MODULOS 2 - GRAM-NEGATIVOS FERMENTADORES

Prévia do material em texto

1 – INTRODUÇÃO
COMPREENDE UM GRUPO HETEROGÊNEO DE BACILOS GRAM-NEGATIVOS
FERMENTADORES DA GLICOSE, CONSTITUÍDO ATUALMENTE DE 42 GÊNEROS
E MAIS DE 100 ESPÉCIES. ALGUMAS POUCAS ESPÉCIES SÃO PATOGÊNICAS,
CAUSANDO ENTEROINFECÇÕES NO HOMEM E ANIMAIS, OUTRAS SÃO
CONSIDERADAS PATÓGENOS OPORTUNISTAS, GERALMENTE ASSOCIADOS A
INFECÇÕES RELACIONADAS À ASSISTÊNCIA À SAÚDE.
MUITAS ESPÉCIES RARAMENTE OU NUNCA 
FORAM ISOLADAS DE CASOS DE INFECÇÕES NO 
HOMEM.
OS GÊNEROS E ESPÉCIES DE ENTEROBACTÉRIAS PODEM SER
DIFERENCIADOS COM BASE EM CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS. ALGUMAS
DESTAS CARACTERÍSTICAS PODEM DIFERENCIAR BIOTIPOS EM CEPAS
PERTENCENTES A UMA MESMA ESPÉCIE.
AS ENTEROBACTÉRIAS POSSUEM CARACTERÍSTICAS EM COMUM QUE
DEFINEM A FAMÍLIA ENTEROBACTERIACEAE:
• SÃO BACILOS GRAM-NEGATIVOS;
• FERMENTAM A GLICOSE COM OU SEM PRODUÇÃO DE GÁS;
• SÃO AERÓBIOS E ANAERÓBIOS FACULTATIVOS;
• A MAIORIA REDUZ NITRATO A NITRITO;
• A MAIORIA É OXIDASE NEGATIVA E CATALASE POSITIVA;
• PODEM SER MÓVEIS POR FLAGELOS PERITRÍQUEOS OU IMÓVEIS;
• CRESCEM BEM EM MEIOS COMUNS DE CULTURA, COMO ÁGAR MACCONKEY.
A FERMENTAÇÃO DA GLICOSE E A PRODUÇÃO DE GÁS PODEM SER
OBSERVADAS EM UM TUBO DE 12 x 120 mm CONTENDO ÁGUA PEPTONADA COM
INDICADOR DE pH AZUL DE BROMOTIMOL, ACRESCENTADO DE GLICOSE NA
CONCENTRAÇÃO FINAL DE 1% E UM TUBO DE DURHAN INVERTIDO DENTRO DO
TUBO (Figura 1). A FERMENTAÇÃO DA GLICOSE É VERIFICADA PELA VIRAGEM
DO INDICADOR PARA A COR AMARELA, E A PRODUÇÃO DE GÁS, PELA
FORMAÇÃO DE BOLHAS DENTRO DO TUBO DE DURHAN (Figura 2)
FIGURA 1:
ÁGUA PEPTONADA COM
INDICADOR DE pH E 1% DE
GLICOSE.
FIGURA 2:
ÁGUA PEPTONADA COM
INDICADOR DE pH E 1% DE
GLICOSE COM INÓCULO.
II – IMPORTÂNCIA CLÍNICA
AS ENTEROBACTÉRIAS SÃO UNIVERSALMENTE DISTRIBUÍDAS NO SOLO,
PLANTAS, NA ÁGUA E NO TRATO GASTROINTESTINAL DE HUMANOS E DOS
ANIMAIS. ALGUMAS ESPÉCIES SÃO ENCONTRADAS APENAS EM ALGUNS
NICHOS, COMO A SALMONELLA SOROTIPO TYPHI, QUE CAUSA FEBRE TIFÓIDE
E É ENCONTRADA APENAS EM HUMANOS, ENQUANTO OUTRAS SÃO
ENCONTRADAS UNIVERSALMENTE COMO A K. PNEUMONIAE.
AS ENTEROBACTERIACEAE PODEM SER ISOLADAS DE VÁRIOS SÍTIOS
INFECCIOSOS E SÃO RESPONSÁVEIS POR:
ABSCESSOS;
PNEUMONIA;
MENINGITES;
SEPTICEMIAS;
INFECÇÕES DE FERIDAS, TRATO URINÁRIO E TRATO GASTRINTESTINAL.
ALGUNS TAMBÉM SÃO CONSIDERADOS ENTEROPATÓGENOS POR CAUSAREM
PREFERENCIALMENTE INFECÇÕES GASTRINTESTINAIS, COMO A SALMONELLA
TYPHI, OUTRAS SALMONELLAS, SHIGELLA SPP., YERSINIA ENTEROCOLITICA E
VÁRIOS SOROTIPOS DE ESCHERICHIA COLI, EMBORA POSSAM TAMBÉM
CAUSAR INFECÇÃO EM OUTROS SÍTIOS.
AS PRINCIPAIS ENTEROBACTÉRIAS ISOLADAS EM IRAS, CONSTITUINDO
CERCA DE 99% DOS ISOLAMENTOS DE ENTEROBACTÉRIAS DE
IMPORTÂNCIA CLÍNICA, SÃO:
• ESCHERICHIA COLI;
• KLEBSIELLA SPP.;
• ENTEROBACTER SPP.;
• PROTEUS SPP.;
• PROVIDÊNCIA SPP.;
• MORGANELLA SPP.;
• CITROBACTER SPP.;
• SALMONELLA SPP.;
• SHIGELLA SPP.;
• SERRATIA SPP.;
AS ENTEROBACTÉRIAS QUE PREDOMINAM NAS IRAS SÃO:
• ESCHERICHIA COLI;
• KLEBSIELLA SPP.;
• ENTEROBACTER SPP.
AS ISOLADAS COM MENOR FREQUÊNCIA SÃO:
• EDWARDSIELLA SPP.;
• HAFNIA SPP.;
• YERSINIA SPP.
BASEADO EM DADOS DE PREVALÊNCIA E IMPORTÂNCIA
CLÍNICA, CONSIDERA-SE NECESSÁRIO QUE OS
LABORATÓRIOS DE MICROBIOLOGIA UTILIZEM
METODOLOGIA QUE PERMITA DISCRIMINAR COM 80% DE
ACERTO OS GÊNEROS E ESPÉCIES CONSIDERADOS ABAIXO:
• ESCHERICHIA COLI;
• SHIGELLA SPP.;
• SALMONELLA TYPHI;
• SALMONELLA SPP.;
• CITROBACTER FREUNDII;
• PROTEUS MIRABILIS;
• CITROBACTER KOSERI;
• KLEBSIELLA PNEUMONIAE;
• KLEBSIELLA OXYTOCA;
• PROVIDENCIA SPP.;
• SERRATIA SPP.;
• PROTEUS VULGARIS;
• ENTEROBACTER AEROGENES;
• ENTEROBACTER CLOACAE;
• ENTEROBACTER 
AGGLOMERANS;
• YERSINIA ENTEROCOLITICA;
• MORGANELLA MORGANII.
III – ISOLAMENTO
A AMOSTRA CLÍNICA DEVE SER ENVIADA 
IMEDIATAMENTE CLÍNICO APÓS A COLETA
EM CASOS ONDE NÃO É POSSÍVEL O ENVIO AO LABORATÓRIO EM NO MÁXIMO
ATÉ 2 HORAS, MANTER A AMOSTRA REFRIGERADA.
AMOSTRAS COLETADAS EM SWAB PODEM SER COLOCADAS EM MEIO DE
TRANSPORTE TIPO CARY-BLAIR E/OU MEIO DE AMIES.
AMOSTRAS DE SANGUE DEVEM SER IMEDIATAMENTE INOCULADAS EM
FRASCOS APROPRIADOS PARA HEMOCULTURA.
AS ENTEROBACTÉRIAS CRESCEM BEM EM MEIOS COMUNS DE CULTURA E
MEIOS SELETIVOS UTILIZADOS PARA O ISOLAMENTO DE BACILOS GRAM-
NEGATIVOS. A MAIORIA DELAS APRESENTA COLÔNIAS MAIORES DE 1 MM DE
DIÂMETRO, APÓS INCUBAÇÃO DE 18 A 24 HORAS A 35±2ºC, COM ASPECTO
OPACO, BRILHANTE, TRANSPARENTE OU MUCÓIDE.
A MORFOLOGIA DAS COLÔNIAS EM
ÁGAR MACCONKEY CONSTITUI UMA INFORMAÇÃO
IMPORTANTE, ORIENTANDO MUITAS VEZES O
DIAGNÓSTICO. ESTE MEIO CONTÉM VERMELHO-NEUTRO
COMO INDICADOR DE PH E, COMO RESULTADO, AS
COLÔNIAS QUE METABOLIZAM LACTOSE APARECEM EM
VERMELHO A PARTIR DA PRODUÇÃO DE ÁCIDOS MISTOS.
AS BACTÉRIAS PRODUTORAS DE ÁCIDOS FORTES,
COMO ESCHERICHIA COLI, FORMAM COLÔNIAS
VERMELHO-ESCURO (FIGURA 3). AS BACTÉRIAS
PRODUTORAS DE ÁCIDOS FRACOS FORMAM COLÔNIAS
ROSA-PÁLIDO OU COLÔNIAS QUE SÃO CLARAS NA
PERIFERIA E TÊM O CENTRO ROSADO (FIGURA 4).
FIGURA 3: COLÔNIAS EM AGAR MAcCONKEY (LACTOSE POSITIVO), 
APÓS 18 HORAS DE INCUÇÃO A 35+2ºC.
FIGURA 4: COLÔNIAS EM AGAR MAcCONKEY, NO MESMO TEMPO E 
TEMPERATURA (LACTOSE NEGATIVO).
IV – IDENTIFICAÇÃO
BASEIA-SE PRINCIPALMENTE NA PRESENÇA OU NÃO DE DIFERENTES
ENZIMAS CODIFICADAS PELO MATERIAL GENÉTICO DOS CROMOSSOMOS
BACTERIANOS. ESTAS ENZIMAS PARTICIPAM DO METABOLISMO BACTERIANO EM
DIVERSAS VIAS, QUE PODEM SER DETECTADAS POR MEIOS ESPECIAIS
UTILIZADOS EM TÉCNICAS DE CULTIVO IN VITRO. OS SUBSTRATOS COM OS QUAIS
ESSAS ENZIMAS PODEM REAGIR SÃO INCORPORADOS NO MEIO DE CULTURA,
JUNTO COM UM INDICADOR, QUE PODE DETECTAR A UTILIZAÇÃO DO
SUBSTRATO OU A PRESENÇA DE PRODUTOS METABÓLICOS ESPECÍFICOS.
SELECIONANDO-SE UMA SÉRIE DE MEIOS QUE AVALIEM DIFERENTES
CARACTERÍSTICAS METABÓLICAS DOS MICRORGANISMOS, É POSSÍVEL
ESTABELECER UM PERFIL BIOQUÍMICO PARA REALIZAR A IDENTIFICAÇÃO DA
ESPÉCIE.
A CARACTERIZAÇÃO DEFINITIVA DOS MEMBROS DAS ENTEROBACTERIACEAE
PODE REQUERER UMA BATERIA DE PROVAS BIOQUÍMICAS.
É POSSÍVEL EVITAR UMA CONSIDERÁVEL PERDA DE TEMPO
E IDENTIFICAÇÕES ERRÔNEAS SE FOREM REALIZADAS
ALGUMAS OBSERVAÇÕES PRELIMINARES PARA ASSEGURAR
QUE O CRESCIMENTO EM ESTUDO PERTENCE A ESSE
GRUPO. COM POUCAS EXCEÇÕES, TODOS OS MEMBROS
DE ENTEROBACTERIACEAE DEMONSTRAM AS SEGUINTES
CARACTERÍSTICAS:
 FERMENTAÇÃO DA GLICOSE;
 CITOCROMO OXIDASE NEGATIVA;
 REDUÇÃO DE NITRATO A NITRITO.
OS PASSOS IMPORTANTES A SEREM AVALIADOS PARA A IDENTIFICAÇÃO DAS
ENTEROBACTÉRIAS SÃO:
EXAME MACROSCÓPICO E MICROSCÓPICO DA CULTURA
O EXAME MACROSCÓPICO E MICROSCÓPICO DA CULTURA CONSTITUI A
PRIMEIRA ETAPA DA IDENTIFICAÇÃO DAS ENTEROBACTÉRIAS.
O EXAME MACROSCÓPICO DA CULTURA PERMITE UMA 
ANÁLISE DO TAMANHO, ASPECTO 
MORFOLÓGICO E COLORAÇÃO DA COLÔNIA EM MEIOS 
SIMPLES E SELETIVOS. ALÉM DISSO, PODE-SE CONSTATAR 
A PUREZA DA CULTURA, FUNDAMENTAL PARA A 
IDENTIFICAÇÃO DA ESPÉCIE. CULTURAS MISTAS OU 
CONTAMINADAS PODEM LEVAR A ERROS SIGNIFICATIVOS DE 
IDENTIFICAÇÃO. UMA ÚNICA COLÔNIA DEVE, PORTANTO, SER 
REPICADA PARA A REALIZAÇÃO DOS TESTES BIOQUÍMICOS. NO 
CASO DE HAVER MAIS DE UM TIPO DE COLÔNIA, OS 
DIFERENTES TIPOS DEVEM SER REPICADOS E ANALISADOS 
INDIVIDUALMENTE.
FIGURA 5 :
ÁGAR MACCONKEY COM COLÔNIAS DIFERENTES
O EXAME MICROSCÓPICO SE FAZ ATRAVÉS DA COLORAÇÃO DE GRAM,
OBSERVANDO-SE AS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS E TINTORIAIS DOS
BACILOS, E CONFIRMA A PUREZA DA CULTURA. PODE-SE REALIZAR TAMBÉM UM
EXAME A FRESCO, A PARTIR DE UMA CULTURA EM CALDO, COLOCANDO-SE UMA
GOTA DA CULTURA ENTRE LÂMINA E LAMÍNULA E OBSERVANDO AO
MICROSCÓPIO DE CAMPO ESCURO EM OBJETIVA DE 40X. DESTE MODO, PODE SE
VERIFICAR SE A BACTÉRIA É MÓVEL OU IMÓVEL, ALÉM DE SUGERIR O TIPO DE
MOVIMENTO,PERITRÍQUEO, NO CASO DAS ENTEROBACTÉRIAS
IDENTIFICAÇÃO BIOQUÍMICA
APÓS O EXAME MACROSCÓPICO E A CONFIRMAÇÃO DA PUREZA DA CULTURA,
UMA COLÔNIA PODE SER IDENTIFICADA COM A AJUDA DE MEIOS
PRESUNTIVOS DE IDENTIFICAÇÃO, TAIS COMO O MEIO DE TRIPLE
SUGAR IRON (TSI), EPM MILI E/OU RUGAI MODIFICADO POR PESSOA E SILVA
(MEIO DE IAL).
NÃO ESQUECENDO QUE A REAÇÃO DE OXIDASE NEGATIVA É UMA DAS 
CARACTERÍSTICAS DA FAMÍLIA ENTEROBACTERIACEAE, EXCETO PARA O 
GÊNERO PLESIOMONAS, RECENTEMENTE INCORPORADO A ESTA 
FAMÍLIA.
O MEIO DE IAL, NOVE REAÇÕES BIOQUÍMICAS SÃO OBSERVADAS EM UM ÚNICO
TUBO:
• FERMENTAÇÃO DA GLICOSE;
• PRODUÇÃO DE GÁS;
• FERMENTAÇÃO DA SACAROSE;
• DESAMINAÇÃO DO L-TRIPTOFANO;
• PRODUÇÃO DE INDOL;
• PRODUÇÃO DE SULFETO DE HIDROGÊNIO (H2S);
• HIDRÓLISE DA URÉIA;
• DESCARBOXILAÇÃO DA LISINA (LDC);
• MOTILIDADE.
OS RESULTADOS DEVEM SER CUIDADOSAMENTE INTERPRETADOS, SENDO QUE
CADA ESPÉCIE APRESENTA UM PERFIL CARACTERÍSTICO.O EXAME PRESUNTIVO
ACOMPANHADO DE PROVAS COMPLEMENTARES AUXILIA NA CONFIRMAÇÃO
DE UM GÊNERO OU ESPÉCIE. AS PROVAS COMPLEMENTARES GERALMENTE
NECESSÁRIAS SÃO A DESCARBOXILAÇÃO DA ORNITINA (ODC), ARGININA
DE-HIDROLASE (ADH), UTILIZAÇÃO DO CITRATO (SIMMONS), PROVA DA
DNASE E PROVA DE VOGES PROSKAUER (REAÇÃO DE VP), E, QUANDO
NECESSÁRIO, A FERMENTAÇÃO DE ALGUNS AÇÚCARES.
É RECOMENDADO QUE SE UTILIZE, NO MÍNIMO, ESTAS PROVAS; 
ENTRETANTO, PARA A IDENTIFICAÇÃO COMPLETA DE UMA ESPÉCIE, É 
NECESSÁRIO UMA SÉRIE CONTENDO ATÉ 47 TESTES.
A REAÇÃO DE VP DIVIDE AS ENTEROBACTÉRIAS EM DOIS GRANDES GRUPOS:
ESPÉCIES VP POSITIVAS (FIGURA 6) E ESPÉCIES VP NEGATIVAS (FIGURA 7).
EM GERAL, ENTRE OS MEMBROS MAIS COMUNS DA FAMÍLIA, AS ESPÉCIES VP
POSITIVAS PERTENCEM AOS GÊNEROS KLEBSIELLA, ENTEROBACTER E SERRATIA.
AS ESPÉCIES DOS
GÊNEROS SALMONELLA, SHIGELLA, PROTEUS, MORGANELLA, CITROBACTER, KLUY
VERA, PROVIDENCIA E A ESCHERICHIA COLI APRESENTAM REAÇÃO DE VP
NEGATIVA.
FIGURA 6 :
PROVA DE VOGES PROKAUER 
(POSITIVA) COR VERMELHA.
FIGURA 7 :
PROVA DE VOGES PROKAUER
(NEGATIVA) COR CASTANHA.
CARACTERÍSTICAS PARA O DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO E TRIAGEM DOS
GÊNEROS E ESPÉCIES DE ENTEROBACTÉRIAS MAIS COMUNS EM
MATERIAL CLÍNICO.
AS CEPAS DE E.COLI APRESENTAM DISTINTOS PERFIS EM MEIO PRESUNTIVO DE
IDENTIFICAÇÃO. ISTO SE DEVE À GRANDE VARIABILIDADE BIOQUÍMICA QUE
EXISTE ENTRE AS CEPAS, ESPECIALMENTE EM RELAÇÃO À PRODUÇÃO DE GÁS
A PARTIR DA FERMENTAÇÃO DA GLICOSE, FERMENTAÇÃO DA SACAROSE, LDC
E MOTILIDADE. NO ENTANTO, FERMENTAM A LACTOSE E PRODUZEM
INDOL, CARACTERÍSTICAS QUE PRATICAMENTE DEFINEM A ESPÉCIE (FIGURA
8).
FIGURA 8 – ESCHERICHIA COLI
ALGUNS PROBLEMAS DIFERENCIAIS PODEM SER OBSERVADOS ENTRE CEPAS
DE E.COLI, LDC NEGATIVA, CITROBACTER KOSERI (C.DIVERSUS) E C.
AMALONATICUS, OS QUAIS APRESENTAM UM PERFIL BIOQUÍMICO
IDÊNTICO, EM MEIOS PRESUNTIVOS DE IDENTIFICAÇÃO.
NESTE CASO, A UTILIZAÇÃO DO CITRATO É A PROVA QUE AUXILIA NA
DIFERENCIAÇÃO DESSAS ESPÉCIES. AS CEPAS DE E.COLI SÃO CITRATO
NEGATIVO, ENQUANTO AS OUTRAS ESPÉCIES SÃO CITRATO POSITIVO.
DE MODO SEMELHANTE, PODE SE UTILIZAR O CITRATO COMO PROVA
DIFERENCIAL ENTRE CEPAS DE KLEBSIELLA OXYTOCA UREASE NEGATIVA
(INDOL POSITIVO) COM CEPAS IMÓVEIS DE E.COLI.
CEPAS DE AEROMONAS TAMBÉM POSSUEM UM PERFIL SEMELHANTE AO DAS
CEPAS DE E.COLI NO MEIO DE IAL. NESTE CASO, A PROVA DA OXIDASE É
FUNDAMENTAL PARA DISTINGUIR ESTES MICRORGANISMOS.
A IDENTIFICAÇÃO DAS CEPAS DE E.COLI ISOLADAS DE SÍTIOS EXTRA-
INTESTINAIS DEPENDEM SOMENTE DA CARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA DA
ESPÉCIE.
O DIAGNÓSTICO DAS CATEGORIAS DIARREICOGÊNICAS DE E.COLI DEPENDE
TAMBÉM DA IDENTIFICAÇÃO DOS SOROTIPOS E DA PESQUISA DE FATORES DE
VIRULÊNCIA.
FIGURA 9 – SALMONELLA
CEPAS DE SALMONELLA PRODUZEM POUCO GÁS A PARTIR DA FERMENTAÇÃO
DA GLICOSE, SÃO EM GERAL LACTOSE NEGATIVAS, SACAROSE NEGATIVAS E
POSSUEM COMO UMA DAS PRINCIPAIS CARACTERÍSTICAS A PRODUÇÃO DE H2S
(FIGURA 9).
NO ENTANTO, ALGUMAS CEPAS DE DETERMINADOS SOROTIPOS PODEM
PRODUZIR POUCO OU NENHUM H2S. A LDC É UMA FORTE
CARACTERÍSTICA PARA DIFERENCIAR CEPAS DE SALMONELLA DAS
ESPÉCIES DE CITROBACTER H2S POSITIVO QUE SE APRESENTAM COM
MORFOLOGIA DE COLÔNIA MUITO SEMELHANTE EM ÁGAR SALMONELLA /
SHIGELLA (SS) - ( FIGURAS 10 E 11).
FIGURA 10 – COLÔNIAS DE SALMONELLA 
EM SS
FIGURA 11 – COLÔNIAS DE CITROBACTER 
FREUNDII H2S EM ÁGAR SS. 
EMBORA A MAIORIA DAS CEPAS DE SALMONELLA SEJA LDC POSITIVA, CEPAS
LDC NEGATIVAS PODEM OCORRER CAUSANDO PROBLEMA NA
IDENTIFICAÇÃO. PARA DIFERENCIAR ESTAS CEPAS (SALMONELLA LDC
NEGATIVA), PODE SER VERIFICADA A FERMENTAÇÃO DO GLICEROL.
A MAIORIA DAS CEPAS DE SALMONELLA NÃO FERMENTA O GLICEROL EM 18 A
24 HORAS, ENQUANTO QUE A MAIORIA DAS ESPÉCIES DE CITROBACTER H2S
POSITIVAS É FERMENTADORA DO GLICEROL EM 18 A 24 HORAS (FIGURA12).
FIGURA 12 – FERMENTAÇÃO 
DO GLICEROL
A AGLUTINAÇÃO COM ANTI-SORO POLIVALENTE SOMÁTICO (O) E FLAGELAR
(H) AUXILIA NA IDENTIFICAÇÃO PRESUNTIVA DO GÊNERO SALMONELLA.
A IDENTIFICAÇÃO DAS ESPÉCIES DE SALMONELLA DEPENDE DE TESTES
BIOQUÍMICOS ADICIONAIS E, PARA A DETERMINAÇÃO DOS SOROTIPOS, SÃO
UTILIZADOS ANTI-SOROS MONOVALENTES ESPECÍFICOS.
AS CEPAS COM SUSPEITA
DE SHIGELLA APRESENTAM UM PERFIL
BIOQUÍMICO MUITO HOMOGÊNEO E
CARACTERÍSTICO NOS MEIOS
PRESUNTIVOS DE IDENTIFICAÇÃO:
(FIGURA 13)
• RARAMENTE PRODUZEM GÁS;
• SÃO LDC NEGATIVAS E IMÓVEIS.
FIGURA 13 – SHIGELLA
OS SOROTIPOS DE SHIGELLA QUE PRODUZEM INDOL PODEM SER CONFUNDIDOS
COM E.COLI ENTERO-INVASORA (EIEC), POIS A GRANDE MAIORIA DAS CEPAS
EIEC É TAMBÉM LDC NEGATIVA E IMÓVEL. ALGUMAS PROVAS BIOQUÍMICAS
PODEM SEPARAR AS CEPAS DE EIEC DAS CEPAS DE SHIGELLA, COMO
APRESENTADO NO QUADRO 1. AMBAS SÃO CITRATO E MALONATO NEGATIVAS.
A CARACTERIZAÇÃO DAS ESPÉCIES
DE SHIGELLA EM S.DYSENTERIAE, S.FLEXNERI, S.BOYDII E S.SONNEI DEPENDE DE
TESTES BIOQUÍMICOS E DA DETERMINAÇÃO DOS SOROGRUPOS, UTILIZANDO
ANTI-SOROS ESPECÍFICOS DOS GRUPOS A, B, C, D, RESPECTIVAMENTE.
QUADRO 1 – PROVAS BIOQUÍMICAS PARA DIFERENCIAR EIEC DA 
SHIGELLA
ORGANISMOS
UTILIZAÇÃO DE 
ACETATO
URÉIA DE 
CHRISTENSEN
Utilização de xilose 
como fonte de carbono
SHIGELLA
ESCHERICHIA 
COLI
POSITIVAPOSITIVAPOSITIVA
NEGATIVANEGATIVANEGATIVA
O GÊNERO CITROBACTER POSSUI 11 
ESPÉCIES. TODAS AS ESPÉCIES SÃO 
LDC NEGATIVAS, CITRATO 
POSITIVAS E A MAIORIA FERMENTA 
A SACAROSE, A LACTOSE E O 
GLICEROL, CARACTERÍSTICAS QUE 
DIFERENCIAM AS ESPÉCIES 
DE CITROBACTER DE SALMONELLA.
AS ESPÉCIES 
DE CITROBACTER DIFERENCIAM-SE 
ENTRE SI PELA PRODUÇÃO DE H2S (6 
DAS ESPÉCIES SÃO H2S POSITIVAS), 
PRODUÇÃO DE INDOL, ODC, 
UTILIZAÇÃO DO MALONATO E A 
FERMENTAÇÃO DE VÁRIOS 
AÇÚCARES.
FIGURA 14 – CITROBACTER
FIGURA 15 – KLEBSIELLA
CEPAS DE KLEBSIELLA POSSUEM UM 
METABOLISMO MUITO ATIVO. SÃO 
VP POSITIVAS, FERMENTAM A 
MAIORIA DOS CARBOIDRATOS E 
COLÔNIAS MUCÓIDES, LACTOSE 
POSITIVA, SÃO EXTREMAMENTE 
COMUNS, SÃO IMÓVEIS E A MAIORIA 
DAS ESPÉCIES É LDC POSITIVA. A 
PRODUÇÃO DE UREASE É 
CARACTERÍSTICA DAS ESPÉCIES K. 
PNEUMONIAE E K. OXYTOCA, AS MAIS 
COMUNS EM MATERIAL CLÍNICO.
FIGURA 16 – ENTEROBACTER
FIGURA 17 – SERRATIA
UM DOS GÊNEROS QUE POSSUI O MAIOR 
NÚMERO DE ESPÉCIES (12). SÃO VP 
POSITIVAS, A MAIORIA DAS CEPAS DE 
TODAS AS ESPÉCIES SÃO MÓVEIS E 
EXTREMAMENTE VARIÁVEIS 
BIOQUIMICAMENTE. AS PRINCIPAIS 
CARACTERÍSTICAS DIFERENCIAIS 
ENTRE E. AEROGENES, ESPÉCIE LDC 
POSITIVA, E K. PNEUMONIAE SÃO A 
MOTILIDADE E A PRODUÇÃO DE 
UREASE. LDC, ODC E ADH SÃO 
EXCELENTES TESTES PARA TRIAGEM 
INICIAL DAS ESPÉCIES 
DE ENTEROBACTER.
OUTRO GÊNERO VP POSITIVO, AS 
CULTURAS DE SERRATIA EM MEIO 
PRESUNTIVO DE IDENTIFICAÇÃO 
SÃO MUITO SEMELHANTES AS CEPAS 
DE SALMONELLA SEM H2S. AMAIORIA 
É LDC POSITIVA, LACTOSE 
NEGATIVA E PRODUZ POUQUÍSSIMO 
GÁS A PARTIR DA FERMENTAÇÃO DA 
GLICOSE. A DNASE É UM TESTE 
FUNDAMENTAL PARA A 
IDENTIFICAÇÃO DE SERRATIA, E 
RECOMENDA-SE A UTILIZAÇÃO 
ROTINEIRAMENTE. AS CEPAS 
DE SERRATIASÃO DNASE, LIPASE E 
GELATINASE POSITIVAS. A AUSÊNCIA 
DA FERMENTAÇÃO DA ARABINOSE E 
MELIBIOSE DISTINGUE A S. 
MARCESCENS, ESPÉCIE MAIS 
COMUM, DAS OUTRAS ESPÉCIES 
DE SERRATIA.
OS GÊNEROS PROTEUS, MORGANELLA E PROVIDENCIA CARACTERIZAM-SE PELA
DESAMINAÇÃO DO TRIPTOFANO. DIFERENTE DOS OUTROS DOIS GÊNEROS, O
GÊNERO PROTEUS INVADE A SUPERFÍCIE DE MEIOS SÓLIDOS (SWARMING), É
GELATINASE E H2S POSITIVA (FIGURAS 18, 19 E 20).
A UREASE É POSITIVA PARA OS
GÊNEROS PROTEUS, MORGANELLA E PROVIDENCIA RETTGERI. O PROTEUS
MIRABILIS É INDOL E MALTOSE NEGATIVO E ODC POSITIVO, ENQUANTO QUE
O PROTEUS VULGARIS É INDOL E MALTOSE POSITIVO E ODC NEGATIVO.
FIGURA 18 – MORGANELLA FIGURA 19 – PROVIDENCIA
FIGURA 20 – PROTEUS
NOS QUADROS 2 E 3 PODEM SER OBSERVADAS AS PRINCIPAIS
CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS DAS ENTEROBACTÉRIAS.
CONSIDERAÇÕES FINAIS
PONTOS CRÍTICOS E A IMPROTÂNCIA DA CARACTERIZAÇÃO DAS ESPÉCIES:
• IDENTIFICAR CORRETAMENTE AS ESPÉCIES, PERMITINDO A DETECÇÃO OU
CONFIRMAÇÃO DE SURTOS, BENEFICIANDO AS AÇÕES DE VIGILÂNCIA;
• IDENTIFICAR ERRONEAMENTE AS ESPÉCIES PODE DETERMINAR FALSOS
SURTOS;
• IGNORAR UM POSSÍVEL SURTO POR FALTA DE IDENTIFICAÇÃO DAS CEPAS
ISOLADAS;
• DESCARTAR CEPAS ATÍPICAS DE UMA ESPÉCIE CONSIDERANDO-AS
CONTAMINANTES;
• DESCARTAR ESPÉCIES RARAS;
• REALIZAR CONTROLE DE QUALIDADE DOS MEIOS DE CULTURA E
REAGENTES UTILIZADOS NOS TESTES.
V – ARMAZENAMENTO
VI – RESISTÊNCIA
OS MICROBIOLOGISTAS DEVEM ESTAR ALERTA À POSSIBILIDADE DO
APARECIMENTO DE ENTEROBACTERIACEAE RESISTENTES A MÚLTIPLOS
ANTIBIÓTICOS.
OS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA BACTERIANOS PODEM SER INTRÍNSECOS
(JÁ PRESENTES EM TODAS AS AMOSTRAS DE DETERMINADA ESPÉCIE) OU
ADQUIRIDOS (DEVIDO À PRESENÇA DE MUTAÇÕES, AQUISIÇÃO DE
PLASMÍDEOS ETC). COMO OS PADRÕES DE RESISTÊNCIA INTRÍNSECOS A
DETERMINADOS ANTIBIÓTICOS JÁ SÃO SABIDAMENTE CONHECIDOS PARA
CADA ESPÉCIE BACTERIANA, NÃO HÁ NECESSIDADE DE SE TESTAR OU
REPORTAR ESTES ANTIMICROBIANOS.
ALGUNS EXEMPLOS DE RESISTÊNCIA INTRÍNSECA ENTRE AS 
ENTEROBACTÉRIAS ESTÃO DESCRITOS NO QUADRO 4.
OS MELHORES MEIOS DE ARMAZENAMENTO SÃO
CONGELAMENTO A -70°C EMTRYPTICASE SOY BROTH (TSB) COM
15% DE GLICEROL, LEITE DESNATADO E LIOFILIZAÇÃO.
PORTANTO, CONFORME EXPOSTO, A SELEÇÃO DE DROGAS
PARA O ANTIBIOGRAMA DEVERÁ SER DIRECIONADA PARA A
DETECÇÃO FENOTÍPICA DOS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA
ADQUIRIDOS. É IMPORTANTE LEMBRAR QUE O PERFIL DE
SENSIBILIDADE PODE VARIAR ENTRE ISOLADOS DA MESMA
ESPÉCIE, DEVIDO À AQUISIÇÃO DE DIFERENTES MECANISMOS
DE RESISTÊNCIA.
DENTRE OS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA ADQUIRIDOS MAIS
FREQÜENTES ENTRE AS ENTEROBACTÉRIAS, DESTACAM-SE OS
ASSOCIADOS À RESISTÊNCIA AOS Β-LACTÂMICOS, PELA HIPEREXPRESSÃO
DE Β-LACTAMASES CROMOSSÔMICAS OU PRESENÇA DE Β-LACTAMASES
DE ESPECTRO AMPLIADO (ESBL), ÀS FLUOROQUINOLONAS, PELAS
MUTAÇÕES NOS GENES GYRA E PARC, PRESENÇA DO GENE QNR, E AOS
AMINOGLICOSÍDEOS, PELA PRODUÇÃO DE ENZIMAS QUE MODIFICAM
ESTES AGENTES.
A RESISTÊNCIA A ALGUNS ANTIMICROBIANOS, ESPECIALMENTE β-
LACTÂMICOS, É FREQÜENTEMENTE ENCONTRADA EM ENTEROBACTÉRIAS
DE INFECÇÕES EM PACIENTES HOSPITALIZADOS. AMOSTRAS CLÍNICAS DE
ENTEROBACTÉRIAS, ESPECIALMENTE K. PNEUMONIAE E E. COLI, PODEM
PRODUZIR UMA ENZIMA MEDIADA POR PLASMÍDEOS DENOMINADA ESBL, A
QUAL HIDROLISA PENICILINAS, CEFALOSPORINAS E MONOBACTANS.
A PREVALÊNCIA DA PRODUÇÃO DESTA ENZIMA EM ENTEROBACTÉRIAS
VARIA DE ACORDO COM A ESPÉCIE E A REGIÃO GEOGRÁFICA ESTUDADA;
ENTRETANTO, EM DETERMINADOS CENTROS MÉDICOS BRASILEIROS AS
TAXAS DE ESBL EM E. COLI E K. PNEUMONIAE COLETADAS DE BACTEREMIAS
DE PACIENTES HOSPITALIZADOS PODEM ALCANÇAR APROXIMADAMENTE
7% E 50%, RESPECTIVAMENTE.
RELATOS DE ESBL ISOLADOS DE INFECÇÕES COMUNITÁRIAS
TAMBÉM FORAM RECENTEMENTE DESCRITOS POR
UM ESTUDO BRASILEIRO, NO QUAL APROXIMADAMENTE
1.5% DAS ENTEROBACTÉRIAS IDENTIFICADAS, INCLUINDO K.
PNEUMONIAE, E. COLI, PROVIDENCIA STUARTII, CITROBACTER
FREUNDII, E SERRATIA MARCESCENS PRODUZIAM ALGUM TIPO
DE ESBL.
AS AMOSTRAS BACTERIANAS PERTENCENTES AOS GÊNEROS CITROBACTER,
ENTEROBACTER, SERRATIA, MORGANELLA E ISOLADOS DE PROTEUS
VULGARIS SÃO RECONHECIDAMENTE PRODUTORES DE β-LACTAMASES
AmpC. ESTAS ENZIMAS SÃO CODIFICADAS PELO GENE AMPC, E SUA
PRODUÇÃO PODE SER INDUZIDA QUANDO ESTES ISOLADOS CLÍNICOS SÃO
EXPOSTOS A AGENTES Β-LACTÂMICOS. A HIPERPRODUÇÃO DESTA ENZIMA
PODE ACARRETAR HIDRÓLISE DE CEFALOSPORINAS, COMO CEFTAZIDIMA E
CEFTRIAXONA, OCASIONANDO FALÊNCIA TERAPÊUTICA DURANTE
TRATAMENTO COM ESTES AGENTES. AS CEFALOSPORINAS DE QUARTA
GERAÇÃO E OS CARBAPENENS SÃO MAIS ESTÁVEIS À HIDRÓLISE PELA
AmpC.
FENÓTIPOS DE RESISTÊNCIA INCOMUNS
É IMPORTANTE QUE O MÉDICO ASSISTENTE E O LABORATÓRIO DE
MICROBIOLOGIA CONSIGAM RECONHECER RESULTADOS INCOMUNS DE
TESTES DE SENSIBILIDADE ENTRE AMOSTRAS DE ENTEROBACTÉRIAS.
RELATOS DE RESISTÊNCIA A IMIPENEM E MEROPENEM, EM QUALQUER
ENTEROBACTÉRIA, DEVEM SER RE-CHECADOS PELO LABORATÓRIO.
É NECESSÁRIO NÃO SÓ REALIZAR NOVAMENTE O ANTIBIOGRAMA, COMO
TAMBÉM RE-IDENTIFICAR O ISOLADO CLÍNICO, PARA DESCARTAR
POSSÍVEIS CONTAMINAÇÕES COM OUTRAS ESPÉCIES BACTERIANAS.
QUANDO POSSÍVEL, O LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA DEVE UTILIZAR
UMA SEGUNDA METODOLOGIA DE TESTE DE SENSIBILIDADE, DE
PREFERÊNCIA QUE FORNEÇA A CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA MÍNIMA (CIM)
PARA IMIPENEM E/OU MEROPENEM PARA ESTES CASOS.
MEDIANTE CONFIRMAÇÃO DESTES FENÓTIPOS,
SUGERE-SE:
• DISCUTIR O RESULTADO COM O MÉDICO
ASSISTENTE E COM A EQUIPE DE CCIH DO
HOSPITAL EM QUESTÃO;
• ENVIAR A AMOSTRA A UM LABORATÓRIO DE
REFERÊNCIA EM MICROBIOLOGIA NO PAÍS.
ISOLADOS CLÍNICOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES À CARBAPENENS
JÁ FORAM IDENTIFICADOS NO BRASIL. OS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA
ASSOCIADOS A ALGUNS DESTES FENÓTIPOS FORAM CARACTERIZADOS
POR LABORATÓRIOS DE REFERÊNCIA EM MICROBIOLOGIA, INCLUINDO:
• ENTEROBACTER SPP. RESISTENTES A ERTAPENEM: HIPERPRODUÇÃO DE
AMPC E/OU PRODUÇÃO DE ESBLS; K. PNEUMONIAE COM
SUSCEPTIBILIDADE REDUZIDA A IMIPENEM E MEROPENEM: PRODUÇÃO
DE ESBLS ASSOCIADO A PERDA DE PROTEÍNA DE MEMBRANA EXTERNA
(PORINAS);
• K. PNEUMONIAE COM RESISTÊNCIA A IMIPENEM E MEROPENEM:
PRODUÇÃO DE ENZIMAS QUE DEGRADAM OS CARBAPENENS
(CARBAPENEMASES), DENOMINADAS KPC;
• K. PNEUMONIAE COM RESISTÊNCIA A IMIPENEM E MEROPENEM:
PRODUÇÃO DE ENZIMAS QUE DEGRADAM OS CARBAPENENS,
DENOMINADAS METALO-Β-LACTAMASES.
ALGUNS DOS TESTES ACIMA PARA DETECÇÃO DE MECANISMOS DE
RESISTÊNCIA SÃO REALIZADOS APENAS POR LABORATÓRIOS DE PESQUISA,
NÃO SENDO INCLUÍDOS NO LAUDO DO ANTIBIOGRAMA DO PACIENTE. É
IMPORTANTE RELEMBRAR QUE O CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS
INSTITUTE (CLSI) SOMENTE PRECONIZA, PARA INCLUSÃO EM LAUDOS DE
LABORATÓRIOS DE ROTINA, TESTES FENOTÍPICOS PARA PESQUISA DE ESBL
EM ENTEROBACTÉRIAS DENTRE OS MECANISMOS ACIMA CITADOS.
ANTIMICROBIANOS TESTADOS NA ROTINA
A ESCOLHA DOS ANTIMICROBIANOS A SEREM TESTADOS NOS
LABORATÓRIOS DE MICROBIOLOGIA CLÍNICA DE ROTINA BASEIA-SE NA
RECOMENDAÇÃO DE COMITÊS INTERNACIONAIS ESPECIALIZADOS.
NO BRASIL, O DOCUMENTO MAIS COMUMENTE UTILIZADO É O CLSI. ESTE
DOCUMENTO FORNECE PADRONIZAÇÕES DE DROGAS A SEREM INCLUÍDAS
NO ANTIBIOGRAMA DE ACORDO COM O MICRORGANISMO EM QUESTÃO E
O SÍTIO DE INFECÇÃO. EM CONJUNTO COM AS PADRONIZAÇÕES
ESTABELECIDAS PELO CLSI, A SELEÇÃO DO PERFIL ANTIMICROBIANO MAIS
ADEQUADO PARA ISOLADOS CLÍNICOS DE ENTEROBACTÉRIAS DEVE
CONTEMPLAR:
• DADOS LOCAIS DO PERFIL DE SENSIBILIDADE DAS ENTEROBACTÉRIAS;.
• CONSENSO DA EQUIPE MULTIDISCIPLINAR LOCAL ENVOLVIDA,
COMPOSTA PELOS MICROBIOLOGISTAS, FARMACÊUTICOS,CLÍNICOS E
CCIH, ETC;
• ANTIBIÓTICOS PRECONIZADOS E DISPONÍVEIS PARA USO EM CADA
INSTITUIÇÃO.
O TESTE DE DISCO DIFUSÃO EM ÁGAR É O MAIS FREQÜENTEMENTE
UTILIZADO PARA AVALIAR O PERFIL DE SENSIBILIDADE DE AMOSTRAS
CLÍNICAS NOS LABORATÓRIOS DE MICROBIOLOGIA DO BRASIL. SUGESTÕES
DAS DROGAS A SEREM TESTADAS ESTÃO LISTADAS NOS QUADROS 5 E 6 DE
ACORDO COM AS RECOMENDAÇÕES DO CLSI.
ALÉM DAS DROGAS LISTADAS NOS QUADROS 5 E 6, DEVE-
SE RESSALTAR A IMPORTÂNCIA DE TESTES PARA DETECÇÃO
FENOTÍPICA DE ALGUNS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA
PRESENTES ENTRE DETERMINADAS ENTEROBACTÉRIAS.
VÁRIOS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA PODEM ESTAR
PRESENTES ENTRE ESTES ISOLADOS CLÍNICOS, INCLUINDO:
• Hiperexpressão de β-lactamases AmpC;
• Presença de β-lactamases de espectro ampliado (ESBL);
• Hiperexpressão de bombas de efluxo;
• Mutações nos genes gyrA e parC associado a resistência às
fluoroquinolonas.
APESAR DA PRESENÇA DE ALGUNS DOS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA
SUPRACITADOS PODER SER INFERIDA PELO RESULTADO DO TESTE
FENOTÍPICO (ANTIBIOGRAMA), SOMENTE OS TESTES PARA DETECÇÃO DE
ESBLS SÃO PRECONIZADOS PELO CLSI PARA UTILIZAÇÃO EM
LABORATÓRIOS CLÍNICOS DE ROTINA.
Os testes fenotípicos para ESBL devem ser utilizados para:
• Todos os isolados de K. oxytoca, K. pneumoniae e E. coli, independente do
sítio de infecção;
• Isolados de Proteus mirabilis provenientes de sítios estéreis de infecção,
como sangue e líquor;
• A partir da identificação destas espécies pelo laboratório de
microbiologia, o perfil de sensibilidade (antibiograma) já contempla
automaticamente testes para a possível presença destas enzimas. Estes
testes, realizados pelos laboratórios de rotina, dividem-se em duas fases:
testes de triagem e testes confirmatórios para ESBL.
O CLSI preconiza que o teste de triagem seja realizado pelos métodos de
disco difusão (ágar Müeller-Hinton-MHA) ou microdiluição em caldo
(Müeller-Hinton caldo cátion ajustado-CAMHB).
Teste de triagem para detecção de ESBL pelo método de disco difusão:
Suspeita-se de cepa produtora de ESBL, quando são encontradas zonas de 
diâmetro referentes a:
Para K. pneumoniae, K. oxytoca e E. coli:
Cefpodoxima ≤ 17 mm;
Ceftazidima ≤ 22 mm;
Aztreonam ≤ 27 mm;
Cefotaxima ≤ 27 mm;
Ceftriaxona ≤ 25 mm.
Para P. mirabilis:
Cefpodoxima ≤ 22 mm;
Ceftazidima ≤ 22 mm;
Cefotaxima ≤ 27 mm.
Teste de triagem para detecção de ESBL pelo método de microdiluição em
caldo:
Suspeita-se de cepa produtora de ESBL para K. pneumoniae, K. oxytoca e E. coli,
quando ocorrer crescimento, ou seja, CIM ≥ 8 µg/mL para cefpodoxima ou CIM ≥ 2
µg/mL para ceftazidima, aztreonam, cefotaxima, ou ceftriaxona; e para P. mirabilis
CIM ≥ 2 µg/mL para cefpodoxima, ceftazidima, ou cefotaxima.
O laboratório deve empregar mais de um destes substratos para aumentar a
sensibilidade de detecção de ESBL no teste de triagem.
Caso a amostra bacteriana apresente um teste de triagem negativo para ESBL, este
resultado é liberado conforme o resultado obtido. Entretanto, caso o teste de triagem
seja positivo para ESBL, esta amosta será submetida a uma segunda e nova etapa, ou
seja, o teste confirmatório. Este teste baseia-se no fato destas enzimas serem inibidas
in vitro pelo ácido clavulânico. O teste é considerado positivo se houver aumento da
zona de inibição de uma ou mais cefalosporinas de espectro ampliado na presença
do ácido clavulânico.
O CLSI preconiza que o teste confirmatório seja realizado pelos métodos de disco
difusão (MHA) ou microdiluição em caldo (CAMHB).
Teste confirmatório para detecção de ESBL pelo método de disco difusão:
Todas as cepas produtoras de ESBL, apresentam aumento na zona de diâmetro na
presença do ácido clavulânico. Confirma-se como ESBL o microrganismo que
apresentar um aumento ≥ 5 mm na zona de diâmetro para um dos dois agentes
antimicrobianos testados em combinação com o ácido clavulânico versus a zona de
diâmetro de quando testado sozinho.
Exemplo: Ceftazidima com zona de diâmetro igual a 16 mm e
ceftazidima/ácido clavulânico com zona de diâmetro igual a 21 mm.
Resultado: ESBL positivo ou cefotaxima com zona de diâmetro igual a 20 mm
e cefotaxima/ácido clavulânico com zona de diâmetro igual a 26 mm.
Resultado: ESBL positivo.
Teste confirmatório para detecção de ESBL pelo método de microdiluição
em caldo:
Todas as cepas produtoras de ESBL apresentam menor crescimento na
presença de ácido clavulânico. Portanto, confirma-se como ESBL o
microrganismo que apresentar uma redução de três diluições para um dos
dois agentes antimicrobianos testados em combinação com o ácido
clavulânico versus a CIM de quando testado sozinho.
Exemplo: Ceftazidima com CIM igual a 8 µg/mL e ceftazidima/ácido
clavulânico com CIM igual a 1 µg/mL. Resultado: ESBL positivo ou cefotaxima
com CIM 32 µg/mL e cefotaxima / ácido clavulânico com CIM igual a 2 µg/mL.
Resultado: ESBL positivo.
Como referido acima, estas enzimas sabidamente hidrolisam 
todos os β-lactâmicos. Portanto, ao se deparar com um 
resultado positivo no teste confirmatório, o microbiologista 
deve reportar esta amostra como resistente a todas as 
cefalosporinas, penicilinas e monobactâmicos (aztreonam) 
incluídos no perfil de antibiograma.
Este procedimento é realizado independente do perfil de
sensibilidade in vitro inicial destes agentes. Por exemplo, se uma
amostra apresenta-se sensível à ceftriaxona; porém, com teste
confirmatório positivo para ESBL, o laboratório está autorizado a alterar o
resultado para “resistente”. O laudo desta amostra poderá ser liberado
com uma nota ou observação, informando que se trata de uma amostra
possivelmente produtora de ESBL. O relato de ESBL pelo laboratório
clínico representa, na prática, a impossibilidade de utilização de
quaisquer β-lactâmicos, à exceção dos carbapenens, para o tratamento
do microrganismo em questão.
Apesar do documento do CLSI não recomendar nenhum teste específico
para detecção de amostras produtoras de AmpC, este documento refere
que amostras de Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Morganella e Proteus
vulgaris podem desenvolver resistência durante terapias prolongadas
com cefalosporinas de terceira geração. Isolados clínicos inicialmente
sensíveis pelos testes de sensibilidade iniciais podem tornar-se
resistentes dias após o início da terapêutica antimicrobiana. Portanto,
é recomendado solicitar novas culturas após início do tratamento para
acompanhar a evolução do perfil de sensibilidade destas
enterobactérias.
VII - REFERÊNCIAS CONSULTADAS
1. Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de
Saúde. ANVISA. Disponível
em: http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/manuais/microbiologia.asp
2. 2. Medidas de prevenção e controle da resistência microbiana e programa de
uso racional de antimicrobianos em serviços de saúde. OPAS, ANVISA, Rede
RM, CGLAB/SVS/MS e Disciplina de Infectologia da UNIFESP, 2007.
3. 3. Murray PR. Manual of clinical microbiology. 9th ed. Washington: ASM Press;
2007.
4. 4. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. Fifteenth
Informational Supplement. CLSI document M100-S15. Pennsylvania; 2006.