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Microbiologia Clínica Profa.: Géssica Costa Mestre em Microbiologia – UFRGS Especialista em Microbiologia de Alimentos – UNOESC Biomédica - UNIPAR BACTERIOLOGIA 2 CONSIDERAÇÕES GERAIS: BACTÉRIAS: Reino Monera Estrutura: • Organismos simples • 0,2 a 2,0 μm de diâmetro e de 2 a 8 μm de comprimento. Unicelulares Procariontes • Ausência de carioteca • Presença de nucleóide BACTERIOLOGIA MORFOLOGIA BACTERIANA 3 Célula + Componentes celulares 4 CITOLOGIA BACTERIANA BACTERIOLOGIA 5 CITOLOGIA BACTERIANA BACTERIOLOGIA ESTRUTURAS FUNDAMENTAIS: Parede celular Membrana citoplasmática Citoplasma Ribossomos DNA ESTRUTURAS ACESSÓRIAS: Grânulos de inclusão Flagelo Glicocálice Pili Fímbrias Endósporo 6 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR • É uma estrutura complexa, semirrígida, responsável pela forma da célula. • A parede celular circunda a frágil membrana plasmática, protegendo-a e ao interior da célula das alterações adversas no ambiente externo. PRINCIPAL FUNÇÃO: 1. Suportar a pressão do citoplasma. 2. Manter a forma celular. 3. Servir de ancoragem para os flagelos. É alvo de ação de alguns antibióticos 7 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR COMPOSIÇÃO E CARACTERÍSTICAS: • É composta de uma rede macromolecular denominada peptideoglicano. Dissacarídeo Monossacarídeo NAG e NAM Esqueleto de carboidratos 8 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR GRAM POSITIVA x GRAM NEGATIVA 9 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR GRAM POSITIVAS: Movimentam cátions p/ dentro e fora da célula. Impedem a ruptura da parede. • Muitas camadas de peptideoglicano → estrutura espessa e rígida. Ácido teicóico carga negativa 10 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR GRAM NEGATIVAS: ↑ [ ] enzimas de degradação e proteínas de transporte • Uma ou poucas camadas de peptideoglicano. • Uma membrana externa. Periplasma 11 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR GRAM NEGATIVAS: Barreira para certos antibióticos (p. ex., penicilina), enzimas digestivas como a lisozima, detergentes, metais pesados, sais biliares... Carregada negativamente → dificulta fagocitose Porinas → permeabilidade 12 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR GRAM NEGATIVAS: LPS →ANTÍGENO!!! 13 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR 14 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR PAREDE CELULARES ATÍPICAS: Mycoplasma: • Não possuem parede celular. • Membrana plasmática com esteróis – proteção. • Menores bactérias conhecidas. 15 CITOLOGIA BACTERIANA PAREDE CELULAR PAREDE CELULARES ATÍPICAS: Mycobacterium sp.: Ácido micólico Hidrofóbico Carbofuscina → aquecimento Solúvel no ác. micólico e insolúvel ao álcool ácido. 16 CITOLOGIA BACTERIANAPAREDE CELULAR 17 CITOLOGIA BACTERIANA MEMBRANA PLASMÁTICA • 8 nm de espessura. • Reveste o citoplasma. • Envolve toda a célula. • Separa o meio interno do externo. • Não possui esteróis → menos rígidas. • Constituída principalmente por fosfolipídeos. Polimixina = fosfolipídeos 18 CITOLOGIA BACTERIANA MEMBRANA PLASMÁTICA FUNÇÕES: Barreira seletiva → concentra nutrientes e expulsa metabólitos. Permeabilidade: impede extravasamento, porta de entrada e saída de nutrientes. Digestão de nutrientes e produção de energia – enzimas, ATP. Sítio de ancoragem de ptnas – transporte. Separação do material genético. Síntese proteica. Ptna + fosfolipídeo → mobilidade Rigidez → hopanóides 19 CITOLOGIA BACTERIANA CITOPLASMA • Solução aquosa → aproximadamente 80% de água. • Espesso, semitransparente e elástico. • Delimitado pela membrana plasmática. • Estruturas citoplasmáticas não compartimentalizadas = ausência de organelas delimitadas por membrana. • Ausência de mitocôndria, complexo de Golgi, retículo endoplasmático e núcleo. 20 CITOLOGIA BACTERIANA CITOPLASMA ESTRUTURAS CITOPLASMÁTICAS: • DNA • Ribossomos • Corpúsculos de inclusão • Proteínas e lipídeos • Carboidratos • Íons inorgânicos Ocorrem a maioria das reações químicas da célula 21 CITOLOGIA BACTERIANA DNA CROMOSSOMAL • Constituída de uma única molécula de DNA dupla fita, longa e circular → cromossomo bacteriano! • Informações genéticas essenciais à sobrevivência da célula: genes para divisão celular, síntese de proteínas essenciais, entre outros genes. • Os cromossomos bacterianos não são circundados por um envelope nuclear (membrana) e não incluem histonas. O tamanho da célula bacteriana está relacionado com a quantidade de informação que ela carrega!! 22 CITOLOGIA BACTERIANA DNA PLASMIDIAL • Molécula de DNA dupla fita, pequena e circular. • Não está vinculado ao DNA cromossomal (nucleóide). • Replicação independente do DNA cromossomal. • Contem de 5 a 100 genes que geralmente não são cruciais para a sobrevivência da bactéria em condições ambientais normais. • Representa uma vantagem sob certas condições ambientais porque pode transportar genes que conferem resistência à antimicrobianos, tolerância a metais pesados, produção de toxinas e síntese de enzimas. Usado na manipulação genética em biotecnologia 23 CITOLOGIA BACTERIANA DNA PLASMIDIAL Plasmídeo F e F’: esse tipo de plasmídeo é responsável pela fertilidade das bactérias. Plasmídeo R (ou RTF): esse tipo de plasmídeo confere a resistência bacteriana aos antimicrobianos. Plasmídeo COL (ou colicinogênico): já este tipo está intimamente relacionado à fixação do nitrogênio no solo, ele é responsável por esta fixação. 24 CITOLOGIA BACTERIANA RIBOSSOMOS • Estruturas citoplasmáticas pequenas, responsáveis pela síntese de todas as proteínas da célula. • São encontrados em grande número em células crescendo ativamente, dando um aspecto granular ao citoplasma. São compostos de duas subunidades, cada uma constituída de proteína (40%) e RNA ribossômico (rRNA – 60%). Muitos antimicrobianos atuam inibindo síntese proteica nos ribossomos: gentamicina, eritromicina, clorafenicol. 25 CITOLOGIA BACTERIANA RIBOSSOMOS 26 CITOLOGIA BACTERIANA BACTERIOLOGIA ESTRUTURAS FUNDAMENTAIS: Parede celular Membrana citoplasmática Citoplasma Ribossomos DNA ESTRUTURAS ACESSÓRIAS: Grânulos de inclusão Flagelo Glicocálice Pili Fímbrias Endósporo 27 CITOLOGIA BACTERIANA INCLUSÕES CITOPLASMÁTICAS • Depósitos de reserva energética de composição química variável: • Amido/ glicogênio/ glicose • Lipídios (Bacillus, Mycobacterium); • Fosfato inorgânico: grânulos metacromáticos – síntese de ATP (Corynebacterium diphtheriae) • Enzimas • Enxofre • Vacúolos de gás - movimento 28 CITOLOGIA BACTERIANA INCLUSÕES CITOPLASMÁTICAS Magnetospirilllum agnetotacticum óxido de Fe = movimentação Grânulos de enxofre= reserva, doador de e- 29 CITOLOGIA BACTERIANA FLAGELOS • Apêndices celulares rígidos que propelem as bactérias • Estruturas de locomoção • Identificação bacteriana • Utiliza energia • Flagelo é ancorado na membrana citoplasmática Move a célula através da rotação do corpo basal 30 CITOLOGIA BACTERIANA FLAGELOS 31 CITOLOGIA BACTERIANA FLAGELOS 32 CITOLOGIA BACTERIANA IMPORTÂNCIA CLÍNICA: Aumentam a capacidade de colonização de novos ambientes e assim, a patogenia ao hospedeiro. Exp.: Escherichia coli e Proteus mirabilis na infecção urinária. Flagelos possuem capacidade antigênica devido à proteína flagelar antígeno H (identificação sorológica de Salmonella; E. coli O157:H7). FLAGELOS 33 CITOLOGIA BACTERIANA MOTILIDADE: FLAGELOS34 CITOLOGIA BACTERIANA • Feixes de fibrilas que se originam nas extremidades das células, sob uma bainha externa, e fazem uma espiral em torno da célula. • Movimento saca-rolha. FILAMENTOS AXIAIS Bactérias movam-se efetivamente através dos fluidos corporais. 35 CITOLOGIA BACTERIANA • Apêndices celulares semelhantes a pelos, mais finos, mais curtos e mais retos que os flagelos. • Variam em número. • Encontradas mais freqüentemente em Gram-negativos. • • Função: adesão aos mais variados tipos de superfícies. FÍMBRIAS BIOFILME BACTERIANO!!! 36 CITOLOGIA BACTERIANA FÍMBRIAS 37 CITOLOGIA BACTERIANA • Normalmente são mais longos que as fímbrias. • Há apenas um ou dois por célula. • Os pili estão envolvidos na mobilidade celular. • Movimentam a célula. PILI • Envolvidos na transferência de DNA célula/célula (conjugação), aproximando-as e permitindo a passagem do material genético. 38 CITOLOGIA BACTERIANA • O glicocálice bacteriano e um polímero viscoso e gelatinoso que está situado externamente a parede celular e é composto de polissacarídeo, polipeptídeo ou ambos. • É produzido dentro da célula e secretado para a superfície celular. GLICOCÁLICE Cápsula → Se o glicocálice está firmemente aderido à parede celular. Camada Viscosa → Glicocálice desorganizado, fracamente aderido à parede celular. 39 CITOLOGIA BACTERIANA FUNÇÕES: Aderência em superfícies. Resistência → reconhecimento do mecanismo de defesa do hospedeiro. Resistência à dessecação → glicocálice + H2O. O glicocálice em um biofilme→ é denominado substância polimérica extracelular (SPE). GLICOCÁLICE SPE: protege as células dentro do glicocálice, facilita a comunicação entre as células e permite a sobrevivência celular pela fixação a várias superfícies em seu ambiente natural. 40 CITOLOGIA BACTERIANA GLICOCÁLICE 41 CITOLOGIA BACTERIANA GLICOCÁLICE 42 CITOLOGIA BACTERIANA ENDOSPOROS: Um por célula Interno Resistência EXOSPOROS: Vários por célula Externos Reprodução ESPOROS 43 CITOLOGIA BACTERIANA ENDOPOROS: • São células desidratadas altamente duráveis, com paredes espessas e camadas adicionais. Eles são formados dentro da membrana celular bacteriana. • São metabolicamente inativos!!! IMPORTÂNCIA: → Podem sobreviver a temperaturas extremas, falta de agua e exposição a muitas substancias químicas tóxicas e radiação. ESPOROS 44 CITOLOGIA BACTERIANA ENDOPOROS: ESPOROS 45 CITOLOGIA BACTERIANA ENDOPOROS: A posição e forma dos endósporos auxilia na taxonomia bacteriana. ESPOROS Central Terminal Subterminal 46 CITOLOGIA BACTERIANA ENDOPOROS: ESPOROS 47 CITOLOGIA BACTERIANA ENDOPOROS: ESPOROS 48 CITOLOGIA BACTERIANAESPOROS 49 Obrigada pela Atenção!
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