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Universidade Federal do Rio de Janeiro – Polo de Duque de Caxias Graduação: Biotecnologia Disciplina: Metabolismo Código: XBQ235 Prof.: Isabel Caetano Aluno(a)s:__________________________________________________________ __________________________________________________________ ESTUDO DIRIGIDO II (ED II) 1) Sobre a regulação do complexo piruvato desidrogenase (PDH). Nos tecidos de animais mamíferos, a taxa de conversão do piruvato em acetil-CoA pelo complexo PDH é regulada pela razão entre o complexo PDH fosforilado inativo e não fosforilado ativo. Determinar o que acontece com a taxa dessa reação (aumenta, diminui ou cessa) quando uma preparação das mitocôndrias do músculo de coelho contendo o complexo PDH é tratado com: (a) piruvato desidrogenase quinase, ATP e NADH; (b) piruvato desidrogenase fosfatase e Ca2+; (c) malonato (inibidor da respiração celular). 2) Na oxidação de uma molécula de acetil-CoA pelo ciclo de Krebs, indicar a enzima que catalisa a reação onde há produção ou consumo de: a)CO2; b)GTP; c)NADH; d)FADH2; e)H2O. 3) Indicar a localização celular do ciclo de Krebs 4) Discutir a regulação do ciclo de Krebs em função das relações ATP/ADP e NAD+/NADH 5) Sobre a regulação da Citrato Sintase. Na presença de quantidades saturadas (abundantes) de oxaloacetato, a atividade da citrato sintase do tecido cardíaco de porco mostra uma dependência sigmóide a concentração de acetil-CoA, como mostrado no gráfico. Quando adicionado succinil-CoA, a curva se desloca para a direita e a a dependência sigmóide é mais pronunciada, com variação menor na atividade em função de maior disponibilidade (concentração) de substrato. Com base nessas observações, sugira como a succinil-CoA regula a atividade da citrato sintase. Por que a succinil-CoA é um sinal apropriado para a regulação da ciclo do ácido cítrico? Como a regulação da citrato sintase controla a taxa de respiração celular no tecido cardíaco de porco? 4) Relação entre Respiração e o Ciclo do Ácido Cítrico. Embora o oxigênio não participe diretamente no ciclo do ácido cítrico, o ciclo opera apenas quando o O2 está presente. Por quê? 5) Os compostos seguintes, localizados na membrana interna da mitocôndria, fazem parte de uma cadeia que transfere elétrons do NADH (E0’ = -0,315 V) para o oxigênio molecular, O2 (E0’ = +0,815 V): Coenzima ubiquinona - Q (E0’ = +0,04 V) Citocromo a-a3 (E0’ = +0,55 V) Citocromo b (E0’ = +0,06 V) Citocromo c (E0’ = +0,235 V) Citocromo c1 (E0’ = +0,215 V) Os potenciais de redução (E0’) destes compostos dão alguma indicação sobre a sequência que eles se encontram na cadeia de transporte de elétrons? Coloque-os em ordem de transferência de elétrons. 6) Uma suspensão de mitocôndrias foi incubada em diferentes condições, medindo-se a formação de NAD+, o consumo de oxigênio, a produção de ATP, e a diferença de pH entre o interior e o exterior da organela. Os resultados encontrados estão apresentados na tabela abaixo: Pelos dados na tabela, responda com SIM ou NÃO se é possível ocorrer: a. oxidação de NADH sem síntese de ATP. b. oxidação de NADH sem consumo de oxigênio. c. consumo de oxigênio sem síntese de ATP. d. consumo de oxigênio sem formação de gradiente de H+. e. consumo de oxigênio sem oxidação de NADH. 7) A Cadeia Respiratória (CR) e Fosforilação Oxidativa (FO) podem ser desacopladas por compostos químicos sintéticos, como 2,4 dinitrofenol (DNP) que aumentam a permeabilidade da membra mitocondrial interna a prótons ou por proteínas presentes na membrana mitocondrial. nomeie estas proteínas e discuta o seu papel em bebês e animais que hibernam em regiões frias. 8) A fotossíntese, realizada por células autotróficas fotossintetizantes, como plantas e cianobactérias, envolve duas etapas: Etapa fotoquímica e Etapa química. Cite as moléculas consumidas e produzidas em cada etapa. 9) Cite semelhanças e diferenças entre a fosforilação oxidativa e a fotofosforilação. Qual a principal forma de regulação destes processos? 10) Quais os órgãos principalmente envolvidos no metabolismo de aminoácidos? Quais as fontes de aminoácidos para utilização no catabolismo energético? 11) Qual a reação catalizada pela enzima glutamato desidrogenase e qual a sua importância para o catabolismo de aminoácidos? 12) Qual o cofator das enzimas transaminases? Explique o mecanismo de ação geral destas enzimas. 13) O metabolismo de aminoácidos, pode levar a formação de alguns intermediários ou precursores de intermediários do ciclo do ácido cítrico. Nomeie estas moléculas. 14) Um produto do metabolismo de aminoácidos é a molécula de amônia (NH3), que em pH fisiológico existe como o íon amônio (NH4+), um produto tóxico inadequado para ser liberado na corrente sanguínea. De que forma os tecidos que metabolizam aminoácidos direcionam este grupo amino para o fígado, onde serão metabolizados para excreção na forma de moléculas de uréia? 15) Qual o órgão responsável pela metabolização dos grupos amino provenientes dos tecidos que tenham utilizado aminoácidos para oxidação e obtenção de energia? Qual o nome do ciclo envolvido nesta metabolização, suas etapas e seu principal ponto de regulação?
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