela e discuta os resultados encontrados. Tabela 2 Solução HEMÓLISE: sim ou não? TONICIDADE hipotônica?- isotônica? hipertônica? 1 2 3 4 5 6 Roteiro de Aulas Práticas em Biofísica – Depto Fisiologia e Biofísica – ICB - UFMG Discussão 1. Discute a seguinte afirmação: Enquanto a osmolaridade é um conceito essencialmente físico- químico, a tonicidade é um conceito biológico. 2. Usando somente os solutos ureia e NaCl, pense em exemplos, e cite a composição e as concentrações molar de soluções que são: a. hiperosmótico e, ao mesmo tempo, hipotônico. b. hiperosmótico e, ao mesmo tempo, isotônico. c. hiperosmótico e, ao mesmo tempo, hipertônica. 3. Hemácias foram retiradas do plasma e colocado em um volume grande de uma solução você preparou. Em seguida, o volume das hemácias aumentou em 20%. Ou seja, o voluma celular final das hemácias foi 1,2 vezes o volume inicial. Baseado apenas neste fato, o que você pode concluir sobre a osmolaridade dos componentes impermeáveis da sua solução comparado com a osmolaridade do plasma.