AULA-3-Transcrição-de-RNA

Prévia do material em texto

TRANSCRIÇÃO DE RNA
RNA
• Origem a partir de um molde de DNA;
• Molécula responsável pela expressão da informação genética
RNA
Única cadeia;
Muito menor que o DNA Fosfato
Nucleotídeo de RNA
Adenina
Uracila
Citosina
Guanina
Ribose
Nitrogenada
RNA Ribossômico (RNAr)
• Sintetizado no nucléolo (genes codificadores);
• Agrega-se a proteínas específicas sintetizadas previamente no citoplasma = ribonucleoproteínas
• 80% do RNA total 
da célula;
RNA de Transferência (RNAt)
• É a menor molécula dos 3 tipos;
Correspondência entre os aminoácidos e os codons do mRNA
• 15% do RNA total da célula
RNA transportador (RNAt)
Local onde o
 aminoácido se liga
Anticódon
RNA Mensageiro (RNAm)
• Molécula resultante da transcrição do DNA;
• Transportador da informação genética;
• 5% do total de RNA da célula
TRANSCRIÇÃO
• Síntese de uma molécula de RNA a partir de um molde de DNA chama-se transcrição
RNA transcrito
Direção da ' -transcrição
TRANSCRIÇÃO
• [RNA] é associada a atividade metabólica da célula;
• São sintetizados em regiões específicas e bem delimitadas do DNA 
TRANSCRIÇÃO
• Cadeia de DNA molde (anti-senso) Sentido 3' - 5'
• Cadeia de DNA codificadora/não molde
3' OH do resíduo de ribose do 1° nucleosídeo trifosfato percursor
J
5' fosfato de nuclesídeo trifosfato seguinte
Desenrola a dupla fita de DNA e reenrola o que já foi transcrito;
Não precisa de iniciadores; 
Sentido 3'-5' - Filamento Molde
LIGAÇÃO
FOSFODIÉSTER
SENTIDO 5' ^ 3'
J
RNA
TRANSCRIÇÃO
• Senso ou codificante = mRNA
•Anti-senso ou molde = complementar ao do mRNA
• Gene: 5' - 3' como o mRNA
 
As Três RNA-Polimerases das Células Eucarióticas
	RNA-polimerase I - transcreve os genes para rRNA.
	RNA-polimerase II - transcreve todos os genes que codificam proteínas, mais alguns genes que codificam pequenos RNAs
	RNA-polimerase III – transcreve os genes de tRNAs rRNA 5S e genes para pequenos RNAs estruturais.
(
)
	 Procariontes: 
permitir que as células se ajustem às mudanças nutricionais no ambiente, de forma que o seu crescimento e divisão sejam otimizados.
	 Eucariontes: 
regula um programa genético fundamental para o desenvolvimento embrionário e a diferenciação.
Objetivos da regulação da expressão gênica em procariontes e eucariontes
Diferenças na Iniciação da Transcrição em Eucariotos e Bactérias
	Enquanto as bactérias contêm um único tipo de RNA-polimerase, as células eucarióticas apresentam três: RNA-polimerase I, RNA-polimerase II e RNA-polimerase III.
 
	A RNA-polimerase bacteriana é capaz de iniciar a transcrição sem o auxílio de proteínas adicionais. 
	As RNA-polimerases eucarióticas requerem a ajuda de um grande conjunto de proteínas chamadas fatores gerais de transcrição. GFTII ou FTII 
Diferenças na Iniciação da Transcrição em Eucariotos e Bactérias
	Em bactérias os genes são freqüentemente controlados por uma única seqüência regulatória, tipicamente localizada próxima ao promotor.
	A iniciação da transcrição em eucariotos deve levar em consideração a compactação do DNA nos nucleossomos e as formas mais compactas da estrutura da cromatina. Em eucariotos as proteínas reguladoras da expressão gênica (repressores e ativadores) podem influenciar a iniciação da transcrição, mesmo quando estão ligadas ao DNA a milhares de pares de nucleotídeos distante do promotor.
TRANSCRIÇÃO
• FASES DA TRANSCRIÇÃO
INICIAÇÃO
ALONGAMENTO/
—AMPLIAÇÃO
TERMINAÇÃO
TRANSCRIÇÃO
INICIAÇÃO
• Inicia-se nas regiões "promotores" -reconhecido pela RNA poli II
Sequências consenso - mesma sequência de
nucleotídeos
10 a 15 pares de base
*
TRANSCRIÇÃO
INICIAÇÃO
Região promotora
5'
-30 pb
3’
TATA boxe sítio do primeiro evento na transcrição 
TF Fatores de transcrição
FUNÇÃO
Estimular a ligação da RNA pol II na região promotora
Procariontes: fator de início sigma, forma complexo RNA poli II= holoenzima (- 35 e -10) Eucariontes TATA box (-30) e Fatores gerais de transcrição GTFs, TFIID reconhecimento; TFIIH hidrolise da ATP desnaturação do promotores
*
Formação do complexo aberto
Reconhecimento
Estabilização 
TATA box + Binding protein 
Controla a transição e hidrolise de de ATP e desnaturação do SP
Recrutamento TFIIH
TFIIH desnaturação do sitio promotor
*
TRANSCRIÇÃO
ALONGAMENTO/
AMPLIAÇÃO
Polimerização dos RNAs, pela sequência do DNA molde (complementariedade de bases);
 TRANSCRIÇÃO
TERMINAÇÃO
• Determinada pela sequência de DNA -reconhecido por uma proteína de terminação - fator p.
*
Maturação do RNAm/ Splicing
Gene em mosaico
Exon Intron
Pré-RNAm
Splicing
RNAm funcional' (somente éxons)
ti
Codificam aa
Éxons e íntrons
MATURASES
/
Tradução
Sem significado proteico
LIGASES
TTT íntrons 
descartados
Proteína
Maturação do RNAm
Revestimento CAP:
a) Protege da degradação
b) Sinal para tradução
c) Transporte
Cauda Poli A:
a) transporte do mRNA
b) lentamente degradada estabilidade
c) reconhecimento pelo complexo de tradução.
5 UTR \
Região Codificadora
3'UTR
/
3
G-0--0-0—[
CAP
Códon de parada
Cauda poli-A
	- | Complexo éxon-junction
	AUG-	tnicio
CAP capeamento
*
Maturação do RNAm/ Splicing
Maturação do RNAm/ Splicing
Splicing Alternativo
Humanos: menos de 26 mil genes e mais de 100 mil proteínas!
Gnie
lExon KXÚII
L 1 n
Exon
Kxoit
4
mRNA
EO
Alternative Splicing
mRNA
TTTTT
Ü_UJ_4-
Protein A
Protein B
TRANSCRIÇÃO
Transcrição em Eucariotos
Mais complexa porque:
1) Dificuldade para encontrar o sítio de inicialização
	Eucariotos têm muito mais genes que procariotos
	Há mais DNA não codificante em eucariotos
	Os genes são mais afastados uns dos outros
	A transcrição e a tradução são separadas pelo núcleo: processamento do pré-mRNA
3) O DNA genômico está organizado em cromatina nos eucariotos
https://www.youtube.com/watch?v=lnb_sdyaV7s
*